骨组织的免疫组化染色应采用什么方法?

在对骨骼生理和病理的研究过程中,经常需要制备脱钙的骨免疫组化标本,然而由于骨骼组织的特殊性,制备好的骨组化标本也并不是一件容易的事。由于骨组织中60%以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶,脱钙是标本制备中至关重要的过程。一些强酸如盐酸,硝酸等虽能快速有效除去骨组织中钙盐,但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏,使接下来的工作无法进行;这里介绍一种由袁永辉建立的EDTA低温脱钙法,可满足骨组织免疫组化染色的要求。 1.组织处理:取材骨组织投入到4%多聚甲醛中,4℃固定24~48小时。 2.脱钙处理:投入15% EDTA-2Na于4℃冰箱脱钙3周,每周换1次脱钙液,以细针刺人为脱钙终点。 3.后续操作:取出蒸馏水冲洗→梯度浓度乙醇脱水→石蜡包埋→切片→4μmSP法常规免疫组化染色。 4.结果判定:经EDTA低温脱钙后骨小梁结构保存完整,细胞因子IGF-1在骨细胞、成骨细胞及骨髓基质细胞胞质中都有表达,呈黄色丝状分布。 5.注意......阅读全文

肌肉组织染色实验——横纹肌组织染色

肌肉组织由肌细胞和肌纤维组成,可分为骨骼肌、心肌和平滑肌。骨骼肌含有横纹,肌纤维被结缔组织连接与包围,纤维成束排列,而每条肌纤维周围含有网状纤维和少贵的结缔组织。心肌纤维也含有横纹,纤维之间相互连接成网状结构。平滑肌纤维的外表面含有网状纤维和胶原纤维成分。根据需要通过不同的特殊染色和组织化学方法,能

肌肉组织染色实验——早期心肌组织病变染色

实验方法原理早期心肌组织病变染色,是 Lie 和 Nagar-Olsen 利用缺氧心肌对酸性复红的亲和力,称为嗜酸性复红染色法;利用其对碱性复红的亲和力,称为亲碱性复红染色法。能够较好地显示心肌缺氧的变化情况。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒苏木精硫酸铝铵黄色氧化汞甘油冰醋酸蒸馏水碱性复红苦味酸纯丙

组织学——染色

Hematoxylin and Eosin Staining of Tissue for LCM (Arcturus)   Immunohistochemical Staining (IHC) (Arcturus)For optimal LCM from IHC samples, it is nec

神经组织染色实验

实验方法原理 神经元细胞核周含有尼氏小体,在一定条件影响下或神经元受到损伤时,尼氏小体可减少或消失。常用 olszwski 法能够较好地显示尼氏小体。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 焦油紫乙酸钠蒸馏水冰醋酸二甲苯乙醇树胶实验步骤 焦油紫染色液:焦油紫 1 g,乙酸钠 2.2 g,蒸馏水 97 m

组织切片Masson染色

  Masson染色是利用两到三种阴离子染色液对组织中的纤维和炎性因子着色的染色方法,染色后可使胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,肌纤维、胞浆呈红色,细胞核呈蓝黑色  一、实验用品  组织蜡块、苏木素染液、盐酸酒精分化液、丽春红酸性复红液、苯胺蓝染液、1%磷钼酸、2%冰醋酸、0.2%冰醋酸、梯度乙醇、二甲

神经组织染色实验——神经髄鞘染色

实验方法原理神经纤维可分为有髄和无髄神经纤维,有髄神经纤维包括轴突、髄鞘和神经膜。髄鞘是一层很厚的管状结构,是一种脂蛋白,可称为糖脂,常用 Loyez 苏木精染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒苏木精纯乙醇蒸馏水碳酸锂饱和水溶液盐酸乙醇二甲苯中性树胶铁明矾水溶液实验步骤碳酸锂-苏木精染色液:苏

神经组织染色实验——神经纤维染色

实验方法原理神经纤维是由神经元的轴突和树突等成分组成,经过银染后,再用还原剂处理,使银颗粒沉着于纤维和细胞中。常用 Bielschowsky 染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒硝酸银水溶液无水乙醇浓氨水蒸馏水二甲苯乙醇中性树胶氯化金水溶液甲醛硫代硫酸钠仪器、耗材滤纸37℃ 温箱实验步骤氨银溶液

免疫组织化染色

验材料新鲜组织试剂、试剂盒二甲苯酒精H2O2抗原修复液枸橼酸钠缓冲液石蜡福尔马林PBSDAB苏木素树胶丙酮打孔液柠檬酸钠APES仪器、耗材恒温摇床高压锅塑料切片架耐温玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰冻切片机载玻片实验步骤一.石蜡切片免疫组化染色实验步骤:1.石蜡切片脱蜡至水:(石蜡切片染色前应置60℃ 1

骨组织的荧光染色

Fluorescent Label in BoneSome fluorescent compounds, which are fixed in newly formed calcified tissue, are used to label bone deposition. Such labels

免疫组织化染色

实验材料 新鲜组织试剂、试剂盒 二甲苯酒精H2O2抗原修复液枸橼酸钠缓冲液石蜡福尔马林PBSDAB苏木素树胶丙酮打孔液柠檬酸钠APES仪器、耗材 恒温摇床高压锅塑料切片架耐温玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰冻切片机载玻片实验步骤 一.石蜡切片免疫组化染色实验步骤:1.石蜡切片脱蜡至水:(石蜡切片染色前应置

结缔组织染色实验

实验方法原理 胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的,具有双折光性,经过特殊染色后,能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸,能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 丽春红 S 水

肌肉组织染色实验

实验方法原理 肌肉组织由肌细胞和肌纤维组成,带有横纹结构,通常选用 Mallory 磷钨酸-苏木精染色法(PTAH)显示横纹肌的变化情况。染色剂与所选择的组织成分能够牢固地结合,呈蓝色或棕红色。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 苏木精磷钨酸蒸馏水 高锰酸钾水溶液硫酸水溶液二甲苯乙醇中性树胶实验步骤

组织免疫荧光染色

  概述:  织免疫荧光染色多是使用组织的冰冻切片,因为在切片过程中基本上暴露了细胞和细胞核内结构,故不需要使用细胞通透剂(Triton-100,NP-40)。染色后的切片应放置冰箱内避光保存,防止荧光淬灭。常用的荧光素有:异硫氰酸(fluorescein isothiocyanate,FITC,发

结缔组织染色实验——结缔组织三色染色法

实验方法原理结缔组织中含有大量的细胞间质纤维和基质组分,主要成分为蛋白和多糖,常用 Masson 染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒酸性复红丽春红橘黄 G乙酸冰醋酸磷钼酸亮绿实验步骤Masson 染色液:酸性复红 1 g,丽春红 1 g,橘黄 G 2 g,0.5% 乙酸 100 ml。亮绿染

结缔组织染色实验——胶原纤维染色

结缔组织广泛分布于入体和动物体内,而疏松结缔组织在组织损伤后的修复过程中,纤维细胞可转化为活跃的成纤维细胞。成纤维细胞能形成胶原纤维、弹力纤维和网状纤维以及基质等成分。致密结缔组织的间质内含有大量纤维,排列紧密,细胞和基质比较少,主要含有弹性纤维,又称为弹性致密结缔组织。网状结缔组织由网状细胞和网状

神经组织染色实验——神经尼氏体染色

神经组织是构成神经系统的基本成分,主要由神经细胞、神经胶质细胞和神经纤维组成。神经细胞尼氏体是分布于神经细胞质内的三角形或椭圆形小块或颗粒状物质。神经元的轴突及胶质细胞由形成的膜包裹,或者神经轴突(树突)被神经膜细胞包襄,以及被小胶质包裹形成神经纤维。神经纤维进一步分为有髓神经纤维和无髄神经纤维。实

免疫组织/细胞化学染色1

一 基本原理免疫组织/细胞化学是利用抗原抗体具有高度特异性结合反应的原理,采用已知抗体检测组织或细胞的抗原物质,然后以适当的方式显示其结合信号以证明组织或细胞是否存在未知抗原,并进行定性、定位或定量的研究。二 基本步骤 1 三步法:以SP(链霉卵白素-过氧化物酶)试剂盒为例: 石蜡切片脱蜡至

免疫组织/细胞化学染色2

四 结果分析 编号 阳性片 待检片 阴性对照 结论 1 - -

结缔组织的染色方法

结缔组织的染色方法 一般所说的结缔组织是指纤维性结缔组织而言,其结构特点是细胞间质内基质外含有较多的纤维成分,主要是胶原纤维、弹性纤维和网状纤维,我们仅简述这三种纤维的常见染色方法。 (1)Mallory三色染色法:常用于判定多种组织、器官的病变程度及修复情况,区分肿瘤组织中的纤维成分与平滑肌。 染

特染:-结缔组织染色

一、Mallory三色染色法1. 试剂配制(1)重铬酸钾液 重铬酸钾2.5g,醋酸5ml,蒸馏水95ml(2)苯胺蓝桔黄G液 苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100ml(3)酸性复红液 酸性复红0.5g,蒸馏水100ml2.染色步骤(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。(2

组织细胞化学染色的范围

  结缔组织、肌肉组织、神经组织、血液、造血组织、内分泌细胞、骨组织、软骨组织、蛋白质(氨基酸、酶类)、核酸、多糖、脂类、色素类、内外源性沉着物、盐类或金属类、病原微生物等。

细胞组织染色方法大盘点

在实验中,为了能够清楚地观察到目标组织或细胞,通常会采用染色的方式进行直观验证。面对形态各异的组织和细胞,研究学者们想到了多种多样的染色方法以佐证自己的实验结果。HE染色又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,简称E,这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋

细胞组织染色方法大盘点

  HE染色  又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,简称E,这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。  这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可

免疫组织化学染色

实验概要本说明适用于没有全自动染色机或 capillary gap system(如 Shandon Sequenza)等的实验室。可用移液器人工加试剂,也适用于全自动或半自动系统。培养箱应配备有加湿器避免组织变干。变干发生在任何阶段最后都会导致非特异性染色及高背景染色。带密封盖的浅塑料盒,底部铺上

免疫组织化学染色

实验概要本说明适用于没有全自动染色机或 capillary gap system(如 Shandon Sequenza)等的实验室。可用移液器人工加试剂,也适用于全自动或半自动系统。培养箱应配备有加湿器避免组织变干。变干发生在任何阶段最后都会导致非特异性染色及高背景染色。带密封盖的浅塑料盒,底部铺上

结缔组织染色实验——弹力纤维与胶原纤维染色

实验方法原理弹力纤维由随机交联盘绕的一些肽链组成,含有丰富的二硫键糖蛋白成分,所以可称为弹性蛋白。易与染色液中碱基结合,为了能够更好地显示弹力纤维和胶原纤维成分,选用维多利亚蓝、丽春红和苦味酸组合双重染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒维多利亚蓝糊精间苯二酚蒸馏水乙醇三氯化铁水溶液浓盐酸苯酚二

结缔组织染色实验——网状纤维与胶原纤维染色

实验方法原理网状纤维是网状结缔组织中的一种纤维,由交错排列的纤细的纤维组成。由于网状纤维由含有糖蛋白的胶原蛋白组成,这种组织蛋白质易与氨性银结合,再选用酸性染料染色液,能够显示网状纤维与胶原纤维的二种组织结构成分。常用 Gomori 银与丽春红-苦味酸复合染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲

特殊染色及酶组织化学染色液怎么用

特殊染色及酶组织化学染色液是利用冻结或固定的切片,在一定的条件下(具有酶的底物等)全酶进行催化作用,产生一种可见产物,沉淀在酶所在的部位,最终通过显微镜对酶的活性进行定位或定量研究。特殊染色是为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成

各种组织特殊染色法—纤维素染色法

纤维素又称纤维蛋白,在正常的情况下,它是血液内的纤维蛋白原分子聚合而形成的一种特殊蛋白质。正常的组织是见不到纤维素的。但是,当组织受损,血管内皮受到了较为严重的损害,血管通透性随之升高,则可导致大量纤维蛋白的漏出。纤维素性炎症就是以纤维素渗出为主[6]的一种抗损害的症状。在HE感染时于镜下可见到大量

什么是特殊染色及酶组织化学染色诊断

特殊染色是为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等