高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙腈含量超过70%时就会出现不溶,甲醇和已烷混合,甲醇含量高于30%时就会分层等。当有机溶剂和缓冲溶液混合时还可能析出盐的结晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。 2、梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辩认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头上后会被强的溶剂洗脱出来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气,以防止溶剂混合时产生气泡。 3、混合溶剂的粘度常随组成而变化,因此在梯度洗脱时常会出现压力变化,例如纯水或甲醇的粘度都比较小,但是当二者以相近的比例混合时粘度会增大很......阅读全文
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙腈含量超过70
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题
在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此必然带来一些特殊的问题,我们必须充分地重视。 1、要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶,超出一定的范围后就不会互溶。例如:乙腈和1mol/L的醋酸铵(pH5.16)做梯度洗脱,乙
关于高效液相色谱设备的梯度洗脱的介绍
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种: a.低压梯度(也叫外梯度):在常
在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用
梯度洗脱装置分两种:高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。梯度洗脱时应注意:1、注意各
梯度洗脱时,高效液相基线下降,怎么回事
使用高效液相色谱仪时,监视器的基线不平的原因包括:1、未平衡,2、梯度 ,3、柱内滞留杂质出峰解决办法:A、峰拖尾 原因 解决方法 1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱 3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4
梯度洗脱时,高效液相基线下降,怎么回事
使用高效液相色谱仪时,监视器的基线不平的原因包括:1、未平衡,2、梯度 ,3、柱内滞留杂质出峰解决办法:A、峰拖尾 原因 解决方法 1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱 3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4
梯度洗脱时,高效液相基线下降,怎么回事
使用高效液相色谱仪时,监视器的基线不平的原因包括:1、未平衡,2、梯度 ,3、柱内滞留杂质出峰解决办法:A、峰拖尾 原因 解决方法 1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱 3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4
梯度洗脱时,高效液相基线下降,怎么回事
使用高效液相色谱仪时,监视器的基线不平的原因包括:1、未平衡,2、梯度 ,3、柱内滞留杂质出峰解决办法:A、峰拖尾 原因 解决方法 1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱 3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4
液相色谱梯度洗脱时流动相的浓度比怎么去定
关于流动动相梯度选择的问题,个人习惯不同,方法 也不尽一样。据我愚见,一般应该选择乙腈:水=90:10进行首选。30-60分钟的首次运行时间,观察最晚出峰时间。以此为据进行流动相及梯度的选择。如果物质出峰时间者在10分钟以前出来,才有必要进行梯度变换。梯度变换原则是达到所有物质的基线分离,同时兼顾总
高效液相色谱的梯度洗脱实验具体操作如何
高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备
液相色谱梯度洗脱中柱温的影响
许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨论液
在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用是什么
在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析 周期中,按一定程序不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目
高效液相色谱中洗脱溶剂
组别溶剂名称Ⅰ脂肪族醚、三级烷胺、四甲基胍、六甲基磷酰胺Ⅱ脂肪醇Ⅲ吡啶衍生物、四氢呋喃、酰胺(除甲酰胺外)、乙二醇醚、亚砜Ⅳ乙二醇、苯甲醇、甲酰胺、乙酸Ⅴ二氯甲烷、二氯乙烷Ⅵa磷酸三甲苯酯、脂肪族酮和酯、聚醚、二氧六环Ⅵb腈、砜、碳酸丙烯酯Ⅶ硝基化合物、芳香醚、芳烃、卤代芳烃Ⅷ氟烷醇、间甲苯酚、氯仿
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
一个就是在流动相配制的过程中,保证磷酸盐完全溶解,然后减压抽滤。因为一般实验室使用的磷酸盐只是化学纯的,所以一定要过滤。避免污染色谱柱。另外一个就是在实验前后记得冲洗系统和冲洗色谱柱。无机盐对于色谱柱和系统都有损伤,所以使用之后要清洗干净。又因为无机盐在水溶液中容易溶解,但是在有机相中溶解度非常低。
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时一般注意以下几点:1. 注意冲洗系统2. 注意冲洗色谱柱;3. 注意冲洗进样口;4. 注意清洗泵头所有的目的都是为了不让无极盐析出。因为磷酸盐的水溶性好,但磷酸盐在有机物中的溶解度不好。对于甲醇,乙腈很容易沉淀。然后液体管道会被堵塞。例如,你的流动相为0.05mol/
选择液相色谱柱时应该注意什么
色谱柱在使用中很常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),可能的原因有如下几点: (1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染; (2)色谱柱头的填料被样品污染; (3)色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲
选择液相色谱柱时应该注意什么?
色谱柱在使用中很常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),可能的原因有如下几点: (1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染; (2)色谱柱头的填料被样品污染; (3)色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的
简介液相色谱梯度洗脱中柱温的影响
许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨
实验室分析仪器高效液相相色谱概念梯度洗脱
用两种(或多种)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定程序连续改变流动相中溶剂的配比和极性,通过流动相中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。(1)高压梯度(内梯度)特点是先加压后混合。将溶剂用高压泵增压以后输入色谱系统的梯度混合室,加以混合后送入色谱柱。(2)低压梯度(外梯度)特点是先
液相色谱梯度洗脱中柱温有什么影响
许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨论液
液相色谱梯度洗脱中柱温有什么影响
许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨论液
高效液相色谱仪的梯度洗脱
高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在一个分析周期内按一定程序连续变化流动相的浓度配比、极性、PH 值或离子强度。对于复杂混合物,特别是保留性能相差较大的混合物,梯度洗脱是改进高效液相色谱仪分离效果的重要手段。一、工作原理:流动相由两种(或多种)不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例而改变流动
液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应
色谱, 2021, 39(1): 10-14 DOI: 10.3724/SP.J.1123.2020.07042 微型述评 液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应 郝卫强*, 刘丽娟, 沈巧银郝卫强《色谱》青年编委 个人简介 博士,研究员,1976年出生。 1994年就读于中国药科大学药
气相色谱仪分析时应该注意哪些问题
气相色谱仪是一种分离测定低沸点混合组分的重要仪器,可供化工、生工、食品专业作仪器分析实验用,也可用于科研及常规分析。 由载气带入,通过对欲检测混合物中组分有不同保留性能的 气相色谱仪色谱柱,使各组分分离,依次导入检测器,以得到各组分的检测信号
气相色谱仪分析时应该注意哪些问题
气相色谱仪是一种分离测定低沸点混合组分的重要仪器,可供化工、生工、食品专业作仪器分析实验用,也可用于科研及常规分析。 由载气带入,通过对欲检测混合物中组分有不同保留性能的 气相色谱仪色谱柱,使各组分分离,依次导入检测器,以得到各组分的检测信号。按照
高效液相色谱仪梯度洗脱曲线
高效液相色谱仪梯度洗脱时,常用一个弱极性溶剂A和一个强极性溶剂B组合,以梯度洗脱时间为横坐标,以流动相中强极性组分B的体积百分含量为纵坐标,可绘出梯度洗脱曲线。若在单位时间内,强极性溶剂B在流动相中的体积百分含量以恒定速率增加,则流动相的极性呈线性梯度输出;若不以恒定速度增加,则流动相的极性呈凸形或
梯度洗脱时,液相出现莫名奇妙的峰,怎么办
如果你说的是溶剂峰,那很正常。梯度洗脱的过程中,尤其是有机相和水相变化的时候,会产生很多莫名其妙的小峰。你可以跑几个空白,然后扣除空白溶剂峰。如果你的空白中没有,只有样品的梯度里有这个峰,那么就要考虑一下是不是有这个杂质没洗脱出来了。有的时候梯度条件写的不好,一个杂质在上一针里洗脱不完全,会留到下一
高效液相色谱仪的梯度洗脱技术
高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速(压力)梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大,而且会带来一些不利影响
高效液相色谱仪的梯度洗脱技术
高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速(压力)梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大,而且会带来一些不利影响