琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪载体概述
琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪用于分离、鉴定和纯化DNA段,是分子克隆的核心技术之一。该技术操作简单,迅速,能分离用其它方法如密度梯度离心等不能满意分离的DNA段。此外,凝胶中DNA的位置可以用低浓度荧光插入染料如溴化乙锭直接观察到,甚至含量少至20pg的双链DNA在紫外线激发下也能直接检测到。这些分离的DNA条带可以从凝胶中回收,用于各种各样的目的。 琼脂糖凝胶的分离范围很大,50bp至百万bp长的DNA都可以在不同浓度和构型的琼脂糖凝胶中电泳分离。小片段DNA(50~20000bp)zui适合在恒定强度和方向的电场中水平方位的琼脂糖凝胶中电泳分离。在这些条件下,DNA的泳动速度通常随DNA段长度的增加而减少,与电场强度成正比。但此相关性当DNA段长度超过最大极限值时会立即被破坏,这主要是由于凝胶的构成和电场强度决定的。当线状双螺旋DNA的半径超过凝胶的孔径时,就达到分辨率的极限。此时,DNA不再被凝胶按其大小筛分......阅读全文
聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳的区别
聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳的区别为:支持介质不同、用途不同、优势不同。一、支持介质不同1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术2、琼脂糖凝胶电泳:是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法二、用途不同1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:用于分离蛋白质和寡核苷酸2、琼脂糖凝胶
卡隆载体的概念和应用
中文名称卡隆载体英文名称Charon vector定 义卡隆(Charon)是希腊神话中河道摆渡的船夫名字,借喻能运送DNA片段,是取代型噬菌体载体系列。利用DNA缺失的λ噬菌体作为载体,将待克隆的DNA片段置换λ噬菌体缺失的DNA,感染大肠杆菌的特定菌株。能用做较长DNA片段的克隆载体,有较高的
报道载体的概念和功能
中文名称报道载体英文名称reporter vector定 义含有报道基因表达组件的载体。可用以研究启动子或其他基因调控序列或元件的功能,或用于指示其他基因表达水平。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
T载体的概念和应用
T载体是聚合酶链反应产物的克隆运载体,线性化后两侧3′端各多出一个脱氧胸苷酸(T)。由于PCR产物两侧3′端通常含单个脱氧腺苷酸(A),与T载体之间的A-T互补性可提高PCR产物克隆的效率。
表达载体的概念和应用
生物学中,基因工程的基本操作,表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点和氨
载体疫苗的功效和优点
载体疫苗将抗原基因通过无害的微生物这种载体进入体内诱导免疫应答。它的特点是组合了减毒活疫苗强有力的免疫原性和亚单位疫苗的准确度两个优势。这种活载体疫苗的一个显著好处是可以有效在体内诱导细胞免疫,这在目前诱导细胞免疫方法还不够好、细胞免疫在一些疾病又特别重要的背景下显得很有前景。在试验中使用的重要载体
微载体的定义和应用
中文名称:微载体英文名称:microcarrier定义:细胞培养中所使用的一类无毒性、非刚性、密度均一、通常是透明的小颗粒。能使依赖贴壁的细胞在悬浮培养时贴附在颗粒表面单层生长,从而增加细胞贴附生长的面积,有利于细胞的大规模培养和收集。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);方法与技术(二级学科
气相色谱仪基础词汇载体的概念
载体:support 负载固定液的惰性固体。
气液分配色谱仪的载体类型
气液分配色谱仪的载体是承载固定液惰性物质,有硅藻土载体和非硅藻土载体等类型。一、硅藻土载体:由称为硅藻的单细胞海藻骨架组成,主要成分是二氧化硅和少量无机盐,是目前气相色谱中常用的一种载体。1、红色载体:将天然硅藻土与粘合剂在900℃煅烧后,破碎过筛而得。因铁生成氧化铁呈红色,故称红色载体。(1)特点
凝胶色谱仪概述
凝胶色谱属于液相色谱,它是按被分析混合物不同组分分子大小的不同进行分离的,多用于高聚物的分析。它以液体做流动相,以多孔固体做固定相,其中孔是有一定尺寸限制的,而且大小不一。 它的分离过程是在装有多孔固定相的色谱柱中进行的。当尺寸大小不同的分子通过色谱柱时,可占据的窨体积也不同对流动相分子而言,填料孔
几种蛋白质凝胶电泳方法的区别和用途
1、醋酸纤维素薄膜电泳 :醋酸纤维素薄膜电泳是以醋酸纤维素薄膜为支持物,它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成.醋酸纤维素膜薄是一种细密而又薄的微孔膜.醋酸纤维素膜对样品的吸附性较小,因此,少量的样品,甚至大分子物质都能得以较高的分辨率.又由于醋酸纤维素薄膜亲水性较小,故电渗作用也较小,并
琼脂糖凝胶的特性和用途
琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂 糖,琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的
pTrcHis2-B载体载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis2 B载体载体基本信息载体名称pTrcHis2 B载体抗性Ampicillin载体长度4404 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis2 B载体质粒图
LITMUS38i载体载体的基本信息和质粒图谱
LITMUS38i载体载体基本信息载体名称LITMUS38i载体抗性Ampicillin载体长度2814 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷贝数High copy number克隆方法Enzym
关于核酸电泳的应用范围介绍
1、核酸电泳—琼脂糖凝胶电泳适合分离、纯化200bp-50kB长度的核酸片段,广泛应用于基因组提取与分析、载体构建、质粒提取等方面,分辨率较低,相差100bp以内的核酸片段较难分离。 2、核酸电泳—聚丙烯酰胺凝胶电泳适合分离1kB以下的小核酸片段,适用于序列分析与比对、核酶分析与鉴定、小片段核
谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验
pGEX 载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽 S 转移酶融合,因此可以通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒二硫苏糖醇谷胱甘肽洗脱缓冲液磷酸缓冲钠盐溶液Tri
定点诱变实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE寡核苷酸引物质粒dNTPDNA聚合酶氯仿石蜡油无水乙醇仪器、耗材 离心管热循环仪离心机实验步骤 1. 利用突变区两侧的限制性内切酶位点将待诱变的DNA片段亚克隆进高拷贝数的载体中。 2. 用小量制备的质粒提取模板DNA,用TE缓冲液重悬100 ng DNA至终浓
定点诱变实验
基本方案 利用PCR引物点突变 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
对气液分配色谱仪载体的要求
对气液分配色谱仪载体的要求:一、表面化学惰性,即表面没有吸附性或吸附性很弱,更不能与被测样品发生化学反应。二、多孔性,即表面积大,使固定液与样品的接触面积较大。三、热稳定性高,有一定机械强度,不易破碎。四、载体粒度要均匀、细小,从而有利于提高柱效。但粒度过小,会使柱压降低,对操作不利。一般选择40~
高效气液分配色谱仪的载体类型
高效气液分配色谱仪的载体是承载固定液惰性物质,有硅藻土载体和非硅藻土载体等类型。 一、硅藻土载体: 由称为硅藻的单细胞海藻骨架组成,主要成分是二氧化硅和少量无机盐,是目前气相色谱中常用的一种载体。 1、红色载体: 将天然硅藻土与粘合剂在900℃煅烧后,破碎过筛而得。因铁生成氧化铁呈红色,
高效气液分配色谱仪的载体类型
高效气液分配色谱仪的载体是承载固定液惰性物质,有硅藻土载体和非硅藻土载体等类型。 一、硅藻土载体: 由称为硅藻的单细胞海藻骨架组成,主要成分是二氧化硅和少量无机盐,是目前气相色谱中常用的一种载体。 1、红色载体: 将天然硅藻土与粘合剂在900℃煅烧后,破碎过筛而得。因铁生成氧化铁呈红色,
气液分配色谱仪载体的预处理
气液分配色谱仪载体主要起承担固定液的作用,表面应化学惰性,但实用中的载体总是呈现出不同程度的催化活性,特别是当固定液的液膜厚度较小,分离极性物质时,载体对组分有明显的吸咐作用,从而造成色谱峰严重不对称,所以载体在使用前必须先经过处理。气液分配色谱仪载体常用的预处理方法有酸洗法、碱洗法、硅烷化处理和釉
气液分配色谱仪载体的选择原则
气液分配色谱仪分析中,选择适当的载体能提高柱效,有利于样品的分离。选择载体的大致原则如下:一、固定液用量>5%(质量分数)时,一般选用白色硅藻土载体或红色硅藻土载体。二、固定液用量<5%(质量分数)时,一般选用表面处理过的载体。三、腐蚀性样品可选用氟载体。四、高沸点样品可选用玻璃微球载体。五、载体粒
插入型载体的概念和应用
中文名称插入型载体英文名称insertion vector定 义一类可以容纳一定长度外源DNA片段的噬菌体载体,在克隆时无需去除与插入体大小相当的片段。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
电子载体的概念和功能特点
电子载体在的物质称为电子载体。参与传递的电子载体有四种(coenzyme Q),在这四类电子载体中,除了辅酶Q以外,接受和提供电子的氧化还原中心都是与蛋白相连的辅基。在线粒体电子传递系统(呼吸链)内起接受和提供电子或氢(由质子和电子组成)的物质称为电子载体,它们分别是各种脱氢酶的辅酶,如NAD+,F
细菌疫苗载体的概念和作用
中文名称细菌疫苗载体英文名称bacterial vaccine vector定 义作为疫苗载体的细菌性疫苗株。如卡介苗菌。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫预防(三级学科)
重组载体疫苗的概念和作用
一种新型疫苗。以减毒活病毒或减毒活细菌为载体,将编码特定病原体免疫原性蛋白的基因插入载体,作为疫苗输入机体可预防特定病原体。
酵母载体的分类和选择标准
根据转化细胞中的复制机制,可将酵母质粒载体分为两个基本类型即整合载体和自我复制载体。选择酵母载体的必须慎重考虑以下几个标准:①大肠杆菌和酵母均有适当的遗传标志;②结合实际需要,考虑在酵母中的复制方式;③在酵母和大肠杆菌中的拷贝数;④要有简单易行的筛选插入物的方式。
[运]载体的定义和应用特点
中文名称[运]载体英文名称carrier定 义(1)为分离样品中微量的放射性物质而加入的大量同类非放射性物质。(2)在细胞悬浮培养系统中,支撑生物体或细胞生长的固相颗粒基质。如加入发酵罐中的特殊塑料或微孔玻璃颗粒。(3)携带另一种物质转移的转运剂。如结合某种物质,携带其通过生物膜或在生物体液中转运
酵母质粒载体的概念和分类
酵母质粒载体是基因表达载体的一种,既可以在大肠杆菌中、又可以在酵母系统中进行复制与扩增,所以也称为穿梭载体。它分为整合载体和自我复制载体两类。①整合载体:它带有一个酵母URA3标志基因和大肠杆菌的复制和报告基因。②自我复制载体:该类载体在酵母中可以自我复制。