NatNeurosci|复旦马兰组解密可卡因记忆中的印迹细胞

在1904年德国科学家Richard Semon利用 “印迹(engram)”这一专有名词来描述大脑中记忆的特点。印迹细胞在记忆中的作用越来越受到关注了。研究表明齿状回(DG)中的印迹细胞在特定场景中恐惧记忆提取过程中特定被激活。抑制或敲除印迹细胞可扰乱恐惧记忆的存储,而通过光化学或化学方法人工激活记忆印迹时,即便是在不相关的环境中也会诱发恐惧的表达。因此印迹细胞在记忆存储和提取过程中的关键作用。 系列证据表明神经回路中的印迹细胞之间的连接可能参与记忆的形成和恐惧记忆的提取。在恐惧条件下,内嗅皮层-DG-CA3回路中的印迹细胞与印迹细胞的连接是在恐惧训练中特定形成的。 2019年11月12日,复旦大学脑科学研究院马兰课题组在Nature Neuroscience杂志上发表长文A ventral CA1 to nucleus accumbens core engram circuit mediates conditione......阅读全文

蛋白质免疫印迹贴壁细胞蛋白提取的介绍

  1)所需器材:制冰机、细胞刮刀、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、两个大冰盒、手套、长满细胞的培养瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、滤纸、离心机、烧杯、4×SDS凝胶上样缓冲液、二硫苏糖

核移植胚胎干细胞的印迹基因甲基化研究

核移植来源的胚胎干细胞(NTES  cells)在以干细胞为基础的细胞治疗中扮演着非常重要的角色,得到全能性良好且表观遗传修饰正常的核移植胚胎干细胞是解决治疗性克隆安全问题的重要前提。DNA甲基化修饰在基因表达和印迹基因的表达中起非常重要的作用,两步法克隆可能存在的不完全重编程问题很可能存在于印

用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂

基本方案             实验方法原理 去垢剂裂解细胞法通常用于培养的动物细胞。典型的离子型去垢剂SDS(如2%SDS)能充分地裂解细胞。培养的动物细胞和细菌,如可以使用这种

研究称服用可卡因会快速改变大脑构造

  据英国广播公司8月25日报道,美国研究人员表示,服用可卡因后大脑构造会在数小时内发生改变,成为吸毒上瘾的第一步。   《自然—神经科学》(Nature Neuroscience)期刊发表的报告说,实验显示,动物服用可卡因后不久,与学习和记忆有关的新结构开始生长。大脑发生变化最多的小白鼠显示

父代大鼠可卡因成瘾-可增加其后代成瘾风险

  可卡因、海洛因等毒品能激活脑内的奖赏系统,产生欣快的感觉,并引起脑组织的损伤和长期病变,导致成瘾。毒品一旦成瘾,很难戒除,对滥用者自身造成严重的躯体和精神危害,破坏家庭和社会的安定。毒品成瘾会不会影响后代的健康呢?复旦大学脑科学研究院、医学神经生物学国家重点实验室马兰教授研究团队发现,大鼠对可卡

高效液相色谱法检测可卡因的原理简介

  高效液相色谱法,高效液相色谱的原理与气相色谱相对,可对热不稳定、不易挥发、具有大分子量的各种毒品进行分离检测,常用的检测器有紫外检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器等。色谱/质谱联用分析法,使用GC/MS或者HPLC/MS进行毒物和药物的鉴定巳经成为国际上公认的标准方法,也是向法庭提供鉴定结果的

BBR:锻炼或能帮助有效战胜可卡因成瘾性

  近日,一项刊登在国际杂志Behavioural Brain Research上的研究报告中,来自布法罗大学的科学家们通过研究发现,锻炼或能帮助有效抑制机体可卡因成瘾性的复发。  研究者Panayotis Thanos表示,可卡因成瘾性通常表现为个体不断经历恢复和复发的往复循环,同时伴随有压力和消

美研究发现:-可卡因会快速改变大脑结构

新研究让人们对毒品上瘾的原理有了更深入的认识   近日据BBC报道,美国科研人员研究发现,服用可卡因后大脑结构会在数小时内改变,成为吸毒上瘾的第一步,研究表明,小鼠服用可卡因不久之后,与学习和记忆相关的新结构就开始生长。这项研究表明了大脑是如何去学习和了解毒品的,让人们对毒品上瘾的原理有了更深入的

J-neurosci:这项研究揭示可卡因上瘾的内在机制

  在最近出版的《Journal of Neuroscience》杂志上,南卡罗来纳州医科大学和美国国立卫生研究院的研究人员描述了吸毒提醒如何改变负责动机的特定脑细胞,从而增加了寻求药物的欲望。这些与其他脑细胞之间的联系会增强,因为树突棘是大脑细胞中从其他神经元接收信息的部分,响应大脑中分子的细胞间

分子印迹技术的原理

  当模板分子(印迹分子)与聚合物单体接触时会形成多重作用点,通过聚合过程这种作用就会被记忆下来,当模板分子除去后,聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴,这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。

什么是免疫印迹?

  免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏

Western印迹法检测蛋白

实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg,所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一,即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时,应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭,靶蛋白与第一抗体的反应,结合靶蛋白的一抗

什么是western印迹技术

蛋白质经单向电泳后分离后被转移到硝酸纤维滤膜上,然后用放射性或酶标记的特异抗体来检测相应抗原的存在。蛋白质印迹技术是1975年Southern建立了Southern印迹法后,人们用类似的方法对蛋白质进行印迹分析,称为Western印迹法。Western印迹法是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺

DNA印迹(Southern-Blot)实验

【实验原理】DNA印迹是1975年由英国Southern创建的。其基本原理是:DNA分子经限制性核酸内切酶酶切后,由琼脂糖凝胶电泳将所得 DNA片段按分子质量大小分离,然后将DNA片段变性,并使凝胶中的单链DNA片段转移到尼龙膜、硝酸纤维素膜(NC)或其他固相支持物上,此法中DNA 片段

DNA印迹法的定义

Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或

RNA-印迹法的概念

中文名称RNA 印迹法英文名称Northern blotting定  义将电泳分离的RNA从凝胶中转移到纤维素膜或尼龙膜上,用32P标记的RNA或DNA杂交进行检测的方法。主要用于检测目的基因的转录水平。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

分子印迹技术的概况

  Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜放在凝胶上,上面放上吸水纸巾,利用毛细管作用原理使凝胶中的DNA片段转移到 NC膜上,使之成为固相化分子。载有DN

分子印迹技术的分类

  目前,根据模板分子和聚合物单体之间形成多重作用点方式的不同,分子印迹技术可以分为两类:  1.共价键法(预组装方式)  聚合前印迹分子与功能单体反应形成硼酸酷、西夫碱、亚胺、缩醛等衍生物,通过交联剂聚合产生高分子聚合物,用水解等方法除去印迹分子即得到共价结合型分子印迹聚合物。  2.非共价键法(

免疫印迹法过程

免疫印迹法 是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0

分子印迹分离技术概述

分子印迹分离技术是指获得在空间结构和结合位点上与某一分子(印迹分子)完全匹配的聚合物的过程。1、分子印迹分离技术的原理:当印迹分子与聚合物单体接触时会形成多重结合位点,通过聚合过程这种作用被记忆下来,当除去印迹分子后,聚合物中形成了与印迹分子空间结构完全匹配的具有多重结合位点的空穴,这样的空穴将对印

分子印迹分离技术概述

    分子印迹分离技术是指获得在空间结构和结合位点上与某一分子(印迹分子)完全匹配的聚合物的过程。1、分子印迹分离技术的原理:        当印迹分子与聚合物单体接触时会形成多重结合位点,通过聚合过程这种作用被记忆下来,当除去印迹分子后,聚合物中形成了与印迹分子空间结构完全匹配的具有多重结合位点

组织印迹的Northern杂交

组织印迹的Northern杂交1)硝酸纤维素膜或尼龙膜上的组织印迹1.在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸,在滤纸上方放上一张普通纸,然后铺上一层尼龙膜。2.用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片(厚度约为1mm)。如果组织表面是湿的,则在Kimwipes纸上轻轻吸干或先用蒸馏水洗涤几秒

组织印迹的Western杂交

组织印迹的Western杂交 在硝酸纤维素膜上制备组织印迹 1.在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸,在滤纸上方放上一张普通纸,然后铺上一层硝酸纤维素膜。 2.用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片(厚度约为 1mm)。如果组织表面是湿的,则在Kimwipes纸上轻轻吸干

斑点印迹的定义

中文名称斑点印迹英文名称dot blot定  义一种定性检测核酸或蛋白质的技术。即将待测核酸或蛋白点样于固相载体上,以同位素或非同位素标记探针与之杂交,通过显影或显色而进行检测。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

父系印迹影响配偶选择

  配偶选择是新物种产生的关键因素。对某一特定配偶的选择可以直接影响该物种的进化发展。德国马克思普朗克进化生物学研究所的科学家们近日用家鼠做实验来研究这一问题,并得出结论,父系印迹基因会加速这家鼠种群的分化,促进新物种的形成。   为研究择偶在物种形成过程中所发挥的作用,科学家分别在法国南部和德国西

免疫印迹的优点

免疫印迹法是一项分析抗原、抗体的技术。它具有下列优点:1、 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作;2 、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近, 不会象凝胶那样受孔径阻隔;3、 免疫印迹分析只需少量试剂;4、 孵育、洗涤的时间明显减短;5、可同时制作多个拷贝, 用于多种分析和鉴定;6、结果以图谱形

Western印迹法检测蛋白

实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg,所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一,即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时,应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭,靶蛋白与第一抗体的反应,结合靶蛋白的一抗

什么是分子印迹技术

第八章 分子印迹技术将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术(blotting)。Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜放在凝胶上,上面

DNA-印迹法的概念

中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定  义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上,用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验

实验方法原理去垢剂裂解细胞法通常用于培养的动物细胞。典型的离子型去垢剂SDS(如2%SDS)能充分地裂解细胞。培养的动物细胞和细菌,如可以使用这种方式裂解。假如实验所用的抗体识别的抗原决定簇取决于自然空间构象,并对还原环境敏感,那么在裂解缓冲液中应除去二硫苏糖醇,并建议使用非还原/无脲的凝胶实验材料