菌种保藏的几种常用方法
基本原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种: 1.传代培养 保藏法 又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌 用),培养后于4—6℃冰箱内保存。 2.液体石蜡覆盖保藏法 是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。 3.载体保藏法 是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。......阅读全文
微生物菌种保藏方法
1、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。 传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度
菌种保藏实验_滤纸保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株,根据生理生化特征隔绝空气使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态,生长繁殖受抑制从而降低变异率。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保
菌种保藏实验_沙土保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株,根据生理生化特征干燥菌种使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态,生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法多用于能产生孢子的微生物如霉菌
菌种保藏中的细菌鉴定方法
作为科研生产中最重要的基础性资源—菌毒种,其收集、保藏及相关的研究工作在我国正处于整理、整合以及全方面逐步正规化阶段.2003年7月23日,科技部在北京召开了“国家科技基础条件平台建设”部际联席会和专家顾问组成立大会,正式启动了国家科技基础条件平台建设工作.国家自然科技资源共享平台建设作为其中的一个
菌种保藏中的细菌鉴定方法
作为科研生产中最重要的基础性资源—菌毒种,其收集、保藏及相关的研究工作在我国正处于整理、整合以及全方面逐步正规化阶段.2003年7月23日,科技部在北京召开了“国家科技基础条件平台建设”部际联席会和专家顾问组成立大会,正式启动了国家科技基础条件平台建设工作.国家自然科技资源共享平台建设作为其中的一个
菌种保藏实验_斜面低温保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。选用优良菌株,根据生理生化特征创造一个低温环境使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态,生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法为实验室和工厂菌种室常用
菌种保藏实验_液体石蜡保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。选用优良菌株,根据生理生化特征隔绝空气使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态,生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢
菌种保藏实验_液氮冷冻保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株,根据生理生化特征通过低温使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态,生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法除适宜于一般微生物的保藏外,对
微生物菌种保藏方法(一)
微生物在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡,因而常常造成菌种的衰退,并有可能使优良菌种丢失。菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定,确保菌种不死亡、不变异、不被污染,以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。菌种保藏的方法有哪些呢?传代保存法有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理
微生物菌种保藏方法(二)
⑤麸皮保存法 在麸皮内加入60%的水,经灭菌后接种培养,最后干燥保藏。⑥纸片(滤纸)保存法 将灭菌纸片浸入培养液或菌悬液中,常压或减压干燥后,置于装有干燥剂的容器内进行保存。寄主保存法 微生物侵入其寄主后加以保存的方法。冷冻保存法 适用于抗冻力强的微生物。这些微生物可在其菌体细胞外遭受冻结的
菌种保藏实验_冷冻干燥保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株,根据生理生化特征通过冷冻干燥使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态,生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法为菌种保藏方法中最有效的方
菌种保藏实验_穿刺法
实验方法原理该方法操作简便,是短期保藏菌种的一种有效方法。实验材料细菌酵母菌放线菌霉菌试剂、试剂盒半固体培养基仪器、耗材培养试管穿刺管石蜡膜接种环接种针试管塞实验步骤1.用接种针下端挑取菌种(针必须挺直),自半固体培养基的中心垂直刺入半固体培养中,直至接近试管底部,但不要穿透,然后沿原穿刺线将针退出
菌种保藏实验_核酸的保存
实验步骤1. 以溶液形式置低温保存DNA 溶于无菌 TE 缓冲液(10 mmol/L Tris • HCl,1 mmol/L EDTA,pH 8.0)中,其中 EDTA 的作用是整合溶液中二价金属离子,从而抑制 DNA 酶的活性(Mg2+ 是 DNA 酶的激活剂)。 TE 的 pH 为 8.0 是为
微生物菌种的保藏
一、目的和要求 1、了解各种保藏方法的优缺点及其适用的目标微生物 。 2、学习并掌握几种常用的微生物菌种保藏方法。 二、原理 保藏微生物菌种的目的不仅要保存菌株的生命本身,而且还必须要尽可能地使菌株的遗传性状保持不变,同时保证其在整个保存过程中不被他种微生物污染。因此,选择一种能
微生物菌种的保藏
一、目的和要求1、了解各种保藏方法的优缺点及其适用的目标微生物。2、学习并掌握几种常用的微生物菌种保藏方法。 二、原理保藏微生物菌种的目的不仅要保存菌株的生命本身,而且还必须要尽可能地使菌株的遗传性状保持不变,同时保证其在整个保存过程中不被他种微生物污染。因此,选择一种能够长期有效且稳定的保藏微生物
冷冻保藏菌种有哪些切实可行的方法
冷冻保藏是指将菌种于-20 ℃以下的温度保藏, 冷冻保藏为微生物菌种保藏十分有效的办法。经过冷冻,使微生物代谢活动中止。一般而言,冷冻温度愈低,作用愈好。为了保藏的成果愈加令人满意,通常在培育物中加入一定的冷冻保护剂;一起还要认真掌握好冷冻速度和解冻速度。冷冻保藏的缺陷是培育物运输较困难。*先要给大
甘油菌种怎么复苏,甘油菌种保藏具体步骤
1、将无菌操作台灭菌30min,并用75%酒精棉球消毒包括手在内的所有物品。2、用灭菌接种环扣取试管中的冷冻菌块,然后放入3mlLB液体培养基上,最后在37℃150rpm过夜培养。3、将过夜菌液重新按照上一个步骤活化一次,一般经2次活化的菌液即可用于实验。这个过程操作一定要快,应提前准备好所有的物品
微生物菌种传代与保藏
一、菌种保藏的意义 菌种是从事微生物学及生命科学研究的基本材料,在医学领域中,诊断制品的制备,菌苗的 生产、微生物致病性研究,药物的抑菌试验及药品微生物检验等都有一套完整的菌种.微生 物具有生命活力,在传代过程中易发生变异甚至死亡,因此菌种保藏是一项重要的基础工作, 是微生物学基础工作的
微生物菌种保藏有诀窍
目前,我国普通微生物菌种保藏中心保藏的ZL菌株为11977个,位列全球第2。 一株在中国普通微生物菌种保藏管理中心沉睡了20年之久的古老菌种,最近因为韩春雨事件火了起来。这个叫做格氏嗜盐碱杆菌的菌种,在河北科技大学副教授韩春雨的利用下,实现了基因组编辑技术NgAgo-gDNA而出名。 日
甘油管保藏的菌种如何复壮
甘油管保藏的菌种可以通过以下步骤复壮:1. 将无菌操作台灭菌30min后,用75%酒精棉球消毒包括手在内的所有物品。2. 使用灭菌接种环扣取甘油管中的冷冻菌块,放入3mlLB液体培养基中。3. 在37℃、150rpm的条件下过夜培养。4. 将过夜菌液重新按照步骤2和步骤3活化一次,经过2次活化的菌液
常用的菌种保存方法有哪些
菌种保藏是食用菌产业的一项基础工作,是确保野生种质资源基因留存和现有生产用种遗传性能相对稳定的必要手段。菌种保藏的方法多种多样,有的虽然保藏效果好,但投资高或操作繁杂。在生产实践中,更需要设备投入少,能保障菌种不死亡、不污染、最大限度地保持优良种性的简便方法,如斜面低温短期保藏和自然基质较长期保藏相
几种菌种的保存及复苏方法
定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下:1.培养基制备1.1器皿准备培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸
几种常用的转染方法
一、物理-化学方法 脂质体转染法:采用脂质体转染试剂,将遗传物质如质粒, siRNA等转移至细胞内。 此种方法易于操作且不需要许多步骤或特殊的专业知识。通常情况下,你只需要一种转染试剂和一种兼容的生长培养基 (通常是低血清且具有良好的缓冲作用,使细胞在转染过程中保持活性)。不同的厂商有自己的
微生物菌种冷冻干燥和液氮保藏菌种技术
微生物菌种冷冻干燥和液氮保藏菌种技术-、安瓶管开封 1.用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管。 2.用火焰将安瓿管顶端加热。 3.滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。 4.用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。二、菌株恢复培养 1.用无菌吸管,吸取0.3~0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管内,轻
微生物菌种冷冻干燥和液氮保藏菌种技术
微生物菌种冷冻干燥和液氮保藏菌种技术-、安瓶管开封1.用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管。 2.用火焰将安瓿管顶端加热。 3.滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。 4.用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。二、菌株恢复培养 1.用无菌吸管,吸取0.3~0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管内,轻轻
冷冻干燥和液氮保藏菌种技术
实验概要掌握冷冻干燥和液氮保藏菌种的技术。实验步骤建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种:1. 安瓶管开封 (1). 用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管。 (2). 用火焰将安瓿管顶端加热。 (3). 滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。 (4). 用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。2. 菌
第13届国际菌种保藏大会召开
今天上午,第13届国际菌种保藏大会在北京开幕,会议为期5天,全球300多位微生物资源研究和保藏领域的专家学者围绕“微生物基因组学和多样性研究推动的生物技术创新时代的生物资源中心”这一主题展开研讨。 本届大会主席、中国科学院微生物研究所副所长东秀珠告诉《中国科学报》记者,微生物菌种的保藏工作
冷冻干燥和液氮保藏菌种技术
冷冻干燥菌种的转接技术 建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。 -、安瓶管开封 1.用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管。 2.用火焰将安瓿管顶端加热。 3.滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。 4.用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。 二、菌株恢复培养
冷冻干燥和液氮保藏菌种技术
建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。一、安瓶管开封 1.用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管。 2.用火焰将安瓿管顶端加热。 3.滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。 4.用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。二、菌株恢复培养 1.用无菌吸管,吸取0.3~0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管
菌种保藏中心如何进行细菌鉴定
传统方法 常规宏观菌落形态学观察,主要观察菌落在其适合的培养基上的生长状况:细菌在固体培养基上的生长形态、大小、颜色是否均匀一致,菌落个体表面及边缘的生长状况;在液体培养基上的浑浊状况、沉淀状况、液面菌膜状况;半固体上穿刺接种后,观察细菌是否沿着接种线生长以及其生长状态是呈毛刷样生长还是均匀生