反相液相色谱仪ODS柱的化学性质
反相液相色谱仪ODS柱的化学性质指标有键合类型、碳覆盖率和封端等。一、键合类型:1、单体键合:键合相分子与基体单点相连。单齿键合传质速率高,色谱柱平衡快。2、聚合体键合:键合相分子与基体多点相连。双齿键合增加色谱柱稳定性和载样量。二、碳覆盖率:碳覆盖率指与基质相连的键合相的量。高碳覆盖率:分辨率高,分析时间长。低碳覆盖率:分析时间短。三、封端:封端指在固定相键合步骤后用短链将裸露的硅羟基键合并封闭起来。封端可减轻待测组分与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应而引起的峰拖尾现象。对极性样品,未封端和经过封端的色谱柱在选择性上有明显差异。......阅读全文
反相萃取柱操作
反相萃取柱操作从极性基体中提取非极性的样品1、活化:以3-5毫升甲醇淋洗萃取柱;以3-5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润2、上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱3、清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/有机溶剂混合液)4、洗脱:将被测样品,用
反相色谱柱效能评价
一、反相色谱柱评价条件 对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测波长一般在254nm下检测,因为在此波长处,甲醇、乙腈,磷酸缓冲
什么是反相色谱柱
固定相为非极性的色谱柱。在反相键合相色谱中,溶剂的极性越弱洗脱能力越强,即弱极性溶剂的洗脱强度更大
反相色谱柱效能评价
一、反相色谱柱评价条件对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测波长一般在254nm下检测,因为在此波长处,甲醇、乙腈,磷酸缓冲盐均没有紫外吸收,而且标
反相液相色谱仪种类
反相液相色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分:实验室反相液相色谱仪和工业反相液相色谱仪。2、按色谱柱形状可分:反相液相填充柱色谱仪和反相液相毛细管柱色谱仪。3、按分离规模可分:微型反相液相色谱仪、小型反相液相色谱仪和大型反相液相色谱仪。4、按分离对象的离子性质可分:阴离子反相液相色谱仪和阳离子反相液
如何从正相柱换为反相柱
同一根柱子可以从正相转换为反相,反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支,用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。
如何从正相柱换为反相柱
同一根柱子可以从正相转换为反相,反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支,用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。
C18填料在反相分离模式中的应用
完成一例样品分析,需要一套完整的分析方法,包括三部分:液相色谱系统、流动相和液相色谱柱。对于不同的分离模式,液相色谱仪器平台几乎不需要做任何调整。流动相种类和比例的调整可以对分离产生一定的影响,决定分离效果的根本因素是液相色谱柱。液相色谱柱由4部分构成:堵头、筛板、填料和柱管,其中核心是填料,亦是技
液相色谱仪常用色谱柱
液相色谱仪常用色谱柱有C18柱、C8柱、C4柱、C2柱、C1柱和NH2柱等。一、C18柱:又称ODS柱,使用zui普遍,品种繁多。值得注意的是同样的C18柱,得到的结果可能不一致,尤其是分析极性或离子化合物。流动相为甲醇(乙腈)水系统。适合大多数化合物的分析。二、C8柱:类同于C18柱,保留能力比
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装:1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装 1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。 2、为了使色谱柱与仪器系统
反相色谱柱的使用方法
反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m
反相色谱柱的使用方法
反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m
高效液相色谱仪常用色谱柱
高效液相色谱仪常用色谱柱有C18柱、C8柱、C4柱、C2柱、C1柱和NH2柱等。一、C18柱: 又称ODS柱,使用zui普遍,品种繁多。值得注意的是同样的C18柱,得到的结果可能不一致,尤其是分析极性或离子化合物。 流动相为甲醇(乙腈)水系统。 适合大多数化
液相色谱仪固定相以硅胶作基质的反相色谱填料
液相色谱仪占世界液相色谱仪总量的75%,各领域日常分析所用的液相色谱柱大多为ODS柱。虽然已经开发出各种新的基质,如有机聚合物、石墨化碳、氧化铝、氧化钛和氧化锆,硅胶是反相液相色谱仪中应用最广泛的固定相。这是因为:1 硅胶有良好的机械强度;2 孔结构和比表面容易控制;3 比较好的化学温度型和热稳定性
2.3μm-ODS色谱柱及在中药分析中的应用
图1. Knox曲线的比较。Column:TSKgel ODS-140HTP 2.3μm (2.0mmI.D.×5cm);Sub-2μm ODS columns (2.1mmI.D.×5.0cm);Eluent:H2O/CH3CN=50/50 Detection: UV (2
如何区分正相色谱柱和反相色谱柱
本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明:1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。 由于硅胶
正相和反相色谱柱的区别
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流
反相色谱柱的优点和影响因素
液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等
简述反相HPLC色谱柱的再生步骤
1.取下色谱柱,然后重新连接到色谱仪上,让液体/气体反方向流过色谱柱。 2.用HPLC级水冲洗掉盐/缓冲液。以1毫升/分钟的速度把25毫升水泵入色谱柱。 3.用25毫升异丙醇冲洗色谱柱。 4.用25毫升二氯甲烷冲洗色谱柱。 5.用25毫升正己烷冲洗色谱柱。
Spursil极性改性反相色谱柱特性
Spursil HPLC 柱是以高纯硅胶为基质,采用独特的极性改性技术生产的色谱柱。这个系列的色谱柱不但保留了传统硅胶基质反相色谱柱的性能,而且又增加了一些新的特性: * 填料表面具有极性基团,适合于高水相流动相条件下的分离;* 增强了对亲水性、极性化合物的保留能力;* 独特的选择性和优异的分离度;
正相色谱柱和反相色谱柱的适用范围
反相柱用于大多数HPLC分析,主要用来做含量分析。正相柱主要用于分离手性化合物,主要用于测试ee值,dr值等。前者流动相一般为与水混溶的溶剂,如水-甲醇,乙腈,甚至加入无机盐配成缓冲溶液,而后者往往用正戊烷等憎水溶剂。正相柱对溶剂中的水有一定要求,过多的水会使其损坏。
正相色谱柱和反相色谱柱的适用范围
反相柱用于大多数HPLC分析,主要用来做含量分析。正相柱主要用于分离手性化合物,主要用于测试ee值,dr值等。前者流动相一般为与水混溶的溶剂,如水-甲醇,乙腈,甚至加入无机盐配成缓冲溶液,而后者往往用正戊烷等憎水溶剂。正相柱对溶剂中的水有一定要求,过多的水会使其损坏。
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱?
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据
C18柱是正相还是反相色谱柱
C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据