基因枪法转化小麦实验

实验材料幼胚盾片 试剂、试剂盒乙醇 &nbs......阅读全文

植物基因转化常用方法4

1.2 其它的基因附加工程在水稻、棉花、马铃薯、番茄和其它作物上也进行了δ-内毒素工程,获得昆虫抗性也不仅仅是指有着一种方法。蛋白酶抑制剂也是较好的选择,它可以一只昆虫肠道内的蛋白酶活性,阻止或减缓害虫生长,许多植物能产生蛋白酶抑制剂,如豇豆和common bean, 他们的基因已经被成功的转移到其

优秀!再生基因让小麦基因工程改良冲破品种限制

“遗传转化效率低和基因型依赖性是制约小麦转基因研究与基因编辑研究及应用的主要障碍,我们的这项工作为解决这一难题提供了方案。”中国农业科学院作物科学研究所(以下简称作科所)研究员叶兴国对《中国科学报》说。 1月14日,《自然—植物》(Nature Plants)在线发表了作科所作物转基因及基因编辑

关于鸟枪法的特点介绍

  “鸟枪法”优点是速度快,简单易行,成本较低 [4]。但用它来测序,最终排序结果的拼接组装不太容易。中国科学家设计出了一种序列组装软件,能有效克服“鸟枪法”全基因组测序组装过程中的困难 [4]。  在研究中,他们首先在整个水稻基因组上生成许多已知长度的DNA(脱氧核糖核酸)切片,然后使它们按DNA

关于鸟枪法的流程介绍

  1、外源DNA片段的全克隆  根据外源DNA片段的末端性质及大小确定克降载体,鸟枪法一般选择质粒或入-DNA作为克隆载体,受体细胞大多选择大肠杆菌,只有当后续筛选必须采用外源基因表达产物检测法时才选择那些能使外源基因表达的相应受体系统 [1]。  2、目的重组子的筛选  从众多的鸟枪法克隆中快速

DNA测序鸟枪法的介绍

  “鸟枪法”是一种由生物基因组提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超声波等)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段,继而将这些片段与适当的载体结合,将重组DNA转入受体菌扩增,获得无性繁殖的基因文库,再结合筛选方法,从众多的转化子菌株中选出含

鸟枪法测序的方法特点

中文名称鸟枪法测序英文名称shotgun sequencing定  义一种分析大片段基因组DNA序列的策略。系将大片段DNA(如噬菌体文库中约40 kb长或细菌人工染色体所含350 kb长的DNA插入片段)随机切成许多1~1.5 kb的小片段,分别对其测序,然后借助序列重叠区域拼接成全段序列。应用学

关于鸟枪法的基本信息介绍

  鸟枪法(Shot gun)是一种直接从生物细胞基因组中获取目的基因的方法。鸟枪法将某种生物体的全基因组或单一染色体切成大小适宜的DNA片段,分别连接到载体DNA上,转化受体细胞,形成一套重组克隆,从中筛选出含目的基因的目的重组子 [1-2]。此法操作简单,但工作量大 [3]。

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验1

根癌农杆菌菌液的准备实验材料农杆菌细胞试剂、试剂盒根癌农杆菌甘油原液抗生素仪器、耗材MG L 液体培养基实验步骤1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并添加相应抗生素的 50 ml 无菌管中,28℃、250 r/min 摇床振荡培养过夜(17~20

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验2

根癌农杆菌接种外植体的准备(见注 6)实验材料面包小麦硬粒小麦试剂、试剂盒乙醇仪器、耗材层流罩超净台实验步骤1. 面包小麦和硬粒小麦开花后 12~16 天剪下幼穗,将种子幼体用 70% ( V/V)的乙醇浸泡 1 min,再换用 10% 乙醇(V/V)轻轻晃动 10 min 进行表面消毒,最后用足量

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验4

胚性愈伤的诱导和再生实验材料胚仪器、耗材诱导培养基再生培养基实验步骤1. 共培养 2~3 天后,将胚转移至诱导培养基以诱导胚性愈伤(表 5.1,诱导培养基 a 适用于面包小麦,诱导培养基 b 适用于硬粒小麦)。记录下转移的胚的个数以便计算转化效率,转移时确保胚的盾片仍朝上。22~23℃ 避光培养。2

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验6

转基因植株的鉴定及种子的收获实验材料再生苗仪器、耗材Magenta 盒实验步骤1. 经第二轮选择后,挑出根茎生长良好的再生苗(见注 16 ) 移栽于土壤中。首先,将各株再生苗移入 8 cm2 的盆钵里生长 1~2 周,使它们能够逐渐适应温室条件。当小苗足够大时,再取叶片提取 DNA 用于 PCR 和

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验7

转化效率的计算仪器、耗材Southern 杂交分析实验步骤1. 转化效率通常用百分比表示。计算方法为:确定的独立转基因单株总数 x100 /侵染的总幼胚数。2. 如果一个胚得到一株以上的转基因植株,这视为一个独立转化事件,来自同一转化事件的其他所有单株视为姐妹株。这些姐妹株有可能来源于不同的细胞,属

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验——选择

实验材料愈伤组织仪器、耗材选择培养基Magenta 培养盒实验步骤1. 将培养物转移至第一轮选择培养基中(表 5.1,选择培养基 1 ) ( 见注 15)。一些愈伤组织在转移时会自然散开,尽管这无关紧要,但放置时应将散开的愈伤块彼此靠近,以标记它们是来自同一幼胚。2. 培养 3 或 4 周后,筛选出

关于基因分离方法的基本信息介绍

  基因分离方法是直接从生物基因组中分离出特定基因的方法。主要使用三种方法。鸟枪法:使用限制性内切酶在特异的序列上将DNA双链切成平均长度为几千个碱基对的混杂片段。这些片段带有粘性末端,与具有相同粘性末端的载体质粒相结合形成重组体。用此重组体群转化受体细胞,再选出带有目的基因的转化细胞。通过增殖,可

科学家发现小麦抗穗发芽基因

  小麦最怕遇到连续降雨,这将会导致小麦在收获前因麦穗发芽而造成严重损失。日前,美国农业部农业研究局和堪萨斯州立大学的研究人员在小麦中发现并克隆出一个被命名为PHS的能防止植物提前发芽的基因,这一基因的发现将阻止麦穗提前发芽。   鉴定PHS基因的大部分工作主要来自于研究人员对普通小麦的全基因组测

英国批准新型转基因小麦种植试验

英国洛桑研究所1日说,英国环境、食品与农村事务部已批准其新型转基因小麦田间种植试验的申请,它将在近期开始小规模种植,以验证这种转基因小麦可能带来的产量变化。 洛桑研究所是英国历史悠久的农业技术开发机构,与埃塞克斯大学和兰开斯特大学合作开发了新型转基因小麦。去年11月,洛桑研究所向政府申请在

研究发现小麦隐性抗病毒新基因

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/2/494546.shtm近日,中国农业科学院作物科学研究所小麦大麦优异种质资源发掘与创新利用创新团队发现第二个小麦黄花叶病隐性抗病毒基因,可对小麦黄花叶病完全免疫,该研究为抗黄花叶病小麦新品种培育提供了理论基

新型抗小麦白粉病基因被找到

  小麦白粉病是严重威胁我国小麦生产的重要病害之一。推广抗病品种是防治该病最经济有效的措施,育种上主要利用全生育期抗性及成株期抗性基因。然而单一抗源抗性的频繁丧失,使育种工作总是在被动地追赶病原菌小种的变化,严重制约着小麦产量和品质水平的进一步提高。因此,需要发掘新类型抗源,以获得持久抗性。 近

4个LBD基因控制水稻和小麦生长

长穗偃麦草LBD蛋白质三级结构预测                                        长穗偃麦草LBD基因家族特征结构域   长穗偃麦草LBD保守基序(左)与基因结构(右) 长穗偃麦草LBD基因的共线性分析    图片均由论文作者提供  

发现新类型小麦抗白粉病基因

  近日,中国科学院遗传与发育生物学研究所刘志勇研究组和中国农业科学院作物科学研究所李洪杰研究组合作报道了一个中国普通小麦地方品种中罕见的TKP蛋白突变Wheat tandem kinase 3 (WTK3),获得了小麦抗白粉病功能。通过正向遗传学的方法,从中国小麦地方品种“葫芦头”中图位克隆了小麦

揭开面包小麦基因组的遗传蓝图

  美国马里兰州伯赛大,2014年7月18日  国际小麦基因组测序协作组织今日在国际知名杂志《科学》上公布了普通小麦的基因组草图。作为世界上种植最广泛的谷物作物,这份基于单条染色体而绘制的基因组草图为揭示其复杂而庞大的基因组之结构、组织及进化特征提供了新的视角。 对于植物科学研究者和育种家来说,这份

张增艳:新基因解决小麦条锈病

张增艳,这个美丽而开朗的女科学家让小麦抗病基因的研究占据了她几乎全部生活时间,就在不久前,张增艳领导的小麦抗病分子育种课题组在世界上首先发现了抗小麦条锈病新基因。最近中国科协向媒体重点推荐了她的研究成果及论文。 专家简介 张增艳,中国农业科学院首批杰出人才,博士生导师。中国农业科学院作物育种

美分离出小麦赤霉病抗性基因

  小麦赤霉病是一种全球性小麦疾病,会造成作物产量急剧下降,每年给全球农业生产造成巨大损失。据最新一期《自然·遗传学》杂志报道,美国科学家在克隆旨在消灭小麦赤霉病的抗性基因方面取得重大突破。他们利用先进的小麦基因组测序技术分离出了具有广谱抗性的Fhb1基因,这一发现不仅对小麦赤霉病,而且对各种受到真

癌基因转化细胞:基因组DNA转染法

实验概要 癌基因转化细胞实验步骤1.提取基因DNA(含癌基因)。2.DNA准备:取供体DNA50~100微克,加3M NaCl或醋酸钠使最终浓度至0.3M混匀。3.再加2倍体积无水乙醇,3000转/分离心10分钟,去上清。4.加入转染缓冲液,待DNA充分融解后,再加入2.5M CaCl2,令最终浓度

中国农业科学院Nature发布最新测序成果

  来自中国农业科学院、深圳华大基因研究院和香港中文大学等处的研究人员,首次完成了对小麦D基因组供体种粗山羊草(Aegilops tauschii)基因组的测序和草图绘制。相关论文“Aegilops tauschii draft genome sequence reveals a gene repe

影响基因枪转化的因素?

首先是气源的压力大小,以及射击距离,实验证明轰击次数太多也会造成对细胞的伤害,因此一般以2-3次为宜。

基因电转化技术的创新介绍

常规的转染包括脂质体,电转化和病毒法。普通的293、Hela等细胞系,脂质体转染也能达到70-80%。而对于其他一些极难转染的细胞,如原代神经元,原代神经干细胞,免疫细胞等来说,脂质体转染不仅转化效率很低(约10%),而且细胞死亡率极高。因此有些研究人员不得不转用更加昂贵而且毒性更大的病毒包被法。病

小麦基因蓝图被破解-基因组数量是人类5倍

  据法新社华盛顿7月17日电,科研人员17日称,小麦的基因蓝图首次被破解,这一创举不仅能够优化育种,还可加强农作物的抗病抗旱能力。  小麦是全球30%人口的主要粮食来源,然而破解其基因蓝图尤其困难,因其基因组数量庞大,是人类基因的5倍。  最新研究成果意味着小麦全基因组序列的破译工作将在三年内完成

关于鸟枪法的内容简介

  鸟枪法是直接从生物细胞基因组中获取目的基因最常用的方法。它用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,使供体细胞提供的DNA(即外源DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制,从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把带有目的基

关于鸟枪法的基本原理介绍

  “鸟枪法”是一种由生物基因组提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超声波等)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段,继而将这些片段与适当的载体结合,将重组DNA转入受体菌扩增,获得无性繁殖的基因文库,再结合筛选方法,从众多的转化子菌株中选出含