沙门氏菌回复突变实验
目的 :学习利用细菌检测基因突变 的方法 Ames试验 即鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变 试验,是目前检测基因突变最常用方法之一。 原理 :利用鼠伤寒沙门氏菌突变株,即组氨酸缺陷型,其原始菌株菌体内的组氨酸是通过自身一系列酶催化反应合成的,这种能自身合成所需营养成份的菌株叫做野生型菌株。本试验用鼠伤寒沙门氏菌为突变株,其不能合成组氨酸,而必须由外界提供这种菌珠被称为营养缺陷式营养实变型(his-)。当诱变剂作用于菌株后,在菌株遗传物质的特定位点发生基因回复突变成为野生型(his+),故在缺乏组氨酸的培养基上,只存少数自发回变菌落生长,而能诱发细菌 回变的致突变物可使细菌生长增多,从而可判断被药物是否具有致实变性。 材料 :菌株,鼠伤寒沙门氏菌TA97,TA98,TA100,TA102。 器材 :恒温培养箱,干燥箱,高压消毒锅,水溶锅,紫外线灯(15w),药物天平,分析天平 酒精灯......阅读全文
沙门氏菌回复突变实验
目的 :学习利用细菌检测基因突变 的方法 Ames试验 即鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变 试验,是目前检测基因突变最常用方法之一。 原理 :利用鼠伤寒沙门氏菌突变株,即组氨酸缺陷型,其原始菌株菌体内的组氨酸是通过自身一系列酶催化反应合成的,这种能自身合成所需营养成份的菌株叫做野生型菌株
沙门氏菌回复突变实验
目的 :学习利用细菌检测基因突变 的方法 Ames试验 即鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变 试验,是目前检测基因突变最常用方法之一。 原理 :利用鼠伤寒沙门氏菌突变株,即组氨酸缺陷型,其原始菌株菌体内的组氨酸是通过自身一系列酶催化反应合成的,这种能自身合成所需营养成份的菌株叫做野生型菌株
鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验简介
又称Ames试验,检测受试物诱发鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型突变株(his-)回复突变成野生型(his+)的能力。试验菌株都有组氨酸突变(his-),不能自行合成组氨酸,在不含组氨酸的最低营养平皿上不能生长,回复突变成野生型后能自行合成组氨酸,可在最低营养平皿上生长成可见菌落。计数最低营养平皿
Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(一)
鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验,Salmonella Typhimurium / Reverse Mutation Assay)于 1975年建立并不断发展完善,目前已被世界各国广为采用,已经成为毒理学实验室必需开展的重要实验项目。Ames实验用于检测待分析物质的致突变作用,该验灵敏、
Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(四)
试验设计及受试物的特殊处理1) 剂量设计 决定受试物最高剂量的原则是受试物对试验菌株的毒性和受试物的溶解度。对于纯的化学物质,一般最低剂量为每平皿0.2 μg,最高剂量为 5 mg,或溶解度允许,或饱和浓度,或对细菌产生最小毒性浓度。对于毒性很低、摄入量很大的定型产品,可根据其溶解度和对细菌
Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(二)
6.10 菌株鉴定用和特殊用途试剂 6.10.1 组氨酸—生物素平板成分:琼脂粉 15g蒸馏水 944mL(V-B)培养基E 20mL20%葡萄糖 20mL灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5g/100mL) 10mL灭菌0.5mmol/L生物素溶液 6mL配制:高压灭菌琼脂和水后,将灭菌20%葡萄糖,
Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(三)
12 数据处理和结果判断记录受试物各剂量组、空白对照(自发回变)、溶剂对照以及阳性诱变剂对照的每皿回变菌落数,并求平均值和标准差。如果受试物的回变菌落数是溶剂对照回变菌落数的两倍或两倍以上,并呈剂量-反应关系者,则该受试物判定为致突变阳性。受试物经上述四个试验菌株测定后,只要有一个试验菌株,无论在
关于致突变试验—鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验的介绍
致突变试验即化学致突变物的检测试验,是指对致癌物质进行初筛,是人类预防癌症的重要手段,其中以细菌致突变试验应用最为广泛。 又称Ames试验,检测受试物诱发鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型突变株(his-)回复突变成野生型(his+)的能力。试验菌株都有组氨酸突变(his-),不能自行合成组氨酸,
Ames检测法的原理及试验方法
原理 化学物质引起的诱变往往不是直接的,它要经过生物的消化吸收,特别是高等生物的肝脏中的有关酶的作用再起作用。而且,诱变剂仅仅改变突变频率,而不直接影响突变方向,所以同样的诱变剂也能导致回复突变。 实验方法 首先对一组雄性大鼠进行腹腔注射芳香族化合物,能大大增强鼠肝脏酶系的活性,4天后杀鼠
Ames试验的目的和原理
鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的组氨酸营养缺陷型(his-)菌株,在含微量组氨酸的培养基中,除极少数自发回复突变的细胞外,一般只能分裂几次,形成在显微镜下才能见到的微菌落。受诱变剂作用后,大量细胞发生回复突变,自行合成组氨酸,发育成肉眼可见的菌落。某些化学物质需经
基因突变的检测方法有哪些?
从基因突变的性质来看,检测方法分为显性突变法、隐性突变法和回复突变法三类。①显性致死突变法,用待测物质处理雄性小鼠,使处理的雄鼠和未处理的雌鼠交配,观察母鼠子宫中的死胎数,死胎数愈多则说明诱发的显性致死突变愈多。这一方法适用于慢性处理,其优点是可靠性较大,而且测试对象是哺乳动物。缺点是不能区别出药物
关于埃姆斯实验的基本简介
Ames试验又称鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体(Salmonellatyphimurium/microsomeassay)试验。本方法是利用鼠伤寒沙门菌(Salmonellatyphimurium)的组氨酸营养缺陷型菌株发生回复突变的性能来检测被检物质是否具有致突变性。
沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程实验准备
以下试剂都必须在开始分析之前准备好。 ①PBS 吐温溶液。 ②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。 ③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。 ④终止液不需要复原。如果出现结晶可在35
Ames试验的类型
Ames试验是由由美国加利福利亚大学伯克利分校生化系B.N.Ames教授实验室在1975年建立的鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验,从建立到后来的不断完善,现在Ames试验被广泛应用于化合物的致突变性和潜在致癌性的初筛检验。为了对Ames试验有更多的了解,特收集整理了网上的资料,对Ames试验的类型进行
Ames检测法的试验方法
首先对一组雄性大鼠进行腹腔注射芳香族化合物,能大大增强鼠肝脏酶系的活性,4天后杀鼠取肝组织,捣碎后离心制备肝酶(S9)悬液,然后将待测产物和S9一级沙门氏菌的组氨酸突变株混合后倒平板,若能产生回复突变的待测产物则可判定为诱变物。
沙门氏菌
《Bad Bug Book》Foodborne Pathogenic Microorganisms and Natural Toxins Handbook1.主要性质沙门氏菌是一群杆状、运动型细菌(非运动型的有鸡沙门氏菌、雏沙门氏菌),不产孢子的革兰氏阴性菌。沙门氏菌普遍存在于动物中,特别是家禽和猪
沙门氏菌属感染的实验室检查
1.血像 白细胞计数多在正常范围,伤寒型及重危者的白细胞可稍低于正常,有化脓性并发症者白细胞计数明显增高,可达(20~30)×10^9/L。 2.大便常规 胃肠炎型大便量多,水样,很少或无粪质,偶呈黏液或脓性便。 3.细菌培养 胃肠炎型可从呕吐物、粪便及可疑食物中培养到病原菌,直肠拭子培养的
沙门氏菌临床表现及实验室诊断
沙门氏菌属(Salmonella)是一大群形态、生化性状及抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。 沙门氏杆菌无芽胞,无荚膜,多数细菌有周身鞭毛和菌毛,有动力。在普通培养基上呈中等大小、表面光滑的菌落,无色半透明。不分解乳糖、蔗糖和水杨酸,能分解葡萄糖和甘露醇。吲哚、尿素分解试验及V-P试验均为阴性。
关于克林霉素磷酸酯注射液的毒理研究介绍
遗传毒性:Ames沙门氏菌属回复突变试验和大鼠微核试验结果均为阴性。 生殖毒性:大鼠经口给予本品剂量为0.3g/kg,未对动物的交配和生育力有影响。大鼠和小鼠分别经口给予克林霉素剂量高达0.6g/kg或皮下注射剂量为0.25mg/kg,结果未见有致畸作用。然而,尚未对妊娠妇女进行充分和严格的临
蔓延全美的鼠沙门氏菌疫情源自实验室
国际在线消息:美国疾病控制和预防中心29日宣布,目前在全美35个州蔓延的鼠伤寒沙门氏菌疫情不是因食品污染,而是因微生物实验室中的鼠伤寒沙门氏菌传染引发的。 美疾控中心的官员说,自去年8月以来,美国35个州相继发生鼠伤寒沙门氏菌疫情,迄今已造成至少73人染病,其中1人死亡。有关部门经过
酶标仪沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程
一、实验准备 以下试剂都必须在开始分析之前准备好。 ①PBS 吐温溶液。 ②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。 ③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。 ④
沙门氏菌简介
概述沙门氏菌属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌,是一大群寄居于人类和动物肠道中的生物学性状相似的革兰阴性杆菌,并不断随着人和动物的排泄物分布于土壤、水和腐物中。肠道杆菌归属肠杆菌科,其种类繁多,类型复杂,目前已知肠杆菌科有30 个菌属,120 个以上菌种。其中大多数为肠道正常菌群,在肠道微生态环
关于艾得辛的毒理作用介绍
遗传毒性:艾拉莫德鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验、中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验的结果均为阴性。 生殖毒性:雌性和雄性大鼠在交配前经口服用艾拉莫德,在剂量达到60mg/kg/天时(按体表面积折算计,约相当于人体推荐剂量的10倍),交配率出现下降。在胚胎发育阶段,雌性妊娠大鼠经口服用
简述艾得新的毒理作用
遗传毒性:艾拉莫德鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验、中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验的结果均为阴性。 生殖毒性:雌性和雄性大鼠在交配前经口服用艾拉莫德,在剂量达到60mg/kg/天时(按体表面积折算计,约相当于人体推荐剂量的10倍),交配率出现下降。在胚胎发育阶段,雌性妊娠大鼠经口服用
关于艾拉莫德片的毒性作用介绍
遗传毒性:艾拉莫德鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验、中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验的结果均为阴性。 生殖毒性:雌性和雄性大鼠在交配前经口服用艾拉莫德,在剂量达到60mg/kg/天时(按体表面积折算计,约相当于人体推荐剂量的10倍),交配率出现下降。在胚胎发育阶段,雌性妊娠大鼠经口服用
荧光酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌的实验过程
一、实验准备 以下试剂都必须在开始分析之前准备好。①PBS 吐温溶液。②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。④终止液不需要复原。如果出现结晶可在35℃
沙门氏菌及检验
人沙门氏菌病有四类综合症:沙门氏菌病;伤寒;非伤寒型沙门氏菌败血症和无症状带菌者。沙门氏菌胃肠炎是由除伤寒沙门氏菌外任何一型沙门氏菌而所致,通常表现为轻度,持久性腹泻。伤寒实际上是由伤寒沙门氏菌所致。未接受过治疗的病人致死率可超过10%,而对经过适当医疗的病人其致死率低于1%,幸存者可变成慢性无症状
什么是沙门氏菌?
沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌。沙门氏菌鉴定的传统方法主要是根据形态学特征、培养特征、生理生化特征、抗原特征、噬菌体特征等。1885年沙门氏等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌,故定名为沙门氏菌属。沙门氏菌属有的专对人类致病,有的只对动物致病,也有对人和动物都致病。沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏
沙门氏菌的制备
①前增菌 在非抑制性肉汤中进行前增菌,促使沙门氏菌开始生长。所用方法随样品而异,应按 AOAC 967.26A(常规方法)或现行版的细菌学分析手册进行。但下列样品除外。a.生的或严重污染的样品 以无菌操作称取25g 样品放入灭菌的打碎杯内,加入225mL 灭菌的乳糖肉汤,高速(约20000r/m
沙门氏菌的简介
沙门氏菌病的病原体。属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌。已发现的近一千种(或菌株)。按其抗原成分,可分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌组。其中与人体疾病有关的主要有甲组的副伤寒甲杆菌,乙组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌,丙组的副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌,丁组的伤寒杆菌和肠炎杆菌等。除伤寒杆菌、副伤寒甲杆菌和副