植物组织中几种酶的组化定位鉴定

原理 在植物生理学的研究中,可利用组织化学的方法,来说明植物体内的生理活动问题。例如,当需要检定某种物质性质和在植物体内分布时,用组织化学的方法,可以达到定位和定性的目的,而且有时比用剥离的官或组织,作生化测定更能说明问题。植物组织中酶的组化鉴定的基本原理,是以某物质为底物在专一酶作用下,产生一种有颜色的化合物来表明有某种酶的存在。 过氧化物酶:在过氧化氢存在下,联苯胺经酶作用脱氢而生成蓝色的络合物,反应式如下:多酚氧化酶:邻苯二酚或邻苯三酚在多酚氧化酶的作用下,产生茶褐色化合物或棕色络合物,反应式如下: 三磷酸腺苷酶:三磷酸腺苷(ATP)经酶作用分解为二磷酸腺苷(ADP),并释放出无机磷酸,与铅离子结合产生磷酸铅,遇硫则生成硫化铅黑色沉淀,可用下列简式表示: 脱氢酶:在脱氢酶作用下,氯化三苯基四氮唑(TTC)被还原为三苯基甲(TTF),溶液从无色变成红色,反应式如下: 本实验学......阅读全文

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,70%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处

植物组织中可溶性糖含量测定

在作物的碳素营养中,作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。它们在营养中的作用主要有:合成纤维素组成细胞壁;转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等;分解产物是其他许多有机物合成的原料,如糖在呼吸过程中形成的有机酸,可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸;糖类作为呼吸基质,为作物的各种合成过程和各种

多聚螯合物酶组化实验

EPOS 法 EnVision 法 UIP 法 PowerVision 法             实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)

多聚螯合物酶组化实验

实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)为骨架,将特异性抗体和 HRP 结合在一起,形成 HRP-多聚化合物-特异性抗体巨大复合物,该复合物内不含第二抗体及亲和素。染色时,只需在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗体 EPOS 试剂,孵育 30~60 min 即可完成。勿需再加

植物过氧化氢酶的简易鉴定实验

实验材料 马铃薯块茎试剂、试剂盒 H2O2邻苯二酚酒精溶液仪器、耗材 试管实验步骤 取新鲜马铃薯去皮,切成5mm见方的小块,分为两组,分别放在2支试管中,其中一组煮沸20分钟,然后分别加入5ml 3% H2O2溶液,观察有什么变化,并加以说明。几分钟后,在未经煮沸的试管中,加10滴新鲜的邻苯二酚酒精

植物过氧化氢酶的简易鉴定实验

实验材料马铃薯块茎试剂、试剂盒H2O2邻苯二酚酒精溶液仪器、耗材试管实验步骤取新鲜马铃薯去皮,切成5mm见方的小块,分为两组,分别放在2支试管中,其中一组煮沸20分钟,然后分别加入5ml 3% H2O2溶液,观察有什么变化,并加以说明。几分钟后,在未经煮沸的试管中,加10滴新鲜的邻苯二酚酒精溶液,观

昆明植物所在植物基因组印迹研究中取得进展

蓖麻基因组印迹以及其甲基化分析  基因组印记 (genetic imprinting)是一种非常重要的表观遗传学现象之一。在配子或合子发育过程中,来自亲本的等位基因或染色体发生了差异的表观修饰,导致了亲本等位基因的差异表达(即印迹基因)。在植物中基因组印迹主要发生在被子植物的三倍体胚乳组织

种子植物鉴定实验

实验方法原理植物分类主要是根据桢物各部分形态特征来进行的,在鉴定一种植物时,首先要对该种植物进行全面细致的分析观察,并作好描述记录,以利鉴定工作进行。实验材料植物材料仪器、耗材放大镜实验步骤(一)一般被子植物分析观察的内容1 生活型:是乔木、灌木、草本(一年生、二钉生或多年生),还是藤本(木质或草质

裸子植物鉴定实验

实验材料:苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)                                                                银杏种子纵切片                                

种子植物鉴定实验

实验方法原理植物分类主要是根据桢物各部分形态特征来进行的,在鉴定一种植物时,首先要对该种植物进行全面细致的分析观察,并作好描述记录,以利鉴定工作进行。实验材料植物材料                                                          仪器、耗材放大镜

植物细胞死活鉴定

1、 用质壁分离法鉴定细胞死活 (1) 原理 活细胞与死细胞在性质上有许多差别,特别是透性的变化最为明显,活细胞的原生质具有分别透性;而死细胞则为通透性。分别透性是质壁分离的先决条件,因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的则说明是死的。 (2) 仪器药品及材料 洋葱及其它植物  材

种子植物鉴定实验

实验方法原理 植物分类主要是根据桢物各部分形态特征来进行的,在鉴定一种植物时,首先要对该种植物进行全面细致的分析观察,并作好描述记录,以利鉴定工作进行。实验材料 植物材料仪器、耗材 放大镜实验步骤 (一)一般被子植物分析观察的内容1 生活型:是乔木、灌木、草本(一年生、二钉生或多年生),还是藤本(木

分子标记在基因组作图和基因定位研究中的作用

  长期以来,各种生物的遗传图谱几乎都是根据诸如形态、生理和生化等常规标记来构建的,所建成的遗传图谱仅限少数种类的生物,而且图谱分辨率大多很低,图距大,饱和度低,因而应用价值有限。分子标记用于遗传图谱构建是遗传学领域的重大进展之一。随着新的标记技术的发展,生物遗传图谱名单上的新成员将不断增加,图谱上

荧光组化实验中的注意事项

1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。2.放荧光染色在20。C以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。为此

SPA-在免疫组化中的应用

实验方法原理 由于 SPA 能结合 IgG 的 Fc 段,因此就成为天然的抗 IgG,酶标记的 SPA 可代替酶标记的 IgG 抗血清,从而测定和定位组织内的 IgG 或免疫复合物。实验材料 石蜡切片试剂、试剂盒 H2O2TBS第一抗体SPA-HRPDAB二甲苯乙醇树胶实验步骤 1. 石蜡切片常规脱

中科院吕东平课题组在细菌中实现植物泛素化途径的重建

  泛素化是一种重要的真核生物蛋白质翻译后修饰方式,它决定了被修饰蛋白的命运。  泛素化修饰的作用可概括为两点:1.参与蛋白质降解;2.直接影响蛋白质的活性和定位。  泛素激活酶(E1)、泛素结合酶(E2)、泛素连接酶(E3)、去泛素化酶、蛋白酶体共同构成了泛素-蛋白酶体系统(UPS)。在细胞内,U

植物组织制备基因组DNA实验——氯化铯法

利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。在提取过程中,染色体会发生机械断裂,产生大小不同的片段,因此分离基因组DNA时应尽量在温和的条件下操作,如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓, 以保证得到较长的DNA。实验方法原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即

植物组织和细胞显微化学染色_检测植物细胞中核酸方法

实验步骤(1)脱氧核糖核酸:孚尔根染色法是检定细胞中 DNA 的一种常用方法,主要染色液为希夫试剂。切片材料加入蒸馏水后,在盐酸 (1 mol/L) 中 60℃下保温 5-15 min, 转入室温的盐酸中1min, 蒸馏水清洗,希夫试剂染色 1-5 h, 漂洗液中漂洗 3 次,每次 2-10min,

植物组织pcr

   直接PCR(Direct PCR)使用未纯化的样本进行PCR扩增,无需核酸纯化步骤,为DNA扩增带来前所未有的便捷。如果您研究领域涉及基因分型、转基因、质粒检测、基因敲除分析、DNA来源鉴定、物种鉴定、SNP分析等,请看完下面的介绍吧。  直接PCR需要的试剂  样本裂解液   样本裂解液可自

植物伤流液中糖和氨基酸的鉴定

原理   植物根系不仅是吸收水分和矿质元素的重要器官,同时也是许多重要物质的合成器官。当植物地上部分被切去时,从伤口就有液体流出,这种现象称为伤流。伤流反映了根系的活动情况。用蒽酮试剂和茚三酮试剂可以鉴定出性糖和氨基酸的存在。   仪器药品     三角烧瓶   试管

植物细胞中的酶以什么形式存在

植物细胞中的酶以什么形式存在酶作为催化作用,作用玩之后大部分被溶酶体消灭,不会存在,再需酶需要从新生产运输;但是也有少部分酶作为细胞结构,比如叶绿体光合作用所需的部分酶就已经算作组成细胞的结构了。作用之后不会别溶酶体吞噬,故有些酶可以作为细胞的结构。A、氧气进出细胞属于自由扩散,与酶无关,不需要酶的

我所鉴定植物UDPGlcNAc合成关键酶并揭示其影响OGlcNAc糖基化调控植物生长的分子机制

原文地址:http://www.dicp.cas.cn/xwdt/kyjz/202303/t20230304_6688474.html  近日,我所生物技术研究部天然产物及糖工程研究组(1805组)尹恒研究员团队在植物糖生物学研究领域取得新进展,鉴定了植物UDP-GlcNAc合成路径关键酶,并揭示了

植物组织培养中的脱分化和再分化

植物组织培养(plant tissue culture)的理论根据是植物细胞的全能性。但是,在一个完整的植株上,各部分的体细胞只能表现一定的形态,承担一定的功能,这是由于受具体器官或组织所在环境影响的缘故。植物体的一部分一旦脱离原来所在的器官或组织,成为离体状态时,在一定的营养、激素等外界条件下,植

植物组织培养中的脱分化和再分化

植物组织培养(plant tissue culture)的理论根据是植物细胞的全能性。但是,在一个完整的植株上,各部分的体细胞只能表现一定的形态,承担一定的功能,这是由于受具体器官或组织所在环境影响的缘故。植物体的一部分一旦脱离原来所在的器官或组织,成为离体状态时,在一定的营养、激素等外界条件下,植

酶免疫组化的关键环节相关介绍

  1)标本固定  固定的目的是①防止标本从玻片上脱落;  ②除去妨碍抗原-抗体结合的类脂,使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果;  ③固定的标本易于保存。固定剂的选择一般用4%多聚甲醛,但睾丸组织、眼可能要选用Bouin’s液或mDF液效果较好。  2)脱水、石蜡包埋和制片  脱水用梯度乙醇(由

石蜡切片的酶免疫组化注意事项

   一. 石蜡切片在染色过程中出现脱片现象?   一般来说,如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话,如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。你可以试试一下的方法:   1.一般用APES:丙酮=1:50的处理液来处理片子,处理5min左右,然

酶免疫组化技术的优缺点有哪些

应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特

石蜡切片的酶免疫组化注意事项

一. 石蜡切片在染色过程中出现脱片现象?一般来说,如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话,如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。你可以试试一下的方法:1.一般用APES:丙酮=1:50的处理液来处理片子,处理5min左右,然后水洗,烘干既可用于贴

酶免疫组化技术的优缺点有哪些

应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特

AAS光谱仪中的试样原子化器有几种

 原子化器主要有两大类,即火焰原子化器和电热原子化器。