我国学者发现调控核酸聚合酶催化复合物稳定性新机制
RNA病毒是一类独特的生命形式，其转录及基因组复制过程均不涉及DNA形式，因此需要由病毒自身编码的依赖RNA的RNA聚合酶（RdRP）来主导完成。和其他类别的持续合成聚合酶类似，病毒RdRP可准确而高效地实现多达数万个核苷酸的合成，因此需要将催化复合物的稳定性维持在较高的水平。在DNA复制过程中，某些DNA聚合酶可招募能嵌套在双链DNA上并沿双链滑动的环状复合物“sliding clamp”，从而提升聚合酶催化复合物的稳定性。但迄今为止尚未在病毒RdRP合成核酸的过程中发现类似机制。 中国科学院武汉病毒研究所/生物安全大科学研究中心龚鹏研究员课题组长期从事病毒RdRP的催化与调控机制研究，近期该团队解析了分辨率为1.8埃的肠道病毒（enterovirus, EV）RdRP（又称3Dpol）与RNA形成的延伸复合物的晶体结构（图A，PDB号：6KWQ），发现位于RdRP催化中心下游的5'末端鸟嘌呤碱基与位于RdRP手......阅读全文
DNA聚合酶的缺点
缺点无3'→5'阅读校正功能，在PCR扩增过程可引起错配，30次循环错配率约0.25%。措施:选择高保真Taq酶，如Pfu。原因:Pfu具有3'→5'外切酶活性。注意:Pfu扩增产物为平末端。
DNA聚合酶的特性
原核生物大肠杆菌DNA聚合酶DNA聚合酶最早在E.coli中发现，到目前为止已确定有5种类型，分别为DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶V，都与DNA链的延长有关。 其中DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ研究得比较明确。DNA聚合酶Ⅰ是1956年由Arthur Kombe
定量聚合酶链反应
中文名称定量聚合酶链反应英文名称quantitative PCR;qPCR定 义将某种已知含量的DNA模板作为内标准进行PCR反应，对待测模板进行定量分析的方法。更灵敏的定量PCR是采用实时PCR方法。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
DNA聚合酶的特性
DNA聚合酶有多种，E.coli就有三种。通常DNA聚合酶具有以下共同特点： ①需要DNA模板，因此这类酶又称为依赖DNA的DNA聚合酶；②需要RNA或DNA作为引物(primer)，即DNA聚合酶不能从头催化； ③催化dNTP加到引物的3'-OH末端，其速率为1000nt/min，因而DN
反向聚合酶链反应
中文名称反向聚合酶链反应英文名称inverse PCR;iPCR定 义用于扩增已知序列的DNA旁侧未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上没有识别位点的限制内切酶，切出包含已知DNA、而两端带有未知序列的区段，将切出的DNA区段环化，然后再按已知的DNA序列设计一对引物进行扩增。应用学科细胞生物学
关于聚合酶的介绍
1957年，美国科学家阿瑟·科恩伯格（Arthur Kornberg）首次在大肠杆菌中发现DNA聚合酶，这种酶被称为DNA聚合酶I（DNA polymerase I，简称：Pol I）。1970年，德国科学家罗尔夫·克尼佩尔斯（Rolf Knippers）发现DNA聚合酶II（Pol II）。随
RNA聚合酶的特点
RNA聚合酶催化RNA的合成，其与DNA聚合酶有许多相同的催化特点：①以DNA为模板；②催化核苷酸通过聚合反应合成核酸；③聚合反应是核苷酸形成3’，5’一磷酸二酯键的反应；④以3’→5’方向阅读模板，5’→3’方向合成核酸；⑤按照碱基配对原则忠实转录模板序列。
哈佛团队首次发现摧毁致病菌防御堡垒的关键结构
科学家们破解了常见细菌细胞壁组成蛋白质结构，为新抗菌疗法奠定了基础。 保护细菌免受外部攻击的细胞壁一直是药物研究的重要目标。在现代医学界，最可靠的抗生素也是通过破坏细菌防御来瓦解有害细菌。 几十年来，科学家们只发现了一个壁蛋白家族。直到2016年，来自哈佛医学院的Andrew C. Krus
日本研究称绿茶成分可对抗甲型流感病毒
日本德岛文理大学一项最新研究发现，绿茶中的儿茶素能直接作用于甲型H1N1流感病毒的关键部位，从而抑制病毒的增殖。 据日本《读卖新闻》报道，在甲型H1N1病毒等甲型流感病毒的增殖过程中，核糖核酸聚合酶都必不可少。德岛文理大学研究人员从甲型流感病毒中提取了核糖核酸聚合酶，向这种酶中添加绿茶中比
各种PCR的“酶”你不行！
聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的核苷酸片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊核苷酸复制，PCR的最大特点是能将微量的核苷酸进行大幅扩增，从而达到容易鉴定和识别程度。 各种PCR到底需要哪些种类的酶？请看中心法则，分子生物学的中心教条。体外的各种聚合酶链式反应就是中心法则的完美
科学家找到控制麻疹病毒和尼帕病毒复制的“开关”
上海科技大学免疫化学研究所副研究员张贺桥和特聘教授罗杰·科恩伯格团队，首次揭示了非核苷类抑制剂有效抑制麻疹病毒和尼帕病毒RNA聚合酶复合物活性的分子机制，为应对这两种全球性传染病的抗病毒药物研发提供了关键科学基础。相关研究7月7日发表于《细胞》。 麻疹病毒传染性极强，平均一名患者可传染12-1
Science及Nature共述：口袋里的DNA测序仪，可实时诊断
纳米孔测序的想法起始于25年前， 2012年5月4日《Science》首次报道了Oxford Nanopore公司研制的纳米孔测序仪样机——MinION，用于破译病毒DNA。然而MinION的发展历程并不那么顺利，英国牛津大学基因组学中心基因组学家Rory Bowden说，“众所周知，在每次读取
生化检测项目C－14呼气检测仪＋呼气检测口袋介绍
C－14呼气检测仪＋呼气检测口袋介绍： C-14呼气检测仪和呼气检测口袋是检测幽门螺杆菌的医学界金标准。只要要吹气5分钟外，无其他任何不适。该方法使众多高血压、心脏病及对胃镜过敏的病人避免了做胃镜的不适感，是目前理想的检测方法之一。C－14呼气检测仪＋呼气检测口袋正常值： 计数/分钟100即为阳
c14呼气检测仪+呼气检测口袋的检查过程
1.受试者应在早上空腹时或进食两小时以后受试，受试前漱口。 2.用约20ml凉饮用水送服尿素[14C]胶囊一粒后，静坐25分钟。 3.开启CO2集气剂一瓶，插入一洁净的有防倒流装置的气体导管，导管下端应浸入集气剂液内，受试者通过导管吹气，力度适中以免液体溅出，严禁倒吸!当CO2集气剂由紫红色
c14呼气检测仪+呼气检测口袋的临床意义
异常结果：计数/分钟>100即为阳性，说明感染幽门螺杆菌。 需要检查人群：消化道溃疡、慢性胃炎患者。
c14呼气检测仪+呼气检测口袋的注意事项
检查前禁忌： 1.在清晨空腹或进食两小时后。 2. CO2集气剂在使用前不得开启，以免因吸收空气中CO2而影响测量结果。 检查时禁忌： 1. 不能咬破胶囊。胶囊如有破损不能使用。 2.吸收剂和闪烁液严禁内服。 3.吸收剂如有少量吸入口中，请立即吐出，用清水漱口。 4.闪烁液如洒到眼
实现新冠病毒单拷贝检测的重点在Taq酶单克隆抗体的性能
假如您从事新冠核酸检测体系的开发和评估，想问问您是否遇到过以下问题：? 非特异性扩增、引物二聚体？? 灵敏度上不去，检出率低？? Taq酶性能不稳定，qPCR线性关系差？遇到这些问题莫要慌，翊圣Hieff? Taq酶单克隆抗体来救驾！ Hieff? Taq酶单克隆抗体高效封闭Taq酶的DNA聚合酶活
标准的PCR反应体系
参加PCR反应的物质为模板、引物、耐热DNA聚合酶、三磷酸脱氧核苷酸和镁离子，其中关键步骤是最佳引物的设计 [2] 。 1. 模板核酸 模板(靶基因或样品DNA)核酸的量与纯化程度是PCR成败与否的关键环节之一。一般临床检测标本，可采用快速简便的方法溶解细胞，裂解病原体，消化除去染色体的蛋白
核酸纯化仪简介/核酸纯化仪
Nucleic Acid Extraction System是使用通用磁珠法提取核酸的高科技产品，具有自动化程度高，提取速度快，结果稳定，操作简便的优点。利用一般生化专用的96孔反应盘，可同时操作1-32个样品，可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与
原位聚合酶链式反应（in－situ－PCR）和原位反转录聚合酶...
原位聚合酶链式反应（in situ PCR）和原位反转录聚合酶链式反应原位聚合酶链式反应（in situ PCR）和原位反转录聚合酶链式反应（in situ RT-PCR）操作规程 （一）、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 （二）、操作流程 1、原位PCR步骤
复制聚合酶的基本特性
中文名称复制聚合酶英文名称replication polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。大肠杆菌细胞内真正负责重新合成DNA的DNA聚合酶Ⅲ。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
TaqDNA聚合酶的功能简介
Taq DNA聚合酶的氨基酸顺序，特别是氨基酸的前1/3区域，与大肠杆菌聚合酶I非常相似，因而它们属于一种多功能酶。 1．具有5'→3'聚合作用 可以以DNA为模板，以结合在特定DNA模板上的引物为出发点，将四种脱氧核苷酸以Watson—Crick配对的方式按5'→3
什么是聚合酶链反应？
聚合酶链反应或多聚酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR），又称无细胞克隆技术(“free bacteria”cloning technique)，是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis 等
DNA聚合酶有什么作用
DNA聚合酶（DNA polymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。DNA聚合酶的共同特点是：⑴需要提
DNA聚合酶的研究历史
1953年，沃森和克里克发表了经典论文，描述DNA的化学结构，而一些科学家对它的重要性提出了最初的质疑。两人在论文中提出，DNA的复制原理仍有待确定。当时，美国生物化学家阿瑟·科恩伯格正在密苏里州圣路易斯市的华盛顿大学微生物学系工作，他认可了这篇论文的重要意义。由此，他开始对机体合成核酸的过程产生了
RNA聚合酶的基本介绍
RNA聚合酶（RNA polymerase）：以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。 催化转录的RNA聚合酶是一种由多个蛋白亚基组成的复合酶。如大肠杆菌的 RNA聚合酶有五个亚基组成，其分子量为480000，含有α，β，β’，σ，ω等5种不同的多肽，其中α为两个分
口蹄疫聚合酶链反应（PCR）
20世纪90年代初，PCR技术日趋成熟，也渗入到FMD的诊断中。这一技术特异性强，灵敏度高，可检测多种组织样品，检测病毒RNA的PCR方法已经成为FMDV检测方法中的一种，PCR方法具有极高的灵敏度（其理论值为一个病毒粒子的核酸），因为它仅需要极少量的反应模板，而且可以设计多循环PCR反应。由于仅
耐热DNA聚合酶的选择
耐热DNA聚合酶特点：合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素，如何选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。目前市面上有许多耐热DNA聚合酶，虽然名称各不相同，但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。TIANGEN公司生产的耐热DNA聚
什么是高温DNA聚合酶？
DNA聚合酶也称耐高温DNA聚合酶。1988年，Saiki从嗜热水生真菌Thermus aquatics YT-1株中分离得到，该菌株于1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离出。
RNA聚合酶的催化特点
RNA聚合酶催化RNA的合成，其与DNA聚合酶有许多相同的催化特点：①以DNA为模板；②催化核苷酸通过聚合反应合成核酸；③聚合反应是核苷酸形成3’，5’一磷酸二酯键的反应；④以3’→5’方向阅读模板，5’→3’方向合成核酸；⑤按照碱基配对原则忠实转录模板序列。