Giemsa染色
实验方法原理培养物用甲醇固定,直接用未稀释的 Giemsa 液进行染色,然后1:10 稀释染液,清洗培养物,在潮湿状态下观察。实验材料D-PBSA D-PBSA:甲醇(1:1) &nb......阅读全文
染色体制备
实验方法原理 固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒 低渗溶
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒低渗溶液醋酸
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料细胞实验步骤1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,离心
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料 细胞实验步骤 1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,
糖类染色实验——糖原染色
实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水
染色体的标本制作及其组型实验
在真核生物中, 染色体的数量和形态具有物种的特异性一直可以作为此物种分类的基本依据之一。染色体作为遗传物质-DNA的载体, 对生物的遗传、变异、进化和个体发生, 以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。每一个物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。将体细胞核中全部染
染色体R显带技术
一、原理 R显带的机理目前并不完全了解,在高温(80~90℃)的处理下诱发了染色体蛋白质的变化。Comings(1978)认为在高温下G带的中AT丰富区变性而显出特别亲染,但在R带中正恰相反,AT丰富区却并不显出亲染作用,故而显出浅染带区,电镜的观察进一步表明了这些带和间带区域的差异主要在于电子密
微核检测实验
实验方法原理遗传毒物或致突变因子作用于间期细胞染色质,有丝分裂染色体和纺锤体时,能导致染色体断裂成断片或整条染色体从纺锤体脱落和染色体子星群脱离,形成落后的孤立染色体,继而在分裂末期及以后的间期细胞中形成与主核脱离的徽核。因此微核实质上是孤立畸变染色体在间期的存在形式。微核检测既可直接检测体内细胞,
微核检测实验
实验方法原理 遗传毒物或致突变因子作用于间期细胞染色质,有丝分裂染色体和纺锤体时,能导致染色体断裂成断片或整条染色体从纺锤体脱落和染色体子星群脱离,形成落后的孤立染色体,继而在分裂末期及以后的间期细胞中形成与主核脱离的徽核。因此微核实质上是孤立畸变染色体在间期的存在形式。微核检测既可直接检测体内细胞
染色体-G-显带核型分析
核型分析简介染色体是细胞分裂期高度凝集的 DNA 蛋白质纤维,是间期染色质结构紧密盘绕折叠的结果。核型是指一个体细胞内的全部染色体按其大小、形态特征排列起来构成的图像。将待检细胞进行染色体数目、形态结构分析,确定其核型是否与正常核型一致,称为核型分析。染色体核型分析,是遗传学科学研究和辅助临
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
基本方案 实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
基本方案 实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中
姐妹染色单体分化染色实验
实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处
动物染色体标本的制备
一、实验目的1. 了解染色体标本制备的基本原理2. 掌握滴片法制备染色体标本的一般步骤二、实验原理每一物种的细胞一般都具有一定数目、形状和大小的染色体,在秋水仙素的作用下可使分裂细胞阻断在中期,此时染色体形态最典型,然后通过低渗、固定、染色等步骤,便可在显微镜下呈现出其形态。三、实验用品器具:显微镜
诊断Theodore上方角膜缘角结膜炎的简介
本病诊断不难。如果存在上方结膜和角膜染色特别是存在角膜丝状物时即可诊断,其诊断指标主要根据特征性的病史和临床特征另外,对受累区球结膜的刮片检查有助于诊断,Giemsa染色可见角化的上皮细胞。上睑结膜刮片则显示有多形核白细胞。
C带定义
标本可用酸 (HCl)及碱〔Ba(OH)2 〕变性处理, 再经2xSSC在60℃中温育1小时, 最后用Giemsa染料染色显带。
血细胞常用的染色方法有哪些
血细胞又称“血球”,是存在于血液中的细胞,能随血液的流动遍及全身。 血细胞常用的染色方法是细胞涂片,在用普通光学显微镜观察之前需要固定和染色。固定是将细胞蛋白质和多糖等成分迅速交联凝固,以保持其原有结构不发生变化。染色的目的是使细胞的主要结构,如细胞质、细胞核、细胞器等染上不同的颜色,便于显微
细胞凋亡检测:形态学特征的检测方法1
一、普通光学显微镜观察方法(一)苏木素-伊红染色(HE 染色法)石蜡组织切片的HE染色1、取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片。2、切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇
G显带来源
1968年瑞典细胞化学家Caspersson 等应用荧光染料氮芥喹吖因(quinacrine mustard,QM)处理染色体后,由于染料选择性的与AT或GC相结合,且染色体上AT、GC区域不是随机分布的,所以在荧光显微镜下可观察到染色体沿其长轴显示出一条条宽窄和亮度不同的横纹,即染色体的显带(ba
G显带的来源
1968年瑞典细胞化学家Caspersson 等应用荧光染料氮芥喹吖因(quinacrine mustard,QM)处理染色体后,由于染料选择性的与AT或GC相结合,且染色体上AT、GC区域不是随机分布的,所以在荧光显微镜下可观察到染色体沿其长轴显示出一条条宽窄和亮度不同的横纹,即染色体的显带(ba
瑞氏染色步骤
操作步骤:1.滴加瑞氏吉姆萨A液(约0.5ml-0.8ml)涂片上,并让染液覆盖整个标本染色1min;2.再将瑞氏吉姆萨B液加于A液上面(滴加量为A液的2-3倍),以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状,使两液充分混合,染色3-10min。(染血片时间可略短,染骨髓片时间应视细胞量多少而异)3.水洗(
瑞氏染色步骤
操作步骤:1.滴加瑞氏吉姆萨A液(约0.5ml-0.8ml)涂片上,并让染液覆盖整个标本染色1min;2.再将瑞氏吉姆萨B液加于A液上面(滴加量为A液的2-3倍),以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状,使两液充分混合,染色3-10min。(染血片时间可略短,染骨髓片时间应视细胞量多少而异)3.水洗(
瑞氏染色步骤
操作步骤:1.滴加瑞氏吉姆萨A液(约0.5ml-0.8ml)涂片上,并让染液覆盖整个标本染色1min;2.再将瑞氏吉姆萨B液加于A液上面(滴加量为A液的2-3倍),以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状,使两液充分混合,染色3-10min。(染血片时间可略短,染骨髓片时间应视细胞量多少而异)3.水洗(
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
一、实验目的: 1、掌屋植物染色体标本的去壁低渗方法 2、了解中期染色体的形态结构 二、实验原理: 植物细胞有很坚实的细胞壁,染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上,可通过纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁;用低渗溶液处理可以提高染色体的分散程度。陈瑞阳等(1979,19
糖类染色实验——黏液物质染色
实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香
间接染色步骤(细胞表面染色)
实验概要间接标记需要两个孵育步骤,先与一抗再与合适的第二抗体孵育,二抗(不是一抗)结合了荧光染料(FITC、PE、Cy5 等)。请注意这是一个普遍的程序,您可以根据自己的使用情况进行调整。实验步骤1. 收集并洗涤细胞,然后确定细胞总数。细胞通常在聚苯乙烯的圆底 12 x 75 mm2 Falcon
姐妹染色单体分化染色方法
姐妹染色单体差别染色可使中期染色体显示深浅不同的两条单体,能借以观察姐妹染色单体互换(SCE)现象。SCE是两条染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互换而表现出来一种现象。即是细胞分裂是DNA同源重组的结果。SCE既是一种无害的变化(有生理波动),也可受射线、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一
革兰氏染色液染色法
1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2.结晶紫染色液。 3.革兰氏碘液。 4.95%酒精。 5.番红染液。 6.载玻片。方 法 一、涂片标本的制备(见实验一) 二、革兰氏染色法 1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗
杂交瘤技术基本程序与方法10
(2)杂交瘤细胞的复苏 杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞或其他细胞在液氮中保存,若无意外情况时,可保存数年至数十年。复苏时融解细胞速度要快,使之迅速通过最易受损的 -5℃?0℃,以防细胞内形成冰晶引起细胞死亡。 通常情况下,冻存时细胞数量多,生长状态好的杂交瘤细胞系以及其他细胞的复苏可采用以下方法,这也是各个