临床诊断中的FISH检测
FISH（即荧光原位杂交）技术作为分子诊断的重要工具，在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针，再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交，最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数，以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷，结果直观准确，因此FISH成了许多疾病诊断的首选工具。下面我们将从探针的设计，样本的制备，原位杂交和检测结果的观察等几个方面简单介绍FISH的操作。探针是FISH检测灵敏度和准确性的关键。FISH检测的准确性来源于探针的设计。FISH能否应用于某一领域也取决于是否具有相应的探针。用于FISH检测的探针必须具备很高的特异性，能特异性地识别特定的基因或染色体上特定的片断。而且FISH的探针必须能经受原位杂交的处理而不变性。荧光基团的标记也直接影响了检测的灵敏度和原位杂交结果的检测方式。以著名的探针生产商Vysis公司的LSI系列探针为例：LSI系列探针来源于BAC大片断基因组......阅读全文
临床诊断中的FISH检测
FISH（即荧光原位杂交）技术作为分子诊断的重要工具，在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针，再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交，最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数，以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷，结果直观准确，因此FISH成了许多疾病
临床诊断中的FISH检测
FISH（即荧光原位杂交）技术作为分子诊断的重要工具，在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针，再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交，最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数，以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷，结果直观准确，因此FISH成了许多疾病
FISH－检测乳腺癌中－HER2－扩增实验
基因扩增经常在人肿瘤细胞中被检测到并在肿瘤发生中起重要的作用。用比较基因组杂交对肿瘤细胞进行全基因组扫描，揭示出在实体肿瘤基因组的许多区域有基因拷贝数的改变。对改变区域 DNA 的深入研究显示在实体瘤中复杂的 DNA 重排涉及多个基因并跨越几个 Mb。在染色体倍体变化中，经常伴有基因重排。尽管研究
FISH－检测乳腺癌中－HER2－扩增实验
试剂、试剂盒 胃蛋白酶中性福尔马林缓冲液甲酰胺乙醇仪器、耗材 探针试剂盒荧光显微镜实验步骤 一、切片及制片1.从福尔马林固定石蜡包埋的组织块上切厚组织切片，37°C 水浴展片。2.贴在正含电荷的载玻片上。3.另连续切一张相应的组织切片，用苏木素和伊红（H&E) 染色（见注释 2)0二、脱蜡和浸透组织
FISH－检测乳腺癌中－HER2－扩增实验
试剂、试剂盒 胃蛋白酶 中性福尔马林缓冲液 甲酰胺 乙醇 仪器、耗材 探针试剂盒
荧光原位杂交技术（FISH）在疾病分型诊断中的应用
生命科学的发展，生物技术的进步使我们对疾病本质的认识不断地深入，也使我们拥有更多新的治疗方法和药物应对疾病的威胁。如何准确有效地利用这些新的治疗方法和药物治愈疾病是我们迫切需要研究的内容。如何对疾病进行正确的分型和诊断却是上述工作的基础。只有全面地把握病情，并在此基础上进行准确的判断和分析，才能为
JCI：应用FISH技术检测肿瘤microRNA
霍华德•休斯医学研究所(HHMI)的研究人员通过微调荧光探针的设计以及RNA固定技术，开发出一种检测和定量肿瘤活检样本中microRNA分子的方法。这种新的荧光原位杂交(FISH)技术实现了肿瘤类型的鉴定。《The Journal of Clinical Investigation》杂志近日
临床FISH：为疾病治疗带来新视角
病理学家是形态学的支持者。对他们来说，组织切片上的点点颜色能帮助你区分良性和病变的组织，为治疗提供线索。当然，关键词是“染色”。组织切片在光学显微镜下是没有特征的，因此病理学家（研究人员）必须染色，才能看见细胞。 在许多情况下，苏木精和曙红（H&E）染色就足够了，这揭示了基本的组织结构。不过，
血清联合检测在原发性肝癌诊断中的临床价值
近期，永嘉县人民医院研究人员发表论文，旨在探讨血清甲胎蛋白（AFP），a-L-岩藻糖苷酶（AFU），同型半胱氨酸（Hcy）和总胆汁酸（TBA）联合检测在原发性肝癌（PHC）诊断中的临床价值。研究指出，AFP、AFU、Hcy和TBA四项参数的高表达与PHC关系密切，联合检测可明显提高PHC的检出率
血流变检测在疾病诊断中的临床意义
血流变学介于基础医学、预防医学与临床医学之间，其于1950年在美国物理学会第25届会议上被提出。血流变学是一门新兴的生物力学及生物流变学分支，主要研究血液在血管中的流动规律，血液中有形成分（如红细胞、白细胞等）的变形性和无形成分（血浆）的流动性对血液流动的影响。血液这种非牛顿型的异常流动可作为反应血
FISH－is－not－a－fish荧光原位杂交中手动阅片和自动阅片大比拼
FISH是什么 FISH是什么？ 是一条条欢快的鱼儿吗？ 红色、绿色、蓝色、黄色的亮点 是鱼儿身上的五彩斑斓吗？ 我们这期讲得FISH可不是彩色的鱼儿 Q 那么，FISH到底是什么呢？ FISH是荧光原位杂交（Fluorescence In S
FISH－is－not－a－fish荧光原位杂交中手动阅片和自动阅片大比拼
FISH是什么？ 是一条条欢快的鱼儿吗？ 红色、绿色、蓝色、黄色的亮点 是鱼儿身上的五彩斑斓吗？ 我们这期讲得FISH可不是彩色的鱼儿 Q 那么，FISH到底是什么呢？ FISH是荧光原位杂交（Fluorescence In Situ Hybridiza
用细胞爬进行RNA－FISH检测的实验操作
用细胞爬片进行 RNA FISH 检测的实验流程 1. 细胞在盖玻片上进行培养，细胞长好后用 CSK 缓冲液简单洗涤。 2. 细胞爬片用 4% 多聚甲醛在 4℃ 固定 10 min。 3. 用含有 0.5% TritonX-100,，10 mM VRC 的 CSKBuffer 溶液在 4℃ 处理 1
体外诊断IVD简单了解分子诊断之FISH技术（T15）
分子诊断的主要技术有核酸分子杂交(FISH)、聚合酶链反应（PCR）、基因检测技术和生物芯片技术（gene chip）。荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH）：是一种应用非放射性荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示DNA序列位置
检验结果在临床诊断中的评价
当前实验室检测项目越来越多，检测费用在整个病人医疗费用中所占比重日益增加。为了节约费用。除了精心遴选检测项目外，实验室必须严格执行质量保证措施，发出正确可靠的实验结果，还必须考虑实验结果在临床诊断和使用的中的价值。因此完整的质量的保证体系还应包括实验结果的有效评价。人偏差习惯于指导结
病理学中的显色原位杂交和－FISH－实验
试剂、试剂盒 Tris-EDTA 溶液PBSDigest-All 3福尔马林磷酸缓冲液二甲苯乙醇生物素和地高辛标记的DNA探针CAS-block (Zymed Laboratories)链霉亲和素仪器、耗材 石蜡切片烤箱微波炉染色缸热循环仪潮湿烤箱实验步骤 一、杂交前玻片处理1.于 60°C 烤箱中
病理学中的显色原位杂交和－FISH－实验
试剂、试剂盒 Tris-EDTA 溶液 PBS Digest-All 3 福尔马林磷酸缓冲液 二甲苯 乙醇 生物素和地高辛标
病理学中的显色原位杂交和－FISH－实验
荧光原位杂交（FISH) 技术能够快速检测各种组织，包括新鲜和存档标本中的染色体异常。这些技术已经为临床细胞遗传学和研究机构所广泛接受。然而，这些方法却并非常用于非细胞遗传学诊断的病理学服务，部分是因为 FISH 图像设备不能普遍地为负责组织学诊断的诊断医生（外科病理学家）所用。因此，各种原位杂交探
降钙素原在真菌感染诊断中的临床价值
真菌是广泛存在于自然界的生物，与人类维持着共生状态。但是，随着广谱抗细菌药物、免疫抑制剂及化疗药物的广泛应用，艾滋病、恶性肿瘤等疾病发病率的增加，以及器官移植、各种创伤性检查手段的开展，真菌感染在感染性疾病中的比例也明显升高。如何及时、准确地诊断真菌感染，占得治疗先机，成为临床医师关注的重点。目前
FISH－技术基本实验
实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液（PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材 水浴锅增湿器玻片实验步骤 一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%，如果房间湿度计显示低于45%，则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±
FISH和PRINS技术
一、荧光原位杂交（FISH） 是一种简单、敏感、而容易操作的方法，结果迅速，并能在同一标本上检测多个不同的基因，可应用于细胞培养、染色体分裂像、冰冻切片和石蜡切片。 FISH技术是利用特异的DNA探针，标记了生物素，地高辛、或荧光素，对检测细胞进行DNA-DNA原位杂交，并用荧光法显示。 FISH
FISH－技术基本实验
基本方案 实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇 SSC
FISH－技术基本实验
实验方法原理试剂、试剂盒70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液（PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材水浴锅增湿器玻片实验步骤一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%，如果房间湿度计显示低于45%，则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±2℃，在
抗原抗体反应的免疫学检测技术在临床实验诊断中的应用
(1)单向扩散试验：用于测定多种血浆蛋白(如IgG、IgA、IgM的定量测定)。(2)双向扩散试验：可用于鉴定抗原或抗体的特征(包括检测某种抗原，如AFP；检测某种抗体，如抗核抗体)、抗原半定量滴定抗体的效价等。(3)直接凝集反应：用于抗原或抗体的定性或半定量的检测。(4)间接凝集反应：用于各种抗体
荧光原位杂交技术(FISH)在泌尿系统肿瘤领域的应用
一、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)技术概述 1969年，Gall和Pardue等首次将同位素探针用于原位杂交实验，获得成功。1987年，染色体原位抑制杂交法的创建，使FISH 技术得以迅速发展。随后，Cremer等用生物素
临床化学检验在疾病诊断中的应用
1.在技术方面达到了微量、自动化、高精密度。2.在内容方面（1）能检测人体血液、尿液及体液中的各种成分。包括糖、蛋白质、脂肪、酶、电解质、微量元素、内分泌激素等。也包含肝、肾、心、胰等器官功能的检查。（2）为疾病的诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防等各个方面提供理论和试验依据，也促进了临床
PCR技术及其在临床诊断应用中的进展
一、病原体的定性及定量检测，PCR及其相关技术适用于病毒，细菌、寄生虫等所有病原体的检测，以下就SDA首批的四种病原体基因诊断项目加以说明。1. PCR技术在结核菌检测中的应用及意义结核菌基因诊断的意义主要表现在：a. 区分TB与其它分枝杆菌；b. 检测TB耐药基因；c . 提高TB的阳性检出率。2
质谱技术在临床感染诊断中的应用
1. 临床常见细菌的鉴定：2009年Seng等用1660株细菌对MALDI-TOF MS常规鉴定细菌进行前瞻性研究，结果显示MALDI-TOF MS是一种经济、快速、准确的常规细菌鉴定方法，未来有可能取代传统的革兰染色和生化方法。此后，MALDI-TOF MS在临床应用迅速增加。在Medline
微流控芯片在临床诊断中的应用
1、微流控芯片用于基于抗体的诊断 临床免疫检验技术对于人类健康有着重要意义。由于传统的检验技术繁琐、费时且低效，于是在此基础上发展出了一种简单方便的免疫测定技术即酶联免疫吸附实验(ELISA)，可应用于各种生物活性物质及标志物的快速临床检测。 该方法已成为医学诊断、环境分析和食品安全等领域的
经络理论在临床疾病诊断中的运用
1.理论基础 《灵枢。海论》曰：“夫十二经脉者，内属于脏腑，外络于支节”，说明人体的经络是沟通脏腑和体表的通路。《素问。调经论》也说：“五脏之道皆出于经髓，以行血气，血气不和，百病乃变化而成。”强调了经脉与五脏的联系和经脉的重要性。《灵枢。经脉》中则更加详细的论述了十二经脉的循行部位、