NatNeurosci|复旦马兰组解密可卡因记忆中的印迹细胞
在1904年德国科学家Richard Semon利用 “印迹(engram)”这一专有名词来描述大脑中记忆的特点。印迹细胞在记忆中的作用越来越受到关注了。研究表明齿状回(DG)中的印迹细胞在特定场景中恐惧记忆提取过程中特定被激活。抑制或敲除印迹细胞可扰乱恐惧记忆的存储,而通过光化学或化学方法人工激活记忆印迹时,即便是在不相关的环境中也会诱发恐惧的表达。因此印迹细胞在记忆存储和提取过程中的关键作用。 系列证据表明神经回路中的印迹细胞之间的连接可能参与记忆的形成和恐惧记忆的提取。在恐惧条件下,内嗅皮层-DG-CA3回路中的印迹细胞与印迹细胞的连接是在恐惧训练中特定形成的。 2019年11月12日,复旦大学脑科学研究院马兰课题组在Nature Neuroscience杂志上发表长文A ventral CA1 to nucleus accumbens core engram circuit mediates conditione......阅读全文
用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验
实验方法原理去垢剂裂解细胞法通常用于培养的动物细胞。典型的离子型去垢剂SDS(如2%SDS)能充分地裂解细胞。培养的动物细胞和细菌,如可以使用这种方式裂解。假如实验所用的抗体识别的抗原决定簇取决于自然空间构象,并对还原环境敏感,那么在裂解缓冲液中应除去二硫苏糖醇,并建议使用非还原/无脲的凝胶实验材料
美可卡因的欣快效果与脑中多个生化过程相关
近, 美国研究人员使用遗传突变小鼠进行的研究显示, 可卡因导致的欣快体验不仅仅与脑内多巴胺递质系统相关, 也与其它几种递质系统相关, 他们由此认为, 治疗可卡因依赖的方法也应针对多个环节方能有效。在此之前人们认为, 可卡因之所以能产生欣快体验, 是因为可卡因能特异性阻断突触间隙中的多巴胺t
华人团队带来的基因疗法,竟有望打败可卡因依赖?
今日,《自然》子刊《Nature Biomedical Engineering》在线发表了一篇来自芝加哥大学的最新研究论文。由Ming Xu教授和Xiaoyang Wu教授领衔的一支团队利用CRISPR基因编辑技术,开发了一款全新的基因疗法。它有望能缓解可卡因滥用的问题!▲本研究的通讯作者Min
上海科学家发现可卡因成瘾相关新机制
多巴胺是大脑释放的“快乐分子”,让人们在付出努力之后,得到心情愉悦的奖赏。最近,上海科学家发现,在大脑的伏隔核中,存在“快乐分子”的“回收泵”——99%的多巴胺会被回收,以防人们过度愉悦。而毒品可卡因则会阻断这种回收行为,让多巴胺过度刺激人体,造成毒品成瘾。该成果近日在线发表于《自然-神经科学》
揭秘新型毒品浴盐:药力为可卡因十倍
北京时间9月25日消息,据《每日邮报》报道,致命的新型毒品“浴盐”正在剥夺年轻人的生命。研究人员在它里面发现了浓度很高的MDPV,这种物质会导致服用者吸食很多天后仍无法摆脱它产生的可怕影响。据美国国家科学基金会介绍,常见于街头毒品的MDPV,其效力比可卡因大10倍,可导致服用者表现出偏执、暴力和
DNA-印迹法的技术特点
中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定 义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上,用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
免疫印迹实验相关原理
免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原(一般为蛋白质)并测定抗原的大小。蛋白质首先通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,再通过电泳转移到固相支持物上,固相支持物包括硝酸纤维素膜,聚偏乙烯二氟(PVDF)膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附,这样固定的蛋
DNA印迹法所需仪器试剂
仪器1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 材料电泳分离DNA的琼脂糖凝胶试剂1 酸变性液:0.25mol/L HCl, 用分析纯的盐酸12Mol/L稀释 2碱变性
免疫印迹(Wb)的原理
(1)是一种蛋白质测定的技术,集合凝胶电泳的高分辨率,固定免疫测定的敏感及特异性和不需要对靶蛋白进行放射性核素标记,在固相膜上保持的时间很长等优点。(2)可以在样本中检测到微量到微量的抗原,以及在多克隆抗体中检测到单克隆抗体,还可以对已经转移到固相膜上面的蛋白质进行连续的分析。
免疫印迹法检测原理
免疫印迹法是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来的一项检测蛋白质的技术,它将SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨力与抗原抗体反应的高特异性相结合。第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。抗原等蛋白样品经SDS处理后带负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动,分子量越小,泳
全自动蛋白印迹仪
全自动蛋白印迹仪,产品性能结构及组成该产品主要由控制部分、样本槽、加样通道、配套用瓶、吸入及加样泵组成。
印迹法植物气孔检测实验
实验方法原理把有机溶胶涂在植物的表面,胶体风干后就凝成薄膜,这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹,从而显示出气孔的开闭情况,此法除用来观测气孔外,还可用于观测表皮组织上的细胞,茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。实验材料植物叶片
Western免疫印迹的原理
与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物
蛋白质印迹法
值得一提的是,western blot这个名称的由来很有意思。最开始做印迹工作的是一个叫做Edwin Southern的科学家,但印迹的对象是DNA链,他把这种技术称为Southern blot,后来类似的出现了两个过程相似,但是对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个针对蛋白质,人们分别把这两种技
什么是反向免疫印迹
中文名称反向免疫印迹英文名称reverse immunoblotting定 义一种用于分析抗体反应克隆性质的技术。即用等电聚焦法分离待测样品中各组分,再以电泳法转印至硝酸纤维素薄膜或其他材料上,加入同位素标记的抗原共温育,反应后用酶标记抗体与之结合,从而判定与之起反应的克隆性质和数量。应用学科免疫
菌落印迹法的技术用途
中文名称菌落印迹法英文名称colony blotting定 义将固体培养平板上的菌落吸印转移到滤膜上的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
什么是免疫印迹法
免疫印迹法 (Western blotting) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点,是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法,如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。 免疫印迹法(i
蛋白质印迹实验
试剂、试剂盒 甘氨酸TrisSDS甲醇实验步骤 1. 溶液配置(1) 连续缓冲系统甘氨酸 39 mmol/L;Tris 48 mmol/L;SDS 0.0375% ( W/V);甲醇 20% (V/V)。溶液均需用双蒸水配置。这个缓冲系统可用作阳极缓冲液,也可用作阴极缓冲液。(2) 不连续缓冲系统阳
分子印迹技术有哪些特点?
1.预定性,即它可以根据不同的目的制备不同的MIPs,以满足各种不同的需要。 2.识别性,即MIPS是按照模板分子定做的,可专一地识别印迹分子。 3.实用性,即它可以与天然的生物分子识别系统如酶与底物、抗原与抗体、受体与激素相比拟,但由于它是由化学合成的方法制备的,因此又有天然分子识别系统所
蛋白质印迹法
蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里
什么是免疫印迹法?
免疫印迹法 (Western Blot) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点,是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法,如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。免疫印迹法 (immun
全自动蛋白印迹仪
The new generation ProfiBlot 48 is used for the confirmation of infectiousautoimmune diseases, for the screening of allergies as well as for forensi
DNA印迹法的实验步骤
注意注意,操作戴手套。凝胶处理1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。2)变性:将凝胶浸泡于适量的碱变性液中,室温下变性30分钟。期间更换变性液一次,不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变
免疫印迹法的阶段
免疫印迹法分三个阶段进行.第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白样品经SDS处理后带阴电荷,在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动,分子量越小,泳动速度就越快.此阶段分离效果肉眼不可见(只有在染色后才显出电泳区带).第二阶段为电转移:将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤维素
印迹法植物气孔检测实验
实验方法原理把有机溶胶涂在植物的表面,胶体风干后就凝成薄膜,这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹,从而显示出气孔的开闭情况,此法除用来观测气孔外,还可用于观测表皮组织上的细胞,茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。实验材料植物叶片试剂、试剂盒脱脂棉牛皮胶甲苯石蜡仪器、耗材显微镜目镜测微尺载玻片盖玻片磨口玻璃
分子印迹技术和基本介绍
将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术(blotting)。 Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜放在凝胶上,上面放上吸水纸巾
DNA印迹杂交分析实验
实验方法原理 本方案适合于用100~1 000 bp 长的放射性标记的DNA探针对Southern转印、斑点及狭线印迹进行杂交分析。实验材料 DNA试剂、试剂盒 SDSSSC仪器、耗材 水浴锅培养箱实验步骤 用6×SSC润湿带有固定了的DNA的膜。2. 将膜的DNA面朝上置于杂交管中,ATP溶
DNA印迹法实验凝胶处理
1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。 2)变性:将凝胶浸泡于适量的碱变性液中,室温下变性30分钟。期间更换变性液一次,不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变性,则凝胶中溴酚兰的颜
分子印迹技术的应用举例
1.用于化学仿生传感器由于MIPS对于印迹分子的高选择性,故可以作为仿生传感器的分子识别元件;这种分子识别作用可以通过信号转化器(压电晶体、电极、电阻等)输出,然后通过各种电、热、光等手段转换成可测信号,可定量分析各种小分子有机化合物。2.色谱分离MIPS最广泛的应用之一是利用其特异的识别功能去分离
免疫印迹的基本步骤
免疫印迹法( 以抗原分析为例)基本上可分为抗原分离、抗原印迹和抗原检定三个步骤。在每一步中因采用的具体实验方法不同, 可构成多种免疫印迹分析系统。