胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原的评价

【 摘要 】 目的 对4种胶体金免疫层析测定(GICA)试条检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的性能、结果等技术参数进行评价,为各实验室的选用提供参考。方法 采用GICA法和酶免疫(EIA)法对定值的HBsAg样品和2 158份全血或血清标本同时测定,并结合有关物理现象作观察,对4种GICA试条的敏感性、特异性、试条渗透性、固相膜均匀性等结果进行评价。结果 4种GICA试条对HBsAg的最小检出量为1~5 ng/ml;与EIA法比较,检出率为95.6%~98.7%,一般不出现假阳性,未发现前带反应;检测所需时间5~30分钟,但试剂成本为EIA法的4~5倍。结论 GICA适用于急诊检验,便于献血员现场采血前的筛选;其敏感性低于EIA法,成本高;单独用于献血员筛选并不可靠,必须与EIA法并用,实行双检。 【 关键词 】 免疫酶技术 肝炎表面抗原,乙型 胶体金 Gold immunoc......阅读全文

免疫胶体金技术1

(一) 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与

乳胶和胶体金区别

应该是胶体金贵因为原理不同,普通聚苯乙烯乳胶和抗体的结合是无选择性的物理静电吸附,抗体很难结合到乳胶表面,即使致敏上的抗体也容易从乳胶微球上脱落或者变性失活,而使用多肽缩合剂或者交联剂则操作过程繁琐和耗时。胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸作用下,可以聚合成一

胶体金快诊技术

大凡存在的,就必有其存在的意义。当胶体金免疫层析检测初出江湖的时候,有人预测这种简易的装置会改变免疫检测的市场格局。当时我们并不以为然。可是后来的事实却证明了这个预言。一种崭新的朴素的检测模式以其极致的简便方式受到市场的青睐。说到胶体金,早早孕和排卵检测市场要远远超出了我们的想象。这个年代,只要是育

胶体金标记蛋白A技术

胶体金标记蛋白A技术(Protein A-gold technique, PAg法)    PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结

免疫胶体金技术3

为了得到颗粒均一的免疫金试剂,可将上述初步纯化的结合物再进一步用10%~30%蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。(2)凝胶过滤法:此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋,在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1/5~1/10。再

免疫胶体金技术2

(3)配制胶体金溶液的pH以中性(pH7.2)较好。(4)氯金酸的质量要求上乘,杂质少。最好是进口的。(5)氯金酸配成1%水溶液在4℃可保持数月稳定,由于氯金酸易潮解,因此在配制时,最好将整个小包装一次性溶解。 (三) 胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在

免疫胶体金技术简介

免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,英文缩写为:GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳

胶体金试验的定义

中文名称胶体金试验英文名称colloid gold test定  义一种免疫组织化学检测技术。即以胶体金标记特异性抗体,用于检测组织切片或细胞标本中的相应抗原。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

免疫胶体金技术介绍

一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质

胶体金法怎么用

胶体金与标记蛋白简介在不同还原剂的作用下,由氯金酸(HAuCL4)可以制备出金颗粒直径在0.8-500nm的胶体金。制备好的胶体金保存时间较长,可在4℃保存6个月以上,或在室温下可保存1-2个月。胶体金在做为标记探针时,不同用途选用的胶体金的直径范围也不同,用于免疫快速检测的胶体金颗粒直径范围一般在

胶体金与蛋白制备

胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。1.待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.005Mo

常用的免疫胶体金检测技术免疫胶体金光镜染色法

细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。免疫胶体金电镜染色法可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负染。可用于病毒形态的观察和病毒检测。

免疫胶体金的应用特点

1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatography)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay

胶体金怎么样制备?

(一)制备原理:一般采用还原法,常用的还原剂有枸橼酸钠、鞣酸、维生素C、白磷、硼氢化钠等。向金溶液内加入还原剂,使金离子还原成金原子,形成金颗粒悬液,也称金溶胶。(二)技术要点:金溶胶的光散射性与溶胶颗粒的大小密切相关,一旦颗粒大小发生变化,光散射也随之发生变异,产生肉眼可见的显著的颜色变化,这就是

免疫胶体金技术测试原理

层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定

免疫胶体金技术的应用

胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的

胶体金探针的质量鉴定

1 .金颗粒的大小及均匀度 用有Formvar支持膜的镍网蘸取金标记 试剂 ,空气干燥后,透射电镜下观察金颗粒的大小及均匀度,计算平均直径,如电镜放大倍数10万,照片放大为2.5倍,100000×2.5=250000=25nm。空气中干燥后乙酸铀负染,在透射电镜下观察,可见金颗粒周围有一明显的空晕,

胶体金分散颗粒制备实验

实验步骤1. 取 0.01% AuCl3 • HCl 水溶液 100 ml,加热至沸腾。2. 加入 4 μl 195Au。 3. 迅速加入 4 ml 1% 柠檬酸三钠水溶液,搅拌 5~7 min,至出现透明的橙红色。4. 其含量为脉冲数 1×106/min。胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的

免疫电镜胶体金标记法

第四节 免疫电镜胶体金标记法  金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,

poct的过去:胶体金时代

    虽然对于公众来讲,“胶体金”的知名度远没有现在的“土豪金”这样高,但对于检验学的业内人士来讲,“胶体金”代表着一个时代。胶体金技术(Immune colloidal gold technique)    自从16世纪欧洲现代化学的奠基人、杰出的医师、化学家Paracelsus制备出“饮用金”

胶体金试验的实验目的

中文名称胶体金试验英文名称colloid gold test定  义一种免疫组织化学检测技术。即以胶体金标记特异性抗体,用于检测组织切片或细胞标本中的相应抗原。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

胶体金的质量鉴定方法

胶体金制备完毕后须经电镜下质量鉴定才能应用。一、胶体金颗粒直径测定用预先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内,取现放在空气中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射电镜下观察,主要观察金颗粒的大小,符合不符合所需要的颗粒直径,金颗粒是否均匀一致,有无椭圆形及多角形金颗粒存在。理想的金颗粒是大小

胶体金法检测流程

这个要看哪家生产的什么产品了,检测的样本不同,一般检测方法也不大相同,但是基本上都是先采样、后样本处理(非必须)、后滴加检测液,后判读结果。胶体金检测法快速准确,操作简单,结果直观,适合基层检测和大众使用,以上海快灵的黄曲霉毒素检测卡为例,样本前处理(粉碎)-----样本提取(10分钟)-----样

胶体金分散颗粒制备实验

实验方法原理 白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较为简便,制备出来的胶体金颗粒大小较一致,因而应用较为广泛,现以 Faulk 和 Taylor(1971)的报道为基础介绍这一方法。试剂、试剂盒 氯化金K2CO3双蒸水实验步骤 1. 取 1% 氯化金 1.5 ml、0.1mol/L K2C

为什么叫胶体金法

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是

免疫胶体金技术的简介

  免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,英文缩写为:GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一

免疫胶体金(Immune-colloidal-gold)

原理  免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸( HAuCl4 )在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基

了解胶体金读数仪---l

  胶体金读数仪是一种能够快速、准确读取试纸测量结果,使得试纸法检测由传统的定性检测转化为定量分析的仪器,其内嵌反射式光度计。胶体金对光的吸收(反射)具有选择性,对绿光(波长在530nm附近)的反射率随胶体金沉淀量的增加而减少,由此可计算被测物的浓度。   奥盛TSR-200胶体金读数仪适用于胶体

胶体金技术是什么原理

胶体金法是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等还原剂的作用下,聚合成相应大小的金颗粒,并由于静电作用而使金颗粒成为一种稳定的胶体状态,形成携带着负电的疏水胶溶液,因为成为了稳定的胶体状

胶体金检测的检测原理

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是