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临床诊断中的FISH检测

FISH(即荧光原位杂交)技术作为分子诊断的重要工具,在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针,再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交,最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数,以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷,结果直观准确,因此FISH成了许多疾病诊断的首选工具。下面我们将从探针的设计,样本的制备,原位杂交和检测结果的观察等几个方面简单介绍FISH的操作。探针是FISH检测灵敏度和准确性的关键。FISH检测的准确性来源于探针的设计。FISH能否应用于某一领域也取决于是否具有相应的探针。用于FISH检测的探针必须具备很高的特异性,能特异性地识别特定的基因或染色体上特定的片断。而且FISH的探针必须能经受原位杂交的处理而不变性。荧光基团的标记也直接影响了检测的灵敏度和原位杂交结果的检测方式。以著名的探针生产商Vysis公司的LSI系列探针为例:LSI系列探针来源于BAC大片断基因组......阅读全文

临床诊断中的FISH检测

FISH(即荧光原位杂交)技术作为分子诊断的重要工具,在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针,再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交,最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数,以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷,结果直观准确,因此FISH成了许多疾病

临床诊断中的FISH检测

FISH(即荧光原位杂交)技术作为分子诊断的重要工具,在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针,再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交,最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数,以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷,结果直观准确,因此FISH成了许多疾病

JCI:应用FISH技术检测肿瘤microRNA

  霍华德•休斯医学研究所(HHMI)的研究人员通过微调荧光探针的设计以及RNA固定技术,开发出一种检测和定量肿瘤活检样本中microRNA分子的方法。这种新的荧光原位杂交(FISH)技术实现了肿瘤类型的鉴定。《The Journal of Clinical Investigation》杂志近日

临床FISH:为疾病治疗带来新视角

  病理学家是形态学的支持者。对他们来说,组织切片上的点点颜色能帮助你区分良性和病变的组织,为治疗提供线索。当然,关键词是“染色”。组织切片在光学显微镜下是没有特征的,因此病理学家(研究人员)必须染色,才能看见细胞。  在许多情况下,苏木精和曙红(H&E)染色就足够了,这揭示了基本的组织结构。不过,

体外诊断IVD-简单了解分子诊断之FISH技术(T15)

分子诊断的主要技术有核酸分子杂交(FISH)、聚合酶链反应(PCR)、基因检测技术和生物芯片技术(gene chip)。荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH):是一种应用非放射性荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示DNA序列位置

用细胞爬进行RNA FISH检测的实验操作

用细胞爬片进行 RNA FISH 检测的实验流程 1. 细胞在盖玻片上进行培养,细胞长好后用 CSK 缓冲液简单洗涤。 2. 细胞爬片用 4% 多聚甲醛在 4℃ 固定 10 min。 3. 用含有 0.5% TritonX-100,,10 mM VRC 的 CSKBuffer 溶液在 4℃ 处理 1

FISH 技术基本实验

实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液(PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材 水浴锅增湿器玻片实验步骤 一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%,如果房间湿度计显示低于45%,则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±

FISH和PRINS技术

一、荧光原位杂交(FISH) 是一种简单、敏感、而容易操作的方法,结果迅速,并能在同一标本上检测多个不同的基因,可应用于细胞培养、染色体分裂像、冰冻切片和石蜡切片。 FISH技术是利用特异的DNA探针,标记了生物素,地高辛、或荧光素,对检测细胞进行DNA-DNA原位杂交,并用荧光法显示。 FISH

FISH 技术基本实验

实验方法原理试剂、试剂盒70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液(PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材水浴锅增湿器玻片实验步骤一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%,如果房间湿度计显示低于45%,则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±2℃,在

FISH 技术基本实验

基本方案             实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇 SSC