决定DNA在琼脂糖凝胶电泳色谱仪中迁移速率的因素
决定DNA在琼脂糖凝胶电泳色谱仪中迁移速率的因素有DNA分子大小、琼脂糖凝胶浓度、DNA构象、琼脂糖凝胶和电泳缓冲液中的溴化乙锭、所用电压、电泳缓冲液等。一、DNA分子大小：双链DNA分子在琼脂糖凝胶中的迁移速率与其碱基对数的常用对数成反比。分子越大，迁移越慢，因为摩擦力越大，也因为大分子通过凝胶孔的效率低于较小的分子。二、琼脂糖凝胶浓度：给定大小的线状DNA段在不同浓度的琼脂糖凝胶中的迁移速率不同。三、DNA构象：超螺旋环状（Ⅰ型）、切口环状（Ⅱ型）和线状（Ⅲ型）DNA在琼脂糖凝胶中的迁移速率不同，三种类型的移速速率主要取决于琼脂糖凝胶的浓度和类型，电流强度、缓冲液离子强度和Ⅰ型超螺旋绞紧的程度也影响迁移速率。在一些条件下，Ⅰ型DNA比Ⅲ型迁移得快，但在另一些条件下，顺序可能会颠倒。绝大多数情况下，区分不同构象DNA的需求很简单，主要是区分未处理的环状DNA样品和单一位点经限制酶作用线状化的同一DNA样品。四、琼脂糖凝胶和电泳......阅读全文
毛细管等速电泳色谱仪工作原理
毛细管等速电泳色谱仪（CITP）是采用先导电解质和尾随电解质，利用待测离子淌度的不同进行分离，区带界面明显，具有富集和浓缩作用。CITP采用两种不同浓度的电解质。一种为前导电解质，淌度比样品中任何离子的淌度都大并具有一定缓冲能力，充满整个毛细管，并加入到毛细管末端的电解槽中。另一种为尾随电解质，淌
毛细管电泳色谱仪性能特点归纳
毛细管电泳色谱仪（CE）是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离，是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展，使分析科学从微升级进入到了纳升级水平，不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能，也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。CE分离模式有毛细
等电聚焦电泳色谱仪分离技术介绍（一）
等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同，在一个稳定、连续和线性的pH梯度中进行分离。按pH梯度的形成原理不同可分为载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳和固相pH梯度等电聚焦电泳。一、载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳：1、理想的载体两性电解质应具备的条件：载体两性电解质是两性分子
毛细管电泳色谱仪基本概念
毛细管电泳色谱仪（CE）是以毛细管为分离通道，以电渗流为驱动力，利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离。CE基本概念包括电泳现象和电渗现象等。一、电泳现象：1、电泳：电泳是指带电粒子在电场的作用下，向着与其电性相反的电极方向移动的现象。2、电泳技术：电泳技术是指利用电泳现象对混合物进
毛细管电泳色谱仪分离分析模式
毛细管电泳色谱仪（CE）是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离，是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展，使分析科学从微升级进入到了纳升级水平，正成为生物样品zui重要的分离分析手段。CE分离分析模式有毛细管电色谱、毛细管区带电泳、毛细管胶束电
毛细管电泳色谱仪整体柱制备
毛细管电泳色谱仪整体毛细管柱是采用有机和无机方法在毛细管中进行原位自由基聚合反应或固化，形成连续床固定相，不用柱塞，简化了柱制备过程。通过改变单体可引入多种官能团，有更好的多孔性和渗透性，对流动相阻力小，溶质在固定相和流动相之间快速分配，有利于实现高速分离。整体毛细管柱按基质不同可分为无机基质整体毛
毛细管等速电泳色谱仪分析技术
毛细管等速电泳色谱仪（CITP）是采用先导电解质和尾随电解质，利用待测离子淌度的不同进行分离。一、CITP条件：1、特殊的电解质系统：（1）前导电解质：淌度比样品中任何离子的淌度都大并具有一定缓冲能力的离子。（2）尾随电解质：淌度比样品中任何离子的淌度都小并具有一定缓冲能力的离子。（3）对离子：以
毛细管凝胶电泳色谱仪工作原理
毛细管凝胶电泳色谱仪（CGE）是20世纪80年代后期发展起来的毛细管电泳分离模式。它是将常规凝胶电泳仪对生物大分子的分离能力与毛细管电泳仪的快速、微量和定量分析相结合，是当今分离度极高的一种分离技术。聚丙烯酰胺凝胶是CGE的理想载体，将聚丙烯酰胺等在毛细管中交联生成网状多孔凝胶，以凝胶作为载体进行电
毛细管电泳色谱仪填充柱技术
毛细管电色谱仪（CEC）填充毛细管柱是将固定相填充到毛细管中，通过两端烧结柱塞将固定相保持在毛细管中而成。其zui大优点是可利用众多的HPLC固定相，根据化合物与固定相的作用不同实现分离，在CEC中应用zui广泛。一、固定相：固定相是影响填充毛细管柱分离选择性、柱效和分离速度的重要因素，是发展新型C
毛细管凝胶电泳色谱仪支持介质
毛细管凝胶电泳色谱仪（CGE）是将聚丙烯酰胺等在毛细管中交联生成网状多孔凝胶，以凝胶作为支持介质进行电泳。它是将常规凝胶电泳仪对生物大分子的分离能力与毛细管电泳仪的快速、微量和定量分析相结合，是当今分离度极高的一种分离技术。一、支持介质特性：采用聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的目是防止CGE电泳过程中分
毛细管电泳色谱仪主要特点
毛细管电泳色谱仪（HPCE）是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度和分配系数的差异进行分离，具有三高二少的特点。一、高灵敏度：紫外检测器的检测下限可达10ˉ1～10ˉ15mol，激光诱导荧光检测器可达10ˉ19～10ˉ21mol。二、高分辨率：每米理论塔板数为几十万，高
毛细管电泳色谱仪的分离模式
毛细管电泳色谱仪（CE）的分离模式有毛细管区带电泳、毛细管胶束电泳色谱、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳、毛细管等速电泳、毛细管阵列电泳和毛细管芯片电泳等。一、毛细管区带电泳（CZE）：CZE又称毛细管自由电泳，由于操作简单、多样化，是目前CE中最基本、应用最广泛的一种分离模式。在CZE中，毛细
琼脂糖凝胶电泳色谱仪分析技术
琼脂糖凝胶电泳色谱仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳技术，广泛用于核酸研究，为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。一、工作原理：琼脂糖凝胶电泳中，DNA分子的迁移率与其分子量的常用对数成反比。DNA分子构象对迁移率也有影响，迁移率为共价闭环DNA＞直线DNA＞开环双链DNA
毛细管胶束电泳色谱仪分离的基础
毛细管胶束电泳色谱仪分离中，把离子型表面活性剂（如十二烷基硫酸钠）加入缓冲液，当其浓度超过临界浓度后形成有一疏水内核、外部带负电的胶束。虽然胶束带负电，但电渗流速度仍大于胶束的迁移速度，故胶束将慢速向负极移动。中性粒子按其疏水性不同，在缓冲液（流动相）和胶束（准固定相）之间分配。疏水性强、亲水性弱的
毛细管凝胶电泳色谱仪分析技术
毛细管凝胶电泳色谱仪（CGE）是20世纪80年代后期发展起来的毛细管电泳分离模式。它是将常规凝胶电泳仪对生物大分子的分离能力与毛细管电泳仪的快速、微量和定量分析相结合，是当今分离度极高的一种分离技术。一、载体特性：采用聚丙烯酰胺凝胶作为载体的目是防止CGE电泳过程中分子的对流和扩散，使待测组分得到更
毛细管电泳色谱仪的检测技术
毛细管电泳色谱仪（CE）是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离，是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展，使分析科学从微升级进入到了纳升级水平，不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能，也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带的
SDS－PAGE电泳色谱仪常见问题分析
SDS－PAGE电泳色谱仪常见问题分析：一、微笑形区带（两边翘起，中间凹下）： 形成原因：主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的，多出现于较厚的凝胶中。处理办法：待其充分凝固再做实验。二、皱眉形区带（两边向下，中间鼓起）：形成原因：主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是由两板之间的底部间隙气泡未排除干净
等电聚焦电泳色谱仪分离技术介绍（二）
8、载体两性电解质pH值梯度不稳定的原因：阴极漂移是指在等电聚焦电泳中pH梯度的碱性端逐渐消失的过程。反之，如果其酸性端逐渐消失则称为阳极漂移。为了阐明等电聚焦电泳中pH值梯度不稳定的机制，提出了各种假说：（1）载体两性电解质向阴、阳极的等速电泳迁移。（2）在阴极因CO2的吸附而引起阴极液组分和浓度
等电聚焦电泳色谱仪pH梯度的类型
等电聚焦电泳色谱仪是利用蛋白质分子或其它两性分子的等电点不同，在一个稳定的、连续的和线性的pH梯度中进行分离，具有灵敏度高、分辨率高和重复性好等特点，特别适合大批量纯度检测和真实性鉴定以及遗传多样性等群体生物学领域的研究。pH梯度按形成方式可分为载体两性电解质pH梯度和固相pH梯度等。一、载体两性电
毛细管电泳色谱仪的操作步骤
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离，一般操作流程是预平衡、进样、分离、检测和数据处理等。典型的操作步骤如下：一、将运行缓冲液充满毛细管。二、移去进样端缓冲液池，用样品池代替。三、用电动进样或压力进样方式进样。四、将进样端缓冲
毛细管电泳色谱仪与液相色谱仪的性能特点比较
毛细管电泳色谱仪是（简称毛细管电泳仪）以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离，是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展，使分析科学从微升级进入到了纳升级水平，不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能，也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。毛细管
影响琼脂糖凝胶电泳色谱仪电泳迁移率的因素
影响琼脂糖凝胶电泳色谱仪电泳迁移率的因素有DNA分子大小、DNA构象、凝胶浓度、琼脂糖种类、电泳缓冲液、嵌入染料的存在和使用电压等。一、DNA分子大小：DNA分子大小迁移速度与logN成反比（N为碱基对数目）。分子越大，摩擦力越大，同时大分子通过凝胶孔的效率低于较小的分子，所以大分子的迁移速度慢。
高效毛细管电泳色谱仪性能特点归纳
高效毛细管电泳色谱仪（CE）是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离，是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展，使分析科学从微升级进入到了纳升级水平，不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能，也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。 C
毛细管电泳色谱仪检测器汇总
毛细管电泳色谱仪（CE）是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离。由于CE溶质区带的超小体积特性导致光程太短，圆柱形毛细管作为光学表面不够理想，对检测器灵敏度要求相当高。CE检测器有紫外检测器、激光诱导荧光检测器、质谱检测器、电化学检测器、激光
毛细管电泳色谱仪毛细管概述
毛细管电泳色谱仪毛细管是电泳分离的关键。一、尺寸：毛细管尺寸的选择与分离模式和样品有关。自由溶液电泳多选用50或75μm内径的毛细管，分离的有效长度常为40～100cm之间。如进行大颗粒如红细胞分离，则需要内径大于300mμm的毛细管。CGE和CEC的有效长度一般控制在20cm左右。二、涂层：毛细管
毛细管电泳色谱仪毛细管简介
毛细管电泳色谱仪分离的关键部件是毛细管。一、毛细管材质：理想的毛细管必须是电绝缘、紫外可见光透明和富有弹性。目前使用的有塑料毛细管、玻璃毛细管和石英毛细管等，其中使用最多的是石英毛细管。熔融石英拉制的毛细管脆而易断，外涂聚酰亚胺后会变得很有弹性。二、毛细管检测窗口制作：毛细管的聚酰亚胺涂层不透明，检
琼脂糖凝胶电泳色谱仪的载体分类
琼脂糖凝胶电泳色谱仪的载体按熔点可分为高熔点（标准）琼脂糖凝胶和低熔点琼脂糖凝胶。一、高熔点（标准）琼脂糖凝胶：制造高熔点琼脂糖凝胶的原料是Gelidium和Gracilaria海藻。这两种琼脂糖的熔点不同，但在实际应用中每种来源的琼脂糖都可以用于分离1～25kb的DNA段。新型的标准琼脂糖具有高凝
毛细管电泳色谱仪的主要特点
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度和分配系数的差异进行分离。由于毛细管的散热性能良好，允许在小内径毛细管两端加高达30kV的高电压，可在很短的时间内达到很高的分离效率，具有以下特点： 一、分离速度快。二、分离效率高。三、运行成本低。四、样品和试剂消
毛细管电泳色谱仪分析的理想目标
21世纪是生命科学大发展的世纪，人类基因组计划基本完成后，后基因组时代的基因组学和蛋白组学将快速发展，功能基因和蛋白质的分离检测对毛细管电泳色谱仪（HPCE）提出更高的期望。将所有的化学反应集成在一块很小的芯片（Chip）上，建立有一个实验室功能的芯片是HPCE发展的前景。Chip是以晶体硅、石英玻
毛细管电泳色谱仪扩散进样技术
毛细管电泳色谱仪扩散进样是利用浓度差扩散原理，当将毛细管浸入样品溶液时，样品分子因在毛细管管口界面存在浓度差而向管内扩散。一、进样质量：扩散进样时，在时间t内，进入毛细管的样品质量Q为：Q = 400CS（2Dt）1/2式中：D为样品分子的扩散系数，C为样品浓度。扩散进样动力是不可控制参数，进样量