液相色谱仪的梯度洗脱
液相色谱仪的梯度洗脱可以改进复杂样品的分离,改善峰形,减少脱尾并缩短分析时间,而且还能降低小检测量和提高分离精度。梯度洗脱对复杂混合物,特别是保留值相差较大的混合物的分离是极为重要的手段,因为这些样品的 k ′范围宽,不能用等度洗脱简单地处置。有些样品用等度洗脱可能分离的也很好,但色谱柱中可能会滞留有少量强保留组分,使色谱柱逐步失活,而且还可能干扰下一个样品的分析。这种情况也可以采用梯度洗脱来解决。虽然梯度洗脱比等度洗脱复杂,实用方法的建立比较困难,而且梯度洗脱时基线常常飘移不定,但是随着近一个时期设备、材料的进展以及对这种技术更好地理解,上述问题基本上已被克服,因此,梯度洗脱仍然是液相色谱实验室常用的重要技术之一。 ......阅读全文
梯度洗脱层析的基本概念
中文名称梯度洗脱层析英文名称gradient elution chromatography定 义使洗脱液形成由低到高或由高到低的极性、浓度或pH梯度等,将层析柱上不同的组分洗脱出来的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
梯度洗脱层析的概念和原理
中文名称梯度洗脱层析英文名称gradient elution chromatography定 义使洗脱液形成由低到高或由高到低的极性、浓度或pH梯度等,将层析柱上不同的组分洗脱出来的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
梯度洗脱方式的特点及优劣
1)线性梯度在某一段时间内连续而均匀地增加流动相强度。2)阶梯梯度流动相强度从低强度直接改变为较高强度。3)高压梯度利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按一定比例送入梯度混合室,混合后进入色谱柱。两种溶液在高压下混合。a.优点:通过梯度程序控制器控制每台泵的输出,能获得任意形式的梯度曲线,而且精
不同梯度洗脱系统的特征比较
不同梯度洗脱系统的特征比较特性二元高压梯度二元低压梯度多元低压梯度可能洗脱范围较广较广广梯度的重现性较好好较好成本较高低低改变流动项较容易容易较容易机械性能较简单,较可靠简单,可靠较简单,较可靠自动化难以程度容易容易较容易对溶解气体的敏感性较敏感敏感敏感梯度准确性较准确准确较准确不同溶剂混合能力较强
液相色谱法术语概念梯度洗脱
梯度洗脱(gradient elution)间断地或连续地改变流动相的组成或其他操作条件,从而改变其色谱洗脱能力的过程。
梯度洗脱的技术要点和装置要求
①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高
液相色谱梯度洗脱中柱温的影响
许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨论液
HPLC什么情况下使用梯度洗脱
梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗提。在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩分析间周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分
液相色谱仪的洗脱方式
液相色谱仪的洗脱方式有等度洗脱和梯度洗脱。一、等度洗脱:在一个分析周期内流动相组成保持恒定。适合组分数目较少和性质差别不大的样品。二、梯度洗脱(程序洗脱):在一个分析周期内按一定程序连续变化流动相的浓度配比、极性、PH值和离子强度,可使复杂样品中性质差异很大的组分能在各自适宜的分离条件下分离。梯度洗
液相色谱梯度洗脱中柱温有什么影响
许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨论液
液相色谱梯度洗脱中柱温有什么影响
许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨论液
高效液相色谱法仪器的梯度洗脱介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常
在进行梯度洗脱时有哪些问题需要注意?
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此带来一些特殊问题,必须充分重视。①要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶,超出范围后就不混溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其是使用磷酸盐时需特别小心。②梯度
简介液相色谱梯度洗脱中柱温的影响
许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨
高效液相色谱法的梯度洗脱的介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常
分级梯度洗脱的概念和离子交换剂介绍
分级梯度洗脱是依据各种离子或离子化合物与离子交换剂的结合力不同而进行分离纯化的。离子交换层析的固定相是离子交换剂,它是由一类不溶于水的惰性高分子聚合物基质通过一定的化学反应共价结合上某种电荷基团形成的。离子交换剂可以分为三部分:高分子聚合物基质、电荷基团和平衡离子。电荷基团与高分子聚合物共价结合,形
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙腈含量超过70
关于高效液相色谱设备的梯度洗脱的介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙
在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用
梯度洗脱装置分两种:高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。梯度洗脱时应注意:1、注意各
液相色谱法术语概念线性溶剂强度梯度洗脱
线性溶剂强度梯度洗脱(linear solvent strength gradient elution)流动相中溶剂强度参数较强或较弱的组分的体积百分数随时间或洗脱体积呈线性变化。
液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应
色谱, 2021, 39(1): 10-14 DOI: 10.3724/SP.J.1123.2020.07042 微型述评 液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应 郝卫强*, 刘丽娟, 沈巧银郝卫强《色谱》青年编委 个人简介 博士,研究员,1976年出生。 1994年就读于中国药科大学药
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙
液相色谱仪梯度系统介绍
液相色谱是目前应用zui多的色谱分析方法,液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。 液相色谱仪梯度系统广泛应用于中药饮片厂原料分析,化工原料分析,饲料企业、农药企业,大型生产企业中的生产过程控
内梯度液相色谱仪种类
内梯度液相色谱仪种类有多种。1、按功能可分:分析型内梯度液相色谱仪和制备型内梯度液相色谱仪。2、按固定相和流动相的极性大小可分:正相内梯度液相色谱仪和反相内梯度液相色谱仪。3、按作用可分:内梯度定量分析液相色谱仪和内梯度定性分析液相色谱仪。4、按分离目的可分:化验室内梯度液相色谱仪和工业内梯度液相色
外梯度液相色谱仪类型
外梯度液相色谱仪类型有多种。1、按功能可分:分析型外梯度液相色谱仪和制备型外梯度液相色谱仪。2、按分离目的可分:实验室外梯度液相色谱仪和工业外梯度液相色谱仪。3、按灵敏度可分:微量外梯度液相色谱仪和痕量外梯度液相色谱仪。4、按进样自动性可分:自动进样外梯度液相色谱仪和手动进样外梯度液相色谱仪。5、按
梯度液相色谱仪的特点
泵间联用,采用RS232通讯,即可实现梯度分析,便于用户自由选择与搭配。高压混合器类型齐全、分析型、高流速型、低流速型等系列,涵盖了用户的常规需求。混合器材主要有不锈钢、生物惰性PEEK构成,用途广泛。可提供搅拌式高压混合器系列,适应用户特殊需求。高压混合器设计为单独部件,便于用户选择。更换快捷,操
HPLC法中,等度与梯度洗脱有什么区别
1、洗脱的改变与不改变的配比不同等度洗脱:流动相的组成比例和流速恒定不变。梯度洗脱:改变流动相的浓度配比。2、它们的定义不同等度洗脱定义:液相色谱操作中,等度洗脱即在样品组分的分析周期中,流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。与梯度洗脱对应。梯度洗脱定义:梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一
HPLC法中,等度与梯度洗脱有什么区别
1、洗脱的改变与不改变的配比不同等度洗脱:流动相的组成比例和流速恒定不变。梯度洗脱:改变流动相的浓度配比。2、它们的定义不同等度洗脱定义:液相色谱操作中,等度洗脱即在样品组分的分析周期中,流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。与梯度洗脱对应。梯度洗脱定义:梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一
梯度洗脱时,高效液相基线下降,怎么回事
使用高效液相色谱仪时,监视器的基线不平的原因包括:1、未平衡,2、梯度 ,3、柱内滞留杂质出峰解决办法:A、峰拖尾 原因 解决方法 1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱 3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4