新发现!先天性免疫应答的核心成分是两个短RNA激活的
德国慕尼黑大学的一组研究人员发现,先天性免疫应答的一种核心成分是通过两个短RNA激活的,这两个短RNA是由一种前体RNA分子通过位点特异性裂解而产生的,而且这两种衍生物都是由相同的酶催化得到的。 这一研究发现公布在11月27日Cell杂志上,由免疫学家Veit Hornung教授与LMU化学家Thomas Carell教授合作完成。 先天免疫系统被视为人体对抗入侵性病原体的最前沿战线。细胞有专门的受体,可以区分源自外源细胞的RNA(例如病原细菌和病毒)和“天然”自身的RNA。识别前者然后激活适当的免疫反应能消除入侵者。但是,这种检测模式的基础分子机制至今仍然不清楚。 Hornung教授与Carell教授领导的研究组发现,一种名为TLR8的受体的激活是由外源RNA降解产生的两个特定RNA片段的结合介导发生的,并且两种分解产物均由称为RNase T2的单一酶产生。 Hornung教授解释说:“早期的研究表明,外源RNA分......阅读全文
细胞化学词汇转运RNA
中文名称:转运RNA外文名称:transfer ribonucleic acid,tRNA功 能:携带并转运氨基酸。转运RNA(Transfer RNA),又称传送核糖核酸、转移核糖核酸,通常简称为tRNA,是一种由76-90个核苷酸所组成的RNA,其3'端可以在氨酰-tRNA合
细胞化学基础转移RNA
转移RNA(tRNA)在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%,绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在,Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。1.tRNA一级结构具有以下特点:①是一类单链小分子RNA,长
组织/细胞RNA快速提取
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)提示: 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇! 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。1. 组织培养细胞a. 收
细胞化学词汇RNA包装
中文名称:RNA包装英文名称:RNA packaging定 义:特指病毒RNA通过其顺式作用元件被病毒核衣壳蛋白识别和包裹的过程。广义指核糖核蛋白颗粒的形成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞RNA的提取方法
(一)细胞总RNA的提取1、6孔板细胞汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5 min。2、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中,加新开的氯仿0.2 ml,轻摇15 s。3、室温静置
细胞化学基础信使RNA
信使RNA(mRNA)最早发现于1960年,在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成,具有以下特点。 1.含量低,占细胞总RNA的1%~5%。 2.种类多,可达105种。不同基因表达不同的mRNA。 3.寿命短,不同mRNA指导合成不同的蛋白质,完成使命后即被降解。细菌mRNA的平均半
细胞化学词汇间隔RNA
中文名称:间隔RNA英文名称:spacer RNA定 义:初级转录物中由基因间序列编码产生的RNA序列。如哺乳动物核糖体核糖核酸(rRNA)的初级转录物位于18S rRNA和28S rRNA间的一段序列,这些序列不出现在成熟的rRNA中。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级
细胞化学词汇反义RNA
中文名称:反义RNA外文名称:antisense RNA概 念:与mRNA互补的RNA分子作 用:抑制mRNA的翻译分 类:三类反义RNA是指与mRNA互补后,能抑制与疾病发生直接相关基因的表达的RNA。它封闭基因表达,具有特异性强、操作简单的特点,可用来治疗由基因突变或过度表达导
细胞化学词汇RNA假结
中文名称:RNA假结外文名称:RNA pseudoknot定 义:RNA中的一种常见的三级结构元件。RNA的茎环结构中的环上序列与其他部位(通常是邻近部位)的序列碱基配对,形成类似“打结”形状。
细胞化学词汇核仁RNA
中文名称:核仁RNA英文名称:nucleolar RNA定 义:核仁中的RNA。包括核糖体核糖核酸(rRNA)前体、核仁小RNA等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇卫星RNA
中文名称:卫星RNA外文名称:satellite RNA别 名:卫星核酸类 别:植物病毒RNA常见种类:黄瓜花叶病毒定 义:卫星RNA是一类小的非编码RNA,基因组大小为200-1500nt,通常不编码蛋白,是一类存在于某专一病毒粒即辅助病毒的衣壳内并完全依赖于辅
微生物所长链非编码RNA与免疫细胞癌变研究获进展
Abelson鼠白血病病毒(A-MuLV)是一种可以诱导小鼠淋巴细胞癌变的逆转录病毒,v-Abl是A-MuLV的癌基因。Bcr-Abl癌基因是由位于人类9号染色体的c-Abl基因和22号染色体的Bcr基因断裂易位融合而成,编码的Bcr-Abl融合蛋白可以诱发人的慢性粒细胞白血病(CML)和急性淋
真核细胞总RNA的制备(Total-RNA-Isolation)2
Total RNA Isolation Guanidine-based isolation Objective: To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials Denaturing Solution
真核细胞总RNA的制备(Total-RNA-Isolation)1
从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚(dT)纤维素选择分离 mRNA,cDNA合成及体外翻译等实验的成败,在很大程度上决定于RNA的质量。RNA分离的最关键因素是尽量减少RNA酶的污染。快速一步法提取总RNA组织及有核细胞在匀浆过程中
RIP技术(RNA结合蛋白免疫沉淀)
RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,能帮助我们发现miRNA的调节靶点。RIP这种新兴的技术运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合
RNA的免疫共沉淀分离及检测
RNA的免疫共沉淀分离及检测非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子,绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于细胞中;不仅如此,RNA与RNA结合蛋白之间的动态关联贯穿和伴随了RNA的转录合成、
RNA的免疫共沉淀分离及检测
RNA的免疫共沉淀分离及检测非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子,绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于细胞中;不仅如此,RNA与RNA结合蛋白之间的动态关联贯穿和伴随了RNA的转录合成、
RNA的免疫共沉淀分离及检测
RNA的免疫共沉淀分离及检测 非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子,绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于细胞中;不仅如此,RNA与RNA结合蛋白之间的动态关联贯穿和伴随了RNA的转录合
免疫细胞
在免疫细胞中,执行固有免疫功能的细胞:吞噬细胞、NK细胞等。执行适应性免疫功能:T、B淋巴细胞,还有APC细胞参与。一、淋巴细胞淋巴细胞分为B细胞和T细胞,分别来源于骨髓和胸腺B淋巴细胞 表面的BCR(mIg)及分泌的抗体均为免疫球蛋白。由B细胞介导的免疫称为体液免疫T淋巴细胞 ,TCR为双链分子。
纯化RNA实验——从培养的细胞中纯化总RNA
实验材料细胞试剂、试剂盒RNA 提取缓冲液变性液水饱和酚仪器、耗材培养皿Falcon 2063 管实验步骤1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿,吸出培养液,加 2 ml RNA 提取缓冲液,用橡胶刮棒刮下细胞。RNA 提取缓冲液:变性液,20 mlβ-巯基乙醇,0.144 ml2 mo
总细胞RNA的提取方法
实验概要总细胞RNA的提取在建库过程中,由于cDNA合成这一步将使用通用引物oligo dT,因此在总RNA提取这一步中,提取纯化mRNA不是非常必要的。提取高纯度的总细胞RNA足可以被用作cDNA合成的模板,目前提取RNA的方法很多,也有不少商业化的试剂盒。实验步骤1. TRIZOL法 1)
细胞质RNA提取实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 PBS细胞裂解液SDS蛋白酶K酚氯仿异戊醇无水乙醇仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 1. 对于单层培奍细胞(1)每10 cm 培养皿培养的细胞,用冰冷PBS洗涤3次。(2)每次1 ml 然后用小体积PBS刮下细胞,转移至冰浴的离心管中。(3)300 g 离心5 min
细胞化学词汇单链RNA
中文名称:单链RNA英文名称:single-stranded RNA;ssRNA定 义:只含有一条链的RNA分子。生物体中绝大部分RNA是单链RNA,形成二级结构时,是既有单链、又有双链结构域的RNA分子;只有某些RNA病毒是由两条链互补而成的双链RNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科)
细胞化学词汇转移信使RNA
中文名称:信使RNA外文名称:Messenger RNA 定 义:信使RNA,中文译名“信使核糖核酸”,是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。以细胞中基因为模板,依据碱基互补配对原则转录生成mRNA后,mRNA就含有与DNA分子中某些功能片
细胞化学词汇转移信使RNA
中文名称:转移-信使RNA英文名称:ransfer-messenger RNA;tmRNA定 义:一类兼有接受(携带)氨基酸和编码氨基酸的双功能RNA分子。其主要功能是在特定情况下可提前终止蛋白质的生物合成,以免产生不良产物。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇双义RNA
中文名称:双义RNA定 义:部分基因的表达需要先进行转录合成出亚基因组RNA,作为mRNA翻译出蛋白质
细胞质RNA提取实验
由于RNA的种类来源很多,因而提取制备方法各异,一般有苯酚法,去污剂法和盐酸胍法,其中苯酚法实验室最常用。组织匀浆后用苯酚处理离心,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,向水相加冷乙醇后, RNA即以白色絮状沉淀析出。此法较好除去DNA和蛋白质,且获得生物活性的RNA。实验材料RNA试剂、试剂盒PBS细
细胞化学词汇反式作用RNA
中文名称:反式作用RNA英文名称:trans-acting RNA定 义:通过分子间反应机制起作用的RNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞质RNA提取实验
基本方案 实验材料 RNA 试剂、试剂盒
细胞化学词汇核小RNA
中文名称:核小RNA外文名称:small nuclearRNA定 义:核小RNA是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体(spliceosome)的主要成分,参与mRNA前体的加工过程。