新型光可控化学荧光探针实现细胞精准定位
华东理工大学和中科院上海药物所的一项最新合作研究为细胞的靶向、精准功能标记研究提供了新的光可控化学探针工具。相关研究成果日前在线发表于《自然-通讯》。 可靶向、精准探测不同细胞生命和疾病过程的荧光探针技术，对生命科学的发展和疾病早期诊断具有重要意义。传统荧光探针易受生物背景光干扰，且通常只能通过被动扩散进入细胞产生待测物识别信号，造成了探测的低精确性。 为解决这一关键问题，双方研究人员通过将螺吡喃光致变色分子、1,8–萘酰亚胺荧光团与具备膜受体主动靶向功能的半乳糖分子共价连接，创制了可通过远程光控实现细胞精准定位及靶标识别的光致变色荧光探针。研究发现，通过紫外/可见光的循环照射可实现对探针螺吡喃/部花青结构的可逆调控，进而实现探针萘酰亚胺荧光发射的循环“开/关”控制。此外，探针的螺吡喃态与细胞内广泛存在的硫化物不发生相互作用，而当远程光激活其部花青态时，探针可迅速与亚硫酸根阴离子发生化学反应，从而阻断探针的光致变色活性，......阅读全文
共聚焦荧光探针标记方法
（一）BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液，等份分装后，－20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。加入BCECF-AM（终浓度1～5μmol/L），37℃孵育30～60min。PBS（含Ca2+、M
标记抗体、配体等常用的荧光探针
标记抗体、配体等常用的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜不仅可用免疫荧光分析固定的细胞或组织切片，还可用于分析活细胞，得到特异性抗体或其他荧光免疫探针识别靶分子的表达、定位、分布变化等信息。标记抗体、配体或蛋白质等较通用的有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate，FITC
细胞骨架的荧光探针标记方法
细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT)，微丝(microfilament, MF)，中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成，其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组
细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法
实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡，同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）对细胞进行双重染色，可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱（HT）是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病，
荧光探针标记基团fam和hex的区别
TAMRA和BHQ和引物关系不大，这个是淬灭基团。TAMRA主要淬灭FAM，HEX，VIC的荧光BHQ有3种BHQ1、BHQ2和BHQ3，其中BHQ1和TAMRA的淬灭波长相近引物设计和淬灭基团关系不大
钙离子荧光探针：比值型荧光探针
前面我们介绍了荧光指示剂法可以将Ca2+检测的实验与其他技术结合使用，如可以与流式细胞仪、荧光分光光度计、或者荧光显微镜进行联合检测 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等，数量较少，可见光型数目较多，包括Fluo-3、钙黄绿素、Rhod-2等。荧光指示剂根据测光原理和数据
研究构建高亮度、多靶点荧光探针
近日，中国科学院大连化学物理研究所研究员徐兆超、副研究员乔庆龙团队提出基于氮杂环丁烷甲酰胺的荧光配体偶联策略，在同一分子框架内一体化实现了荧光探针亮度提升以及与靶向配体多样性偶联，为活细胞超分辨荧光成像提供了兼具高亮度、多靶点适配性的新一代分子工具。相关成果发表于《德国应用化学》。 荧光配体偶
PCR荧光标记选择探针法还是染料法？
特异性荧光标记——探针法： 是目前临床最常用的方法，在加入一对引物的同时再加入一对探针，特异性好，这里列举的是TaqMan水解探针：一段与靶基因特异性结合的序列，分别在5’端加入荧光报告基团，3’端加入荧光淬灭基团。其核心是利用taq酶的5’-3’外切酶活性切断探针，使得使荧光报告基团和荧
自动荧光显微系统：高效光控蛋白
光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一，通过结合遗传学和光学方法，科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性，以及蛋白相互作用。 在进行光遗传学实验的时候，研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式（photobleaching mode）。虽然目前特殊激光或其它通过
自动荧光显微系统：高效光控蛋白
光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一，通过结合遗传学和光学方法，科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性，以及蛋白相互作用。 在进行光遗传学实验的时候，研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式（photobleaching mode）。虽然目前特殊激光或其它通过光学
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用
众所周知，氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品，以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害，我们把这种损害称为氧化应激，人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子，ROS是需氧细胞在代谢过程中产生
荧光探针有毒吗
有毒的。在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其荧光性质可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。
MemGlow™质膜染色荧光探针在膜标记领域的应用（二）
MemGlow™应用程序很简单,当将MemGlow™探针引入水性介质中时，两亲性探针会形成自发淬灭性的聚集体，直到与质膜的接触引发其解离并分散到脂质双层中。整合后，荧光探针即可进行生物成像。从MemGlow™488到MemGlow™700，MemGlow™探针产生的信噪比分别为20
MemGlow™质膜染色荧光探针在膜标记领域的应用（一）
使用荧光探针的质膜染色技术 真核细胞质膜（PM）是脂质双层，组织成一个连续的屏障，将细胞环境与细胞外空间分隔开, 由质膜提供的物理屏障还用作蛋白质的生物支架，这些蛋白质介导信号转导或引发细胞响应（例如Ras 1），以响应细胞表面发生的细胞外事件。除了这些功能，PM
细胞膜流动性测定实验_荧光探针标记法
实验方法原理常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后，介质粘度增加，顺反异构受到抑制，成为唯一能发光的全反构型。实验材料肿瘤细胞试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液DPH仪器、耗材荧光分光光度计离心机实验步骤1. 取对数生长期的肿瘤细胞，以pH
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用介绍
众所周知，氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品，以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害，我们把这种损害称为氧化应激，人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子，ROS是需氧细胞在代谢过程中
关于活性氧分子荧光探针标记法的应用介绍
众所周知，氧气是生命运动过程中不可缺少的一种气体,而细胞使用氧气时会产生副产品，以高能氧气分子形式存在的废弃物质即为自由基。自由基会对人体组织和细胞结构造成损害，我们把这种损害称为氧化应激，人体在利用氧气过程中会加重自身的压力。活性氧(ROS)是含有氧的化学活性分子，ROS是需氧细胞在代谢过程中
荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别
荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别 荧光原位杂交技术问世于70年代后期，其曾多用于染色体异常的研究，近年来随着FISH所应用的探针钟类的不断增多，特别是全Cosmid探针及染色体原位抑制杂交技术的出现，使FISH技术不仅在细胞遗传学方面，而且还广泛应用于肿瘤学研究，如基因诊断基因定位等 。原
新型光可控化学荧光探针－实现细胞精准定位
华东理工大学和中科院上海药物所的一项最新合作研究为细胞的靶向、精准功能标记研究提供了新的光可控化学探针工具。相关研究成果日前在线发表于《自然-通讯》。 可靶向、精准探测不同细胞生命和疾病过程的荧光探针技术，对生命科学的发展和疾病早期诊断具有重要意义。传统荧光探针易受生物背景光干扰，且通常只能通
蛋白质的内源荧光与荧光探针
利用荧光光谱法研究蛋白质一般有两种方法。一是测定蛋白质分子的自身荧光(内源荧光)，另一种是当蛋白质本身不能发射荧光时，通过非共价吸附或共价作用向蛋白质分子的特殊部位引入外源荧光(也称荧光探针)，然后测定外源荧光物质的荧光。 蛋白质的内源荧光 含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan ,Trp
病毒免疫荧光实验_荧光素标记抗体
实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光标记抗体方法有直接标记法和间接标记法两种。(1) 直接法：较为常用，具体步骤是：1) 抗体溶液的制备：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 将待标记抗体稀释至 20mg/ml;2) 荧光素：根据待标记抗体的总量，按 0.01mg 荧光素/mg 蛋白
荧光探针的功能介绍
在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其 荧光性质（激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等）可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。
荧光探针的分类检测
常用的荧光探针有荧光素类探针、无机离子荧光探针、荧光量子点、分子信标等。荧光探针除应用于核酸和蛋白质的定量分析外，在核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术以及DNA测序上都有着广泛的应用。 检测荧光探针的方法主要有单点测定和电荷耦合装置（CCD）荧光成像（包括用于微区分析的激光共聚
荧光探针的相关介绍
在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其荧光性质（激发和发射波长、强度、寿命、偏振等）可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。 与核酸(DNA或RNA)、蛋白质或其他大分子结构非共价相互作用而使一种或几种荧光性质发生改变的小分子物质。可用于研究大分子物质的性
溶酶体荧光探针原理介绍
溶酶体荧光探针溶酶体为单层膜蛋白包围的内含一系列酸性水解酶的小体。溶酶体中含有多种酶，如糖苷酶、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶等等，是物质代谢的场所。弱碱性胺选择性聚集在胞内低pH值的小室中，可用于研究溶酶体的生物合成和发病机理。其中最常用的就是DAMP，它不发荧光，需要和抗DNP的抗体共同使用
摇核酸的荧光探针
DNA和RNA?摇核酸的荧光探针 用于共聚焦激光扫描显微镜的主要有Acridine Orange(吖啶橙，AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶，PI)。两种染料既可标记DNA又可标记RNA，如为获得单独的DNA或RNA分布，染色前可用RNA酶或DNA酶处理细胞。PI不能进入完整的细胞膜
荧光探针技术的概念
受到激发光激发后，从激发态单重态回到基态，在紫外-可见-近红外区有特征发光，称之为荧光。荧光性质（激发和发射波长、强度、寿命、偏振等）可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子，被称为荧光探针。荧光探针分类很多，可以根据材料属性分为有机和无机探针，可以根据探针尺寸分为
LSCM的荧光标记
传统应用于荧光标记的染料如异硫氰酸荧光素(fluorescin isothiocyanate，FITC，ex 490 nm/em520 nm)、四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC，ex 550 nm/em 620 nm)、罗丹明(Rhodamine，ex 560 nm/em 540 ~ 660 nm)
荧光素标记抗体技术
(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合，标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力
LSCM多重荧光标记
由于大部分实验都需同时观测两个或多个细胞内的组分，需要对细胞进行多重荧光标记。这时，研究者需要综合考虑实验目的、所使用的激光共聚焦显微镜配置和已有的实验材料。通常，激光共聚焦显微镜配备 4 个激光器(405nm 半导体固体激光器、氩离子激光器、543nm 氦/氖激光器或 561nm半导体固体激光器和