植物组织中几种酶的组化定位鉴定

原理 在植物生理学的研究中,可利用组织化学的方法,来说明植物体内的生理活动问题。例如,当需要检定某种物质性质和在植物体内分布时,用组织化学的方法,可以达到定位和定性的目的,而且有时比用剥离的官或组织,作生化测定更能说明问题。植物组织中酶的组化鉴定的基本原理,是以某物质为底物在专一酶作用下,产生一种有颜色的化合物来表明有某种酶的存在。 过氧化物酶:在过氧化氢存在下,联苯胺经酶作用脱氢而生成蓝色的络合物,反应式如下:多酚氧化酶:邻苯二酚或邻苯三酚在多酚氧化酶的作用下,产生茶褐色化合物或棕色络合物,反应式如下: 三磷酸腺苷酶:三磷酸腺苷(ATP)经酶作用分解为二磷酸腺苷(ADP),并释放出无机磷酸,与铅离子结合产生磷酸铅,遇硫则生成硫化铅黑色沉淀,可用下列简式表示: 脱氢酶:在脱氢酶作用下,氯化三苯基四氮唑(TTC)被还原为三苯基甲(TTF),溶液从无色变成红色,反应式如下: 本实验学......阅读全文

关于定位突变残基的鉴定的介绍

  定位突变残基的鉴定:对于新蛋白质的功能分析,最重要的是对数据的解释。在数据分析过程中,如何区别由功能残基替换引起的效应及蛋白质构象变化引起的效应是所有突变分析中共同存在的困难。对于三维结构未知的蛋白质这个问题尤为严重,因为我们无法确定残基的立体位置与周围结构环境,残基对溶剂的暴露程度以及同附近残

植物组织制备基因组DNA实验——CTAB法

实验方法原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。实验材料植物组织试剂、试剂盒CTAB液2-疏基乙醇TE高盐TE氯仿异戊醇仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1.  在所需量

蕨类植物鉴定实验——蕨类植物鉴定

实验材料石松标本卷柏(或中华卷柏)腊叶标本石松茎横切片石松卷柏抱子叶穗纵切片问荆(或节节草)新鲜叶片(或腊叶标本)蕨腊叶标本蕨地下茎横切片蕨孢子囊群水封 片(或永久封片)蕨原叶体装片常见蕨类植物的标本仪器、耗材显微镜解剖镜放大镜镊子解剖针载玻片盖玻片培养皿滴瓶实验步骤(一)石松亚门 Lycophyt

几种常用的蛋白鉴定方法

 传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。 1  

几种常用的蛋白鉴定方法

传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。1  图象

几种常用的蛋白鉴定方法

  传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。  

几种常用的蛋白鉴定方法

   传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。

几种常用的蛋白鉴定方法

几种常用的蛋白鉴定方法 传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的 comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基

裸子植物鉴定实验_其他常见裸子植物的观察鉴定

实验材料华山松等试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤观察华山松、青海云杉、刺柏、杜松,圆柏,叉子圆柏等植物。

植物组织中自由水含量的测定实验

实验方法原理 植物组织在与高浓度的糖液接触时,束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中;自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中,使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后,根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量,而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量,再减去自由

植物组织中自由水含量的测定实验

实验方法原理植物组织在与高浓度的糖液接触时,束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中;自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中,使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后,根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量,而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量,再减去自由水

植物组织中纤维素含量的测定

纤维素是植物  细胞壁的主要成分之一,纤维素含量的多少,关系到植物细胞机械组织发达与否。因而影响作物的抗倒伏,抗病虫害能力的强弱。测定粮食、蔬菜及纤维作物产品中纤维素含量是鉴定其品质好坏的重要指标。 一、原理 纤维素(Cell  ulose)为β-葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热能分解成β-

植物组织中自由水含量的测定实验

实验方法原理:植物组织在与高浓度的糖液接触时,束缚水因被原生质胶体颗粒吸附而留在组织中;自由水则因未被原生质胶体颗粒吸附而顺着水势梯度外渗到糖液中,使糖液的浓度降低。组织浸泡在糖液中一定时间后,根据糖液浓度降低的情况可算出组织中自由水的含量,而束缚水含量则可通过烘干植物组织计算出总含水量,再减去自由

植物组织中丙二醛含量的测定

实验概要植物器官衰老或在逆境下遭受伤害,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物,从膜上产生的位置释放出后,与蛋白质、核酸起反应修饰其特征;使纤维素分子间的桥键松驰,或抑制蛋白质的合成。MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。实验原理丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标

植物组织培养中愈伤组织的形成和形态发生

在植物组织培养中,主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生,使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞,通过脱分化形成愈伤组织,并由愈伤组织再分化形成植物体。愈伤组织的形成 从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细

裸子植物鉴定实验_松科鉴定

实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)银杏种子纵切片油松新鲜材料(或腊叶标本)油松叶横切片、侧柏新鲜材料(或腊叶标本)试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤(三)松科 Pinaeeae油松 ( 图 2-2

顽拗性植物组织的蛋白质组学研究实验

顽拗性植物组织的蛋白质组学研究(苯酚法提取蛋白质)实验材料植物组织                                                          试剂、试剂盒苯酚                                                  

线性泛素化的跟踪定位

  泛素(ubiquitin)是一种存在于所有真核生物(大部分真核细胞)中的小蛋白。能够与其他蛋白连接,从而参与各种调控功能(如细胞周期进程、DNA损伤修复、信号转导和各种蛋白质膜定位)。蛋白质被泛素修饰的过程称为泛素化(ubiquitination)。泛素化有许多不同的形式,无论是以单个分子的形式

基因组所小鼠组织新转录本鉴定研究取得进展

  近日,中国科学院北京基因组研究所胡松年项目组利用新一代测序数据,运用生物信息学方法,在小鼠的几个组织中发现了几千个新的转录本。该研究成果的完成拓宽了转录组数据分析的思路,有利于更全面地认识小鼠的转录组组成,并进一步补充了其基因组的注释,相关成果论文在frontiers in genetics

免疫组化实验所用的组织和细胞标本

  实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露

骨组织的免疫组化染色应采用什么方法?

  在对骨骼生理和病理的研究过程中,经常需要制备脱钙的骨免疫组化标本,然而由于骨骼组织的特殊性,制备好的骨组化标本也并不是一件容易的事。由于骨组织中60%以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶,脱钙是标本制备中至关重要的过程。一些强酸如盐酸,硝酸等虽能快速有效除去骨组织中钙盐,但对其中的抗原蛋白也产生了致命

蕨类植物鉴定实验——其他常见蕨类植物鉴定

实验材料石松标本卷柏(或中华卷柏)腊叶标本石松茎横切片石松卷柏孢子叶穗纵切片问荆(或节节草)新鲜叶片(或腊叶标本)蕨腊叶标本蕨地下茎横切片蕨孢子囊群水封 片(或永久封片)蕨原叶体装片常见蕨类植物的标本仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤(四)其他常见蕨类植物的观察另外观察槐

多聚螯合物酶组化实验

实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)为骨架,将特异性抗体和 HRP 结合在一起,形成 HRP-多聚化合物-特异性抗体巨大复合物,该复合物内不含第二抗体及亲和素。染色时,只需在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗体 EPOS 试剂,孵育 30~60 min 即可完成。勿需再加

多聚螯合物酶组化实验

EPOS 法 EnVision 法 UIP 法 PowerVision 法             实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)

植物抗逆性的鉴定实验

实验方法原理 当植物组织受干旱或其它不良条件如高温、低温等影响时,常能伤害原生质体的结构而引起透性增大,结果细胞内含物将有不同程度的外渗,使外渗液的电导度增大,用电导仪即可明显地测定出来,透性变化愈大,表示受伤愈重、抗性愈弱。实验步骤 一、材料与设备1. 植物材料:小麦、玉米或其它作物叶片。2.

植物抗逆性的鉴定实验

实验方法原理:当植物组织受干旱或其它不良条件如高温、低温等影响时,常能伤害原生质体的结构而引起透性增大,结果细胞内含物将有不同程度的外渗,使外渗液的电导度增大,用电导仪即可明显地测定出来,透性变化愈大,表示受伤愈重、抗性愈弱。实验步骤:一、材料与设备1. 植物材料:小麦、玉米或其它作物叶片。2.

裸子植物鉴定实验_苏铁科鉴定

实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)银杏种子纵切片油松新鲜材料(或腊叶标本)油松叶横切片、侧柏新鲜材料(或腊叶标本)试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤苏铁科cycadaceae苏铁为常绿乔木,茎短不

裸子植物鉴定实验_柏科鉴定

实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)银杏种子纵切片油松新鲜材料(或腊叶标本)油松叶横切片、侧柏新鲜材料(或腊叶标本)试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤柏科Cupressaeeae侧柏,如图取侧柏新鲜

裸子植物鉴定实验_银杏科鉴定

实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)银杏种子纵切片油松新鲜材料(或腊叶标本)油松叶横切片、侧柏新鲜材料(或腊叶标本)试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤(二)银杏科 Ginkgoaceae银杏 ( 图

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

下述方案是经修改过的 Trizol 方案,用于从植物组织中分离 RNA,其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤,以选择性地沉淀 RNA,而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态