细胞共定位

实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra),限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI),金粉,无水乙醇,2.5MCaCl2 ,20ul 0.1M亚精胺实验设备 PCR扩增仪,PDS-1000/He型基因枪,激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss LSM 510 )实验材料 洋葱实验步骤 1. 载体的构建pA7- CFP- AtCOP1,pA7-AtCRY1-YFPpA7- CFP-OsCOPl,pA7-OsCRY1b-YFP中间载体pA7-CFP和pA7-YFP为本实验室构建。将AtCOPl(引物为AtCOP1XhoI5' 和AtCOP1 SpeI3')和AtCRYl(引物为AtCRY1XhoI5'和AtCCT1SpeI3')分别用高保真聚合酶(pfu ultra)进行PCR扩增,纯化PCR产物,用XhoI/SpeI双酶切......阅读全文

胰岛细胞瘤的定位诊断

  目前, 胰岛素瘤诊断的主要挑战是定位。80%以上的胰岛素瘤直径< 2 cm, 一般不引起胰腺轮廓的改变,常规的形态学定位方法如B 超、CT 和核磁共振(MRI) 均难以发现。胰岛素瘤定位诊断检查一般分为形态学定位和功能定位两大类。形态学定位主要有:  (1)腹部超声,总体诊断率不高,约35.1%

什么是细胞共培养?

  共培养,20世纪80年代后期,为了建立更类似于体内环境的培养体系,尽可能使体外环境与体内环境相吻合,从而使细胞间能相互沟通信息,相互支撑生长增殖,人们在细胞培养技术的基础上发展出了细胞共培养技术。细胞共培养技术是将2种或2种以上的细胞共同培养于同一环境中,由于其具有更好地反映体内环境的优点,所以

共68项!卫星导航定位科学技术奖评审结果公示

2023年度卫星导航定位科学技术奖评审结果公示  根据《国家科学技术奖励条例》和《卫星导航定位科学技术奖奖励条例》,经评审委员会评审,奖励委员会审定,2023年度卫星导航定位科技进步奖获奖项目35项,其中特等奖3项,一等奖12项,二等奖20项;2023年度卫星导航定位创新应用奖获奖项目33项,其中白

细胞内定位的相关介绍

   in vivo的蛋白质研究常常专注于蛋白质在细胞中的合成和定位。虽然已经知道许多细胞内蛋白质是在细胞质中合成,而膜结合蛋白质或分泌性蛋白质是在内质网中合成,但蛋白质定位到特定细胞器或细胞结构的特异性是如何达到的,目前还不清楚。一些有助于获得特定蛋白质在细胞中定位的方法得到了发展,特别是用基因工

关于胶质细胞瘤的定位诊断

  主要依靠病史和查体,如一侧肢体的局限性运动性癫痫发作,则说明病变在局限性抽搐对侧的皮层运动区;如以运动性失语(丧失语言的表达能力)为主,说明肿瘤在左侧半球额下回后部;如以感觉性失语(丧失理解语言的能力)为主,肿瘤可能在左侧半球的颞上回后部;如无癫痫发作,而是以进行性偏身瘫痪为主,则说明肿瘤在近内

Nature子刊:细胞定位与癌症

  曼彻斯特大学的科学家揭示了细胞定位的机制,因为在癌症早期细胞的组织形式会遭到破坏,所以细胞定位机制的发现将有助于人们对抗癌症。这项研究发表在Nature Cell Biology杂志上。   正确的细胞组织形式对于维持器官正常功能和机体健康至关重要,这包括细胞在组织中的位置和朝向,因为细胞

关于亚细胞定位的基本介绍

  亚细胞定位是查找生物大分子在细胞内的具体存在的位置,如在核内、胞质内或者细胞膜上存在。常见的亚细胞定位方法有生物信息学预测法、免疫荧光法、GFP融合蛋白表达法。  不同的细胞器往往具有不同的理化环境,它根据蛋白质的结构及表面理化特征,选择性容纳蛋白。  蛋白质表面直接暴露于细胞器环境中,它由序列

细胞自噬的蛋白定位介绍

  在研究自噬相关蛋白时,需对其进行定位。由于自噬体与溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体关系密切,为了区别,常用到一些示踪蛋白在荧光显微镜下来共定位:  Lamp-2:溶酶体膜蛋白,可用于监测自噬体与溶酶体融合。  LysoTrackerTM 探针:有红或蓝色可选,显示所有酸性液泡。  pDsRed2

细胞共培养实验介绍(二)

4. 实验流程简介 将40-60ul的受体细胞悬浮液种到slide中间小室,根据你的细胞类型密度控制在5-10×104cells/ml;2. 将40-60ul的饲养层细胞悬浮液种到slide的其他8个小室;3. 细胞贴壁后,移去各小室培养基,并洗脱掉未贴壁细胞,再加400-600ul培养基到大wel

细胞共培养实验介绍(一)

1.基本原理体外细胞共培养(co-culture)是将两种细胞(可以来自同一种组织,也可以来自不同的组织)混合共同培养,从而使其中一种细胞的形态和功能稳定表达,并维持较长时间。该技术能模拟体内生成的微环境,便于更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用以及探讨药物的作用机制和可能作用的靶点,

荧光团共定位的程度是通过每个像素位置的颜色值测定

样品中荧光团共定位的程度是通过比较一幅图上每个像素位置的颜色值测定的。分析的第一步就是要显示进行共定位测量的图,一般以两个独立通道的合成图显示。当分析多标样品时,在一次计算中,只能处理两种伪彩,但所有伪彩排列之后都可以配对用于共定位分析。由于传统上使用氩离子激光器、氪-氩离子激光器及氦氖激光器,这些

荧光团共定位的程度是通过每个像素位置的颜色值测定

样品中荧光团共定位的程度是通过比较一幅图上每个像素位置的颜色值测定的。分析的第一步就是要显示进行共定位测量的图,一般以两个独立通道的合成图显示。当分析多标样品时,在一次计算中,只能处理两种伪彩,但所有伪彩排列之后都可以配对用于共定位分析。由于传统上使用氩离子激光器、氪-氩离子激光器及氦氖激光器,这些

双色同步成像在荧光共定位等成像实验中的应用(二)

双色同步成像——一台Flash 4.0 LT相机作两台用 采用W-View GEMINI这样的双色分光附件将两种颜色的信号成像到一台相机的一个感光芯片上很好地解决了同步成像的时间问题,但对于绝大多数的相机,整个感光芯片只能设置一个曝光时间,当两个颜色的信号强度相差较大时将很难同时将两个颜色的成像信噪

双色同步成像在荧光共定位等成像实验中的应用(三)

扩展阅读:GCaMP钙离子成像中,视网膜上两个神经细胞表现出相反的钙离子浓度变化(A浓度高的时候B浓度低,B浓度变高时A浓度下降),如何采用Reslice方法在平面图中反映出这种关系,敬请参阅链接中文章第14-16步:点击进入了解>>                      W-View GEMI

双色同步成像在荧光共定位等成像实验中的应用(一)

荧光的共定位是当今生物显微成像中一个极为常见的技术,两个或者更多种不同颜色的荧光探针被用来标记不同的结构/位点,使得其相互关系得以明晰地在合并的图像上展现。随着研究者对于实验的要求越来越高,这些荧光共定位的成像逐渐被希望能用于荧光强度高速变化或者样品本身位置不断变化的实验中,比如活动的斑马鱼、线虫体

免疫荧光共标记怎么计算共标记的细胞个数

共定位的定义:共定位是对样品内两种荧光标记的信号共同分布的位置进行分析。 共定位就如字面意思上所说的,只能够表明蛋白A和B都在此细胞有表达,并且在同样的细胞内位置/细胞器。相关短语:共定位通道 PDM Channel 细胞共定位 Cellular co localization 细胞内共定位信息 c

成体干细胞的非定位性介绍

虽然胚胎干细胞能分化成各种细胞类型,但这种分化是“非定位性”的。当前尚不能控制胚胎干细胞在特定的部位分化成相应的细胞,当前的做法容易导致畸胎瘤。在应用胚胎干细胞治疗前,必须先进行初步的细胞诱导分化,以防止畸胎瘤的发生。应用胚胎干细胞时,也必须确认胚胎干细胞供者没有诸如(肌)营养失调症之类的遗传性疾病

关于细胞色素C的定位检测介绍

  细胞色素C作为一种信号物质,在细胞凋亡中发挥着重要的作用。正常情况下,它存在于线粒体内膜和外膜之间的腔中,凋亡信号刺激使其从线粒体释放至细胞液,结合Apaf-1 (apoptoticprotease activating factor-1)后启动caspase级联反应:细胞色素C/Apaf-1复

如何做蛋白亚细胞定位实验?

生物功能的区域化是生命的一种基本现象,这种区域化是通过不同层次的系统组成,从器官到特异细胞,再到细胞内部的亚细胞结构,最后到大分子复合物。在细胞水平,蛋白在特定的时间和空间发挥作用,这种区域化的定位为蛋白发挥作用提供特定的化学环境以及所需的互作因子等。蛋白的错误定位容易导致细胞活动的紊乱。因此,了解

小胶质细胞竟是通过ApoE定位Aβ斑块

  近日,由中国科学院院士、香港科技大学叶玉如领衔的研究团队,在著名期刊《自然·衰老》上发表一项重要研究成果,详细阐述了小胶质细胞定位Aβ斑块的全过程[1]。  她们发现,在白介素33(IL-33)的刺激下,小胶质细胞会表达趋化蛋白VCAM1,促进小胶质细胞往含有ApoE的Aβ斑块聚集;通过VCAM

核糖体的细胞内定位

核糖体的功能就是将mRNA上的遗传密码(核苷酸顺序)翻译成多肽链上的氨基酸顺序。因此,它是肽链的装配机,即细胞内蛋白质合成的场所,细胞合成的蛋白质可分为两类:外输性蛋白和内源性蛋白。1.外输性蛋白:主要在固着核糖体上合成,分泌到细胞外发挥作用,如抗体蛋白、蛋白类激素、酶原、唾液等,也能合成部分自身结

细胞共培养的培养方法介绍

  细胞共培养就是两种不同的细胞共同培养。  细胞共培养技术最多应用于骨细胞和神经细胞。细胞共培养体系主要通过两种方法建立:  ① 直接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中,不同种类的细胞之间直接接触;  ② 间接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上,然

细胞共培养技术具体指什么?

细胞共培养是指将2种或2种以上细胞(可以来自同一组织, 也可以来自不同的组织)放在同一培养系统中培养。细胞共培养技术可以很大程度地模拟体内环境,以便更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用,通过检测不同细胞因子之间的关系,探讨药物的作用机制和可能的作用靶点。细胞共培养方法主要包括直接接触共

细胞共培养是什么意思

20世纪80年代后期,为了建立更类似于体内环境的培养体系,尽可能使体外环境与体内环境相吻合,从而使细胞间能相互沟通信息,相互支撑生长增殖,人们在细胞培养技术的基础上发展出了细胞共培养技术。细胞共培养技术是将2种或2种以上的细胞共同培养于同一环境中,由于其具有更好地反映体内环境的优点,所以这种方法被广

简述脂肪干细胞和脂肪细胞的共培养

  将准备好的脂肪干细胞和脂肪细胞分别置于Transwell 的上室和下层中,脂肪干细胞与脂肪细胞的个数之比分别为1:5,1:1,2:1 和5:1(4 组分别命名为A、B、C 和D 组)进行共培养,其中每孔中脂肪细胞的数量均为1×105 个。以上每组均做平行实验(n=3)。

用体细胞交换法进行基因定位

体细胞交换法基因定位三点测验和着丝粒距离法中所测定的都是发生在减数分裂中的染色体交换。1936年美国遗传学家C.斯特恩在果蝇中发现体细胞在有丝分裂过程中也可以发生染色体交换(见连锁和交换)。50年代中G.蓬泰科尔沃等在研究构窠曲霉时发展起来一种利用体细胞交换的系统的基因定位方法。在进行有丝分裂的杂合

绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位

一、原理利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。激光扫描共

亚细胞定位的GFP融合蛋白表达法

  GFP是绿色荧光蛋白,在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光,从而可以精确地定位蛋白质的位置。绿色萤光蛋白(GFP)是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。通过基因工程技术,绿色萤光蛋白(GFP)基因能转进不同物种的基因组,在后代中持续表达,并且能根

新型荧光染料或能帮助定位脑肿瘤细胞

  美国威斯康辛大学临床和公共健康学院(University of Wisconsin School of Medicine and Public Health)的几名神经外科医生自主研发并实验了两种新型荧光染料。这两种染料能特异性附着在肿瘤细胞上,帮助神经外科医生更准确定位并完全切除脑瘤。这篇研究

新型荧光染料或能帮助定位脑肿瘤细胞

  美国威斯康辛大学临床和公共健康学院(University of Wisconsin School of Medicine and Public Health)的几名神经外科医生自主研发并实验了两种新型荧光染料。这两种染料能特异性附着在肿瘤细胞上,帮助神经外科医生更准确定位并完全切除脑瘤。这篇研究