玉米杂交方法与步骤
玉米由于是单性花、异花授粉,因此在杂交时,不需要去雄,因而也不需要整穗。其杂交方法和步骤主要为调节开花期、选株、隔离、采粉、授粉和收获等。 调节开花期:玉米由于单性花,在调节开花期方面,必须使母本的雌穗和父本的雄穗的花期一致。可用分期播种的方法调节父、母本的花期。 选株:父、母本均应选择生长健壮、无病虫害和具有本品种典型性状的植株,作为杂交对象。 套袋隔离:当母本植株的雌穗已经露出而没有伸出柱头以前,用牛皮纸袋套好雌穗。当母本雌穗开始抽出柱头时,要在当天用牛皮纸袋套在父本植株的雄穗上,雌、雄穗的纸袋,要用细绳或回形针扎紧,以免脱落。 采粉:从上述玉米的开花习性中可以知道,其雄穗在始花后的第2~4天内开花最多,进入盛花期,一天中开花最多的时间是上午8~10时,而此时花粉的生活力也最强;雌穗在始花后的第2~4天,处于盛花期,柱头已基本抽齐。因此,采粉时间应选择父、母本的盛花期、并选择上午8~10时进行采粉。采集花粉时,将父本雄穗稍稍......阅读全文
玉米杂交方法与步骤
玉米由于是单性花、异花授粉,因此在杂交时,不需要去雄,因而也不需要整穗。其杂交方法和步骤主要为调节开花期、选株、隔离、采粉、授粉和收获等。 调节开花期:玉米由于单性花,在调节开花期方面,必须使母本的雌穗和父本的雄穗的花期一致。可用分期播种的方法调节父、母本的花期。 选株:父、母本均应选择生长健壮、无
DNA斑点杂交方法步骤
①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干,密封保存备用。
Southern杂交技术的方法和步骤
Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:(1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。(2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。(3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。(4) 让探针与
southern印迹杂交的方法步骤
以哺乳动物基因组DNA为例,介绍Southern印迹杂交的基本步骤。一、 待测核酸样品的制备(一)制备待测DNA基因组DNA是从动物组织(或)细胞制备。1.采用适当的化学试剂裂解细胞,或者用组织匀浆器研磨破碎组织中的细胞;2.用蛋白酶和RNA酶消化大部分蛋白质和RNA;3.用有机试剂(酚/氯仿)抽提
Northern杂交技术的方法和步骤
Northern杂交与Southern杂交很相似。主要区别是被检测对象为RNA,其电泳在变性条件下进行,以去除RNA中的二级结构,保证RNA完全按分子大小分离。变性电泳主要有3种:乙二醛变性电泳、甲醛变性电泳和羟甲基汞变性电泳。电泳后的琼脂糖凝胶用与Southern转移相同的方法将RNA转移到硝酸纤
Southern杂交步骤
Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:(1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。(2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。(3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。(4) 让探针与
斑点杂交技术的方法和步骤
斑点杂交是指将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素滤膜上,然后与核酸探针分子杂交,以显示样品中是否存在特异的DNA或RNA。同一种样品经不同倍数的稀释,还可以得到半定量的结果。所以它是一种简便、快速、经济的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因诊断中经常用到,是研究基因表达的有力工具。但由于目的
“杰出”的玉米是如何杂交的?
作物的杂交后代比它的双亲表现出更大的生物量、更强的抗逆性、更高的产量,这就是杂种优势。百余年来,遗传学家一直在苦苦探寻其背后的遗传学机理,寻找能让后代比双亲更“杰出”的基因位点,却难以揭开其神秘的面纱。 近日,我国科学家在构建玉米核心自交系泛基因组、解析玉米杂种优势形成机理方面取得重要进展。评
核酸杂交的步骤
(1)制备样品:首先需要从待检测组织样品提取DNA或RNA。DNA应先用限制性内切酶消化以产生特定长度的片段,然后通过凝胶电泳将消化产物按分子大小进行分离。一般来说DNA分子有其独特的限制性内切酶图谱,所以经酶切消化和电泳分离后可在凝胶上形成特定的区带。再将含有DNA片段的凝胶进行变性处理后,直接转
菌落原位杂交技术的方法和步骤
对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落(100-200)进行克隆筛选时,可采用本方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张硝酸纤维素滤膜上。经培养一段时间后,对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。1、材料:待检测的细菌平皿,已标记好的探针,硝酸纤维素滤膜等。
分子杂交技术Northern杂交的操作步骤
(1)RNA经变性电泳完毕后,可立即将乙醛酰RNA转移至硝酸纤维素滤膜上。转移方法与转移DNA的方法相似。 (2)转移完毕后 ,以6×SSC溶液于室温浸泡此膜5分钟,以除去琼脂糖碎片。 (3)将该杂交膜夹于两张滤纸中间,用真空烤箱于80℃干燥0.5-2小时。 (4) 用下列两种溶液之一进行
分子杂交技术Southern杂交的操作步骤
(1) 约50μl体积中酶切10pg-10μg的DNA, 然后在琼脂糖凝胶中电泳12-24小时(包括DNA分子量标准物)。 (2) 500ml水中加入25μl 10mg/ml溴化乙锭,将凝胶放置其中染色30分钟, 然后照相。 (3) 依次用下列溶液处理凝胶,并轻微摇动: 500ml 0.2m
中美科学家揭示玉米杂交机制
由中国农业大学玉米中心、华大基因研究院、美国爱荷华大学、明尼苏达大学等单位合作的研究成果“基因丢失与获得的多态变化揭示玉米中的杂交优势的机制”近日在国际著名杂志《自然—遗传学》上发表。该研究报道了中国重要玉米骨干亲本的全基因组的单核苷酸多态性、插入/缺失多态性以及基因获得和缺失变异图谱
分子杂交技术斑点杂交的操作步骤
(1) 10μl样品与20μl 100%甲酰胺、 7μl 37%甲醛、2μl 20×SSC混合。混合置于68℃,15分钟后置冰浴中。 (2) 用0.1mol/L NaOH清洗点样器,再用无菌水充分冲洗。将一张经20×SSC浸润的滤纸铺在点样器上,上面再铺上一张经20×SSC浸润1小时的硝酸纤维
简述核酸杂交的步骤
(1)制备样品:首先需要从待检测组织样品提取DNA或RNA。DNA应先用限制性内切酶消化以产生特定长度的片段,然后通过凝胶电泳将消化产物按分子大小进行分离。一般来说DNA分子有其独特的限制性内切酶图谱,所以经酶切消化和电泳分离后可在凝胶上形成特定的区带。再将含有DNA片段的凝胶进行变性处理后,直
原位杂交实验步骤
原位杂交实验步骤 一质粒制备1质粒的转化和扩增1.1制备XL1-Blue感受态细菌1. 取400uL XL1-Blue菌种加入到含200ml LB培养基的锥形瓶中,37 ℃、100rpm培养4h,离心,倒置,以冰冷的0.1 mol/L CaCl_2重悬细菌,冰浴30 min,离心,弃上清,倒置,再加
Northern杂交步骤和过程
Northern杂交与Southern杂交很相似。主要区别是被检测对象为RNA,其电泳在变性条件下进行,以去除RNA中的二级结构,保证RNA完全按分子大小分离。变性电泳主要有3种:乙二醛变性电泳、甲醛变性电泳和羟甲基汞变性电泳。电泳后的琼脂糖凝胶用与Southern转移相同的方法将RNA转移到硝酸纤
原位杂交实验步骤
原位杂交实验步骤一质粒制备1质粒的转化和扩增1.1制备XL1-Blue感受态细菌1. 取400uL XL1-Blue菌种加入到含200ml LB培养基的锥形瓶中,37 ℃、100 rpm培养4h,离心,倒置,以冰冷的0.1 mol/L CaCl_2重悬细菌,冰浴30 min, 离心,弃上清,倒
Northern杂交分析操作步骤
【操作】1.RNA的提取见前。2.变性胶的制备:取琼脂糖0.2g,加入 DEPC H2O 12.4ml,加热熔化,冷却至 60℃时加入5×甲醛凝胶电泳缓冲溶液4.0 、37%甲醛3.6ml、混匀、制胶。待胶凝固后,置于1×甲醛凝胶电泳缓冲溶液中预电泳5min。3.样品制备 取总RNA4.5 ,加入5
玉米水分烘箱测量基本步骤
玉米水分含量烘箱检测方法仪器:天平、烘箱、粮食粉碎机、干燥器、铝盒步骤烘干铝盒:调节烘箱温度至105℃,取洁净空铝盒放在烘箱内的烘网上,烘干30min至1h。取出后置于干燥器内冷却至室温,取出称量;再烘30min,置于干燥器内冷却至室温,取出称量。烘干至前后质量差不超过0.005g为止,即为质量恒定
我国克隆首个玉米单向杂交不亲和基因
记者从中国科学院遗传与发育生物学研究所获悉,该所陈化榜研究组与周奕华研究组及薛勇彪研究组合作,在玉米单向杂交不和基因研究领域取得突破,首次克隆了控制玉米单向杂交不亲和现象的基因ZmGa1P,并对其不亲和机理进行了探究。该成果于2018年9月10日在Nature Communications杂志上
新策略提高糯玉米杂交育种效率
糯玉米是一种产生支链淀粉的具有重要食用与工业价值的特用玉米。近年来市场对糯玉米需求量的增加推动了糯玉米种质的改良与研究工作。近日,安徽农业大学与中国农业科学院作物科学研究所合作,于《作物学报》(英文版)在线发表最新研究成果。他们利用目标性状定向突变策略较快地获得了糯性亲本及糯性杂交种。 论文通
荧光原位杂交实验步骤
荧光原位杂交实验步骤1)探针变性将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5~10min,使双链DNA探针变性。2)标本变性①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。 ②取出玻片标本,将其浸在70~75
核酸杂交的技术操作步骤
(1)制备样品:首先需要从待检测组织样品提取DNA或RNA。DNA应先用限制性内切酶消化以产生特定长度的片段,然后通过凝胶电泳将消化产物按分子大小进行分离。一般来说DNA分子有其独特的限制性内切酶图谱,所以经酶切消化和电泳分离后可在凝胶上形成特定的区带。再将含有DNA片段的凝胶进行变性处理后,直接转
关于核酸杂交的步骤介绍
(1)制备样品:首先需要从待检测组织样品提取DNA或RNA。DNA应先用限制性内切酶消化以产生特定长度的片段,然后通过凝胶电泳将消化产物按分子大小进行分离。一般来说DNA分子有其独特的限制性内切酶图谱,所以经酶切消化和电泳分离后可在凝胶上形成特定的区带。再将含有DNA片段的凝胶进行变性处理后,直
原位杂交实验操作步骤
一质粒制备1质粒的转化和扩增1.1制备XL1-Blue感受态细菌1.取400uLXL1-Blue菌种加入到含200mllb培养基的锥形瓶中,37℃、100rpm培养4h,离心,倒置,以冰冷的0.1mol/LCaCl_2重悬细菌,冰浴30min,离心,弃上清,倒置,再加4ml(含15%甘油)冰冷的Ca
分子杂交仪的操作步骤
1. 通电预热 [2] 接通电源线、打开电源开关、恒温室温度显示、应显示室温值,按温度预热20分钟后,恒温室将处于恒温状态。 2. 安装杂交管 旋转门锁、打开玻璃门、向下点动旋转、步进开关、使杂交支架旋转到合适的位置,将杂交管卡紧在旋转支架上,关上玻璃门并锁紧。 3. 启动旋转支架 向
关于Southern杂交的步骤介绍
1.将标记的DNA探针置沸水浴10min,迅速置冰上冷却1-2min,使DNA变性。 2.从水浴中取出含有滤膜和预杂交液的塑料袋,剪开一角,将变性的DNA探针加到预杂交液中。 3.尽可能除取袋中的空气,封住袋口,滞留在袋中的气泡要尽可能地少,为避免同位素污染水浴,将封好的杂交袋再封入另一个未
分子杂交技术菌落原位杂交的实验操作步骤
1. 将少数菌落转移到硝酸纤维素滤膜上: (1) 在含有选择性抗生素的琼脂平板上放一张硝酸纤维素滤膜。 (2) 用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上,再转移至含有选择性抗生素但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种(或打点)。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。最后,在滤膜和主
玉米水分测量仪使用步骤
1、将仪器放在平稳的操作台上链接电源依次放入三角架托盘托架然后开机 2、按一下设置键左侧 + 百位 + 个位 打印 个位进行温度设置再次按设置键进行判别时间设置在次按设置键左侧恢复0.00 3、开机后仪器左侧显示0.00按下校准键用镊子放置20g砝码再次按校准键仪器左侧显示 20.00±0.