希尔博士关于外泌体保存的常见问题的解答
希尔博士在接受外泌体NTA检测的技术咨询时，经常会被问到外泌体保存相关的问题。譬如：→我的外泌体已经在4度放了一周，还能做检测吗？→我是1个月前提取的外泌体，一直放在-80度冰箱，还能做粒径检测吗？→我的样本放在-80度冰箱两个月了，还能提取外泌体做检测吗？→我在沈阳，寄样本去上海做检测，可以用冰袋寄送吗？诸如此类………目前并没有定论来回答以上问题，我们应该去文献中寻找可参考的信息，抑或——最科学的方式——自行做对照实验去探究。Example 1数据来源：Influence of Storage Condition on Exosome Recovery , DOI: 10.1007/s12257-015-0781-x 实验目的：探究不同温度下长时间保存对外泌体样本的影响实验方法：对HEK 293的细胞培养上清提取分离外泌体，将外泌体样本分成4组，分别保存在-70℃、-20℃、4℃和室温下10天后......阅读全文
定量PCR常见问题(二)
8. 什么是背景校正？多长时间执行一次背景校正？ 背景校正程序测量定量PCR仪所使用的反应管和水的空白荧光强度。在运行校正程序期间，定量PCR仪在10分钟内连续读取背景校正板的荧光强度，信号收集的温度为60 °C。随后，SDS软件计算所收集到的荧光强度的平均值，提取结果并保存到校正文
涂层测厚仪常见问题处理
1.仪器开机没反应怎么办？答：首先检查一下电池是否装反；或考虑电池是否没电，如排除电池问题后仍然无法开机，即需要与厂家。 2.正常开机，但测试没反应？答：首先排除是否校了空零位，重新校零即可正常操作（操作见第九章）。 3.为什么在随机附带的校准试片上校准后，测量工件还是出现测值“不准”？答：影响测值
原子吸收常见问题处理
原子吸收常见问题处理 1、为啥原子吸收仪器的灵敏度会突然下降了一半? 通常原子吸收分光光度计灵敏度下降的原因有： A、元素灯能量下降，低于原始能量得2/3； B、雾化器故障，雾化效果不好； C、燃烧头污染； D、检测器故障，多半是老化(但这种现象很少)； E、样品吸收管路堵塞(这种
原子吸收常见问题处理
1、校正曲线为何会发生弯曲呢?原子吸收常见问题处理 光吸收的最简式A=KC，只适用于理想状态均匀稀薄的蒸汽原子，随着吸收层中原子浓度的增加，上述简化关系就不应用了。 在高浓度下，分子不成比例地分解;相对于稳定的原子温度，较高浓度下给出的自由原子比率较低。 (1)由于有不被吸收的辐射、杂散光的存
PH计电极常见问题
1、什么是pH指示电极？ 对溶液中氢离子活度有响应，电极电位随之而变化的电极称为pH指示电极或pH测量电极。pH指示电极有氢电极、锑电极和玻璃电极等几种，但最常用的是玻璃电极。玻璃电极是有玻璃支杆，以及由特殊成份组成的对氢离子敏感的玻璃膜组成。玻璃膜一般呈球泡状，球泡内充入内参比溶液，插入内参比电
光度计常见问题
分光光度计常见问题 1、分光光度计可应用于哪些行业？ 答：可广泛应用于化工、制药、生化、冶金、轻工业、纺织、材料、环保、医学化验及教育等行业, 是分析试验领域中重要的质量检测仪器之一, 是常规实验室的必备仪器。 2、在选购仪器时应注意哪些主要指标？ 答：分光光度计波长范围
PCR常见问题及对策
PCR常见问题及对策（一）没有得到扩增产物（1）酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。（2）模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。（3）变性温度是否准确：PCR
色谱柱使用常见问题
柱压升高 原因：缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出，堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙，阻碍流动相传质，引起柱压升高； 相同化合物的保留时间发生变化 原因：如果没有冲洗干净就进行进样，色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化； 柱效下降 原因： 1、有些缓冲盐会渗入到键合相的深处，损害硅胶
蛋白纯化常见问题总结
蛋白纯化过程中常遇见一些问题，这里整理了以下几个蛋白纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白，纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析，之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列，没有问题。细胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助
原子吸收常见问题处理
1、为啥原子吸收仪器的灵敏度会突然下降了一半? 通常原子吸收分光光度计灵敏度下降的原因有： A、元素灯能量下降，低于原始能量得2/3; B、雾化器故障，雾化效果不好; C、燃烧头污染; D、检测器故障，多半是老化(但这种现象很少); E、样品吸收管路堵塞(这种现象经常导致灵敏度下降);
色谱耗材常见问题（五）
1、如何清洗分流平板（镀金密封垫）A.在溶剂中超声清洗，烘干；B.用非氯硅烷化试剂去活化：HMDS（六甲基二硅烷）或BSTFA（N，O双（三甲基硅烷基）或BSA（N,O-双(三甲基硅烷基)乙酰胺）或TSIM、TSIM（N-三甲基硅烷咪唑）；C.用溶剂清洗，先惰性洗涤——甲苯，再用醇类清洗——甲醇，
旋光仪常见问题
1、旋光仪主要应用在哪些行业？答：食品、化工、医药、香精香料等行业中都有广泛的应用。2、在选购旋光仪时应该注意哪些指标？答：准确度、重复性都是仪器最重要的指标，样品透过率这一指标可以反映仪器的灵敏度，一般样品透过率1%的都相对灵敏度比较高的。如果选购控温型旋光仪，那么控温精度就比较重要，如果控温精度
PCR克隆常见问题分析
1、克隆PCR产物的最优条件是什么？ 最佳插入片段：载体比需实验确定。1:1（插入片段:载体）常为最佳比，摩尔数比1:8或8:1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共10ul。室温保温1小时，或4℃过夜。在
原子吸收常见问题处理
原子吸收常见问题处理 1、为啥原子吸收仪器的灵敏度会突然下降了一半? 通常原子吸收分光光度计灵敏度下降的原因有： A、元素灯能量下降，低于原始能量得2/3; B、雾化器故障，雾化效果不好; C、燃烧头污染; D、检测器故障，多半是老化(但这种现象很少); E、样品吸收管路堵塞(这种现象
测序常见问题及其分析
1、PCR 产物测序时出现重叠峰 问题图1（模板中有碱基缺失，往往是单一位点（1-1）或两个位点（1-2）碱基缺失导致测序 结果移码） 解决方法：将PCR 产物克隆到质粒（如T 载体）中挑单克隆测序，或将PCR 产物进行PAGE 纯化（至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化）后再进
水平仪常见问题
1 开关旋钮没旋转到底。 2 打开机壳，检查一下铜丝有没有脱焊。一般情况，上电池后有喇叭响声，而没有灯亮，就属于该种情况 3 电池盒——检查焊线有没有断，弹簧与电池是否接触良好。 4 测一下开关线路，看微动开关通不通电，若是通电代表开关没有问题，若是不通电，请更换微动开关。 5 线路主板
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓
PH计常见问题分析
常见问题及解决方案1.同一样品，两次测量的 pH值不一样？温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。2.同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？由于两台 pH计的校正条件不一样（如，不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一
凝胶成像系统常见问题
凝胶成像系统，大家在使用过程中会遇到各种问题，下面巴玖就为您介绍一下凝胶成像系统常见问题。希望对大家有所帮助。凝胶成像系统常见问题：1、是不是像素越高，产品就越好？像素是要针对成像设备来看的，比如数码相机与CCD的像素就不具备可比性，其次CCD本身的质量比单纯的像素高低更重要。对于同级别CCD最重要
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为10
PCR常见问题总（2）
克隆PCR产物1)克隆PCR产物的最优条件是什么？最佳插入片段：载体比需实验确定。1：1（插入片段：载体）常为最佳比，摩尔数比1：8或8：1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共10ul。室温保温1小时，或4℃过夜。在这2种温度
继电器的常见问题
固体继电器常见问题 一、继电器不断开 （1） 负载电流大于SSR的额定切换电流，这样会使继电器永久短路，此时应使用额定电流较大的SSR。 （2） 在继电器所处的环境温度下，对于所承受的电流来说如散热不良，会损坏输出半导体器件，此时应使用较大的或更有效的散热片。 （3） 线电压瞬变引起SS
PCR常见问题汇总（二）
PCR反应体系与反应条件-------------------------------------------------------------------------------- 标准的PCR反应体系：10×扩增缓冲液 10ul4种dNTP混合物 各200umol/L引物 各10～100p
旋光仪常见问题
1、旋光仪主要应用在哪些行业？答：食品、化工、医药、香精香料等行业中都有广泛的应用。2、在选购旋光仪时应该注意哪些指标？答：准确度、重复性都是仪器最重要的指标，样品透过率这一指标可以反映仪器的灵敏度，一般样品透过率1%的都相对灵敏度比较高的。如果选购控温型旋光仪，那么控温精度就比较重要，如果控温精度
PCR常见问题总汇(一）
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模
PCR常见问题总（3）
PCR反应体系与反应条件标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2
PCR常见问题总（1）
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模
ICPAES常见问题
电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES），是以电感耦合等离子矩为激发光源的光谱分析方法，具有准确度高和精密度高、检出限低、测定快速、线性范围宽、可同时测定多种元素等优点，国外已广泛用于环境样品及岩石、矿物、金属等样品中数十种元素的测定。今天，我们为您带来ICP-AES分析常见12个故障问
热像仪的常见问题归纳
第一题：红外热像仪的基本构造是怎么样的？答：包括 5 大部分：1）红外镜头 ： 接收和汇聚被测物体发射的红外辐射；2）红外探测器组件 ： 将热辐射型号变成电信号；3）电子组件 ： 对电信号进行处理；4）显示组件 ： 将电信号转变成可见光图像；5） 软件 ： 处理采集到的温度数据， 转换成温度
TA克隆常见问题分析
现象可能原因解决方案 转化后无菌落生长 感受态细胞已经失效用pUC18质粒进行转化，确认细胞的感受态效率。1ng pUC18质粒至少应得到1000个以上的转化子。如有问题，重新制备感受态细胞。 平板所用抗性不对pBS-T载体为amp抗性，工作浓度 100 ug/ml 连接中使用了不恰当的vector