细胞共定位
实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra),限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI),金粉,无水乙醇,2.5MCaCl2 ,20ul 0.1M亚精胺实验设备 PCR扩增仪,PDS-1000/He型基因枪,激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss LSM 510 )实验材料 洋葱实验步骤 1. 载体的构建pA7- CFP- AtCOP1,pA7-AtCRY1-YFPpA7- CFP-OsCOPl,pA7-OsCRY1b-YFP中间载体pA7-CFP和pA7-YFP为本实验室构建。将AtCOPl(引物为AtCOP1XhoI5' 和AtCOP1 SpeI3')和AtCRYl(引物为AtCRY1XhoI5'和AtCCT1SpeI3')分别用高保真聚合酶(pfu ultra)进行PCR扩增,纯化PCR产物,用XhoI/SpeI双酶切......阅读全文
骨骼肌动蛋白和黏着斑蛋白侧向光学平面上的共定位
举一个例子, 图 1 的一系列图表明了骨骼肌动蛋白和黏着斑蛋白侧向光学平面上的共定位(激光扫描共聚焦显微镜中的 XY 面)。这些共定位点可作为肌动蛋白丝的成核位点,也可作为外部介质、质膜和肌动蛋白骨架之间的交联剂。图 1( a)是 Alexa Fluor 568 通道(目标对象是黏着斑蛋白),由 5
细胞共培养的作用和目的介绍
培养作用 共培养体系主要作用:诱导细胞向另一种细胞分化;诱导细胞自身分化;维持细胞功能和活力;调控细胞增殖;促进早期胚胎发育和提高代谢产物产量。 培养目的 目的:共培养体系主要用于诱导细胞向另一种细胞分化,诱导细胞自身分化,维持细胞功能和活力,对细胞增殖进行调控,促进早期胚胎的发育和提高代
细胞共培养体系的培养方法介绍
细胞共培养就是两种不同的细胞共同培养。细胞共培养技术最多应用于骨细胞和神经细胞。细胞共培养体系主要通过两种方法建立:① 直接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中,不同种类的细胞之间直接接触;② 间接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上,然后将这两种载体置
用缺失定位法进行基因定位
缺失定位法一个细胞中的两个同源染色体中的一个上有一个突变基因,另一染色体上有一小段已知范围的缺失,如果这一突变基因的位置在缺失范围内,便不可能通过重组而得到野生型重组体;如果突变基因不在缺失范围内,那么就可以得到野生型重组体。利用一系列已知缺失位置和范围的缺失突变型,便能测定突变型基因的位置。
使用转录定位法进行基因定位
许多 RNA病毒的整个基因组往往作为一个单位转录。随着转录的进行,由基因组上各个基因所编码的蛋白质也依序在寄主细胞中出现。当寄主细胞被紫外线照射使本身的蛋白质合成受到抑制时,病毒蛋白的出现更为明显。紫外线照射也起着抑制病毒基因组的转录的作用。紫外线在 RNA分子的某一部位造成损伤后,损伤的部位和它后
细胞共培养与细胞混合培养有什么区别
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,
细胞共培养与细胞混合培养有什么区别
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,
关于细胞凋亡的早期检测—细胞色素C的定位检测介绍
细胞色素C作为一种信号物质,在细胞凋亡中发挥着重要的作用。正常情况下,它存在于线粒体内膜和外膜之间的腔中,凋亡信号刺激使其从线粒体释放至细胞液,结合Apaf-1 (apoptoticprotease activating factor-1)后启动caspase级联反应:细胞色素C/Apaf-1复
亚细胞定位的免疫荧光法介绍
1、直接法 将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。 2、间接法 如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(第一抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(第二抗体)与抗原标本反应
细胞学图进行基因定位的方法介绍
通过种种方法可以测得基因之间的距离,但图距并不表示绝对长度,而且在不同的生物中同一图距代表不同的实际长度。通过细胞遗传学的方法可以测定基因的实际位置,这样绘制的基因位置图称为细胞学图,而通过一般遗传学方法绘制的图则称为遗传学图。在杂合的二倍体生物中,由于显性的野生型基因的存在,隐性的突变基因得不到表
基因定位方法介绍单元化定位法
在构窠曲霉这一类真菌的准性生殖过程中,杂合二倍体细胞在有丝分裂时常随机地丢失它的染色体。染色体在多次有丝分裂过程中逐条丢失而使二倍体细胞终于转变为单倍体细胞的过程称为单元化。如果一对染色体中带有显性的野生型基因的染色体丢失了,那么同源染色体上隐性基因的性状便得以表现。此外,通过体细胞交换也可以从杂合
饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞
试剂和材料:1. MSCs培养基;2. 6孔培养板;3. 丝裂霉素C,100μg/ml;4. 共培养的培养基:IMDM添加10%FBS,100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素;5. 细胞因子(干细胞因子,IL-6,Flt-3配体,促血小板生成素);实验方法:1. 将脐带血来源的间充质干细胞(C
两种细胞共培养如何平衡发展
用于诱导细胞向另 一种细胞分化,诱导细胞自身分化,维持细胞功能和活力,对细胞增殖进行调 控等。细胞共培养体系包括直接共培养体系和间接共培养体系
细胞生物学术语共翻译运输
中文名称共翻译运输英文名称cotranslational transport定 义分泌蛋白合成过程中肽链边合成边转移至内质网腔中的运输方式。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生理(二级学科)
地下电缆故障定位仪的定位测深
通过发射机对地下电缆发送出1千赫兹电磁波信号,利用电缆定位仪探头与磁力线地平面垂直相切时,收到的信号最小(几乎为零)的原理来测定电缆的走向和深度。当探头与地平面平行前进,信号音响突然变小时,即为电缆的断路点和短路点。 1、零值法(最小法):将探头垂直于地面,在电缆正上方时,收到的信号最小(表头
缺失定位法进行基因定位的方法介绍
一个细胞中的两个同源染色体中的一个上有一个突变基因,另一染色体上有一小段已知范围的缺失,如果这一突变基因的位置在缺失范围内,便不可能通过重组而得到野生型重组体;如果突变基因不在缺失范围内,那么就可以得到野生型重组体。利用一系列已知缺失位置和范围的缺失突变型,便能测定突变型基因的位置。
转录定位法进行基因定位的方法介绍
许多 RNA病毒的整个基因组往往作为一个单位转录。随着转录的进行,由基因组上各个基因所编码的蛋白质也依序在寄主细胞中出现。当寄主细胞被紫外线照射使本身的蛋白质合成受到抑制时,病毒蛋白的出现更为明显。紫外线照射也起着抑制病毒基因组的转录的作用。紫外线在 RNA分子的某一部位造成损伤后,损伤的部位和它后
体细胞交换法进行基因定位的方法介绍
三点测验和着丝粒距离法中所测定的都是发生在减数分裂中的染色体交换。1936年美国遗传学家C.斯特恩在果蝇中发现体细胞在有丝分裂过程中也可以发生染色体交换(见连锁和交换)。50年代中G.蓬泰科尔沃等在研究构窠曲霉时发展起来一种利用体细胞交换的系统的基因定位方法。在进行有丝分裂的杂合二倍体细胞中,体细胞
星型母细胞胶质瘤的神经定位症状
神经定位症状依肿瘤生长位置不同而异 1.大脑星形细胞瘤 60%患者发生癫痫,约1/3患者以癫痫为首发症状。 2.小脑星形细胞瘤 患侧肢体共济失调,动作笨拙,持物不稳,肌张力和腱反射低下等是其显著特征。 3.丘脑星形细胞瘤 病变对侧肢体轻瘫,感觉障碍及半身自发性疼痛,患侧肢体共济运动失调、舞
Science:首次揭示蛋白组亚细胞结构定位地图
对于人细胞中的蛋白是如何在细胞中定位的首次分析于5月11日在线发表在Science上,这项研究,揭示了在给定的一个细胞中,大部分的人类蛋白被发现存在一个以上的定位位置。 基于瑞典的Cell Atlas计划,研究人员检查了对应大部分蛋白编码基因的人类蛋白组的空间分布,空前地详细描述了蛋白在多个细
《科学》:蛋白在细胞内的“定位”机制得以阐明
加拿大和美国科学家最新研究发现,一种单价酸性脂对蛋白在细胞内的精确“定位”起到调控作用。该研究结论回答了一个重要的细胞生物学问题,并为一项相关的争论找到了依据。相关论文发表在1月11日的《科学》杂志上。 科学家长期以来推测,许多蛋白正是利用酸性脂及其产生的负电势来在细胞膜结构间分布、定位,换句话说,
新型光可控化学荧光探针-实现细胞精准定位
华东理工大学和中科院上海药物所的一项最新合作研究为细胞的靶向、精准功能标记研究提供了新的光可控化学探针工具。相关研究成果日前在线发表于《自然-通讯》。 可靶向、精准探测不同细胞生命和疾病过程的荧光探针技术,对生命科学的发展和疾病早期诊断具有重要意义。传统荧光探针易受生物背景光干扰,且通常只能通
酶标仪中心定位
仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实要进行35个点的测量,选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。
基因定位概述
基因组是生物的生殖细胞中所含全部基因的总和。人类基因组具有极其复杂的结构,其编码蛋白质的结构基因大约有100 000个,每个单倍体DNA含有3.2×109 bp,分布在24条常染色体和X,Y性染色体上。此外,还含有大量的非编码的重复DNA序列。基因定位(gene location)是
血尿定位诊断
血尿的定位诊断除紧密结合临床病史、体征和X线、B超等辅助诊断手段外,尿液的实验室检查是一项非常重要的方法。 尿常规分析是血尿定位诊断的基础。血尿标本中若有明显的尿蛋白,医学教谕网整理尤其是肾小球性蛋白尿则提示尿中红细胞的起源可能来自于肾小球。肾小球性蛋白尿常以白蛋白及一些大分子的蛋白为主,而肾
定位候选克隆
当前,人类基因组研究的重心正在由“结构”向“功能”转移,一个以基因组功能研究为主要内容的所谓“后基因组时代”(post-genomics),也即功能基因组(functional genomics)时代,即将到来。如何获取基因的功能信息,即与人类重大疾病和重要生理功能相关的基因信息,就摆在了我们面前。
四轮定位仪进行定位的相关因素
四轮定位仪的作用是使汽车保持稳定的直线行驶和转向轻便,并减少汽车在行驶中轮胎和转向机件的磨损。由于各汽车生产厂家对四轮定位原设计的不同、制造的不同,使得各轮的各种倾角和束值就各有不同,并且有可调部分和不可调部分之分。那么,您知道四轮定位仪进行四轮定位的相关因素有哪些吗? 1、外倾角
亚细胞定位用荧光显微镜能看到吗
目前进行亚细胞定位研究,提取拟南芥(Arabidopsis thaliana)(Arabidopsis thaliana)叶肉原生质体进行PEG转化。研究目标采用GFP/YFP融合蛋白,但是在LSM710观察时,叶绿体有很明显的背景,尽管有些细胞是明显看到了GFP荧光,远远强于叶绿体背景,但是拍的照
大咖云集2022细胞产业大会-共论细胞产业前沿发展
2022年9月19-20日,2022细胞产业大会 2022第八届(上海)细胞与肿瘤精准医疗高峰论坛在上海举办。 本次峰会紧密围绕政策规范、监管、工艺与产业化进展、干细胞临床前研究与临床应用转化、干细胞存储与治疗、肿瘤免疫治疗、细胞与基因治疗、通用型CAR-T细胞治疗、单细胞多组学、单细胞测序、
ABB阀门定位器实现阀门的准确定位
bb阀门定位器主要用于调控控制阀,采集控制器输出的电流控制信号,通过气压信号调控阀门。调控阀产生动作后,阀杆会产生一定的位移,并将相关的信号传递到阀门定位器。定位器对输入控制信号和阀位反馈信号进行对比分析,如果两种信号不同,则促使阀门的驱动部件进行工作,直至两种信号相同为止。如果两种信号相同,则驱动