希尔博士关于外泌体保存的常见问题的解答

希尔博士在接受外泌体NTA检测的技术咨询时,经常会被问到外泌体保存相关的问题。譬如:→我的外泌体已经在4度放了一周,还能做检测吗?→我是1个月前提取的外泌体,一直放在-80度冰箱,还能做粒径检测吗?→我的样本放在-80度冰箱两个月了,还能提取外泌体做检测吗?→我在沈阳,寄样本去上海做检测,可以用冰袋寄送吗?诸如此类………目前并没有定论来回答以上问题,我们应该去文献中寻找可参考的信息,抑或——最科学的方式——自行做对照实验去探究。Example 1数据来源:Influence of Storage Condition on Exosome Recovery , DOI: 10.1007/s12257-015-0781-x 实验目的:探究不同温度下长时间保存对外泌体样本的影响实验方法:对HEK 293的细胞培养上清提取分离外泌体,将外泌体样本分成4组,分别保存在-70℃、-20℃、4℃和室温下10天后......阅读全文

PCR常见问题及对策

PCR常见问题及对策(一)没有得到扩增产物(1)酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。(2)模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。(3)变性温度是否准确:PCR

原子吸收常见问题处理

1、影响火焰原子吸收光谱仪灵敏度的因素有?  A、灯电流  火焰原子吸收光谱仪使用光源大都是空心阴极灯,空心阴极灯的灯电流大小决定着灯辐射强度。在一定范围内增大灯电流可以增大辐射强度,同时噪音也增大,但是仪器灵敏度降低。如果灯电流过大,会导致灯本身发生自蚀现象而缩短灯使用寿命;会放电不正常。相反,在

凝胶成像系统常见问题

1、是不是像素越高,产品就越好?      像素是要针对成像设备来看的,比如数码相机与CCD的像素就不具备可比性,其次CCD本身的质量比单纯的像素高低更重要。对于同级别CCDzui重要的指标是其大小,也就是CCD尺寸,尺寸越大其本身价值就成几何倍地增长。2、配件紫外反射灯源的主要用途为何?     

电子地磅常见问题排除

一、电子地磅(如地磅、汽车衡等)出现跳数或不稳定时,请检查接线盒是否泡水,进水,受潮。二、电子地磅称重不准,有角差:这种现象往往是出现误差的秤台面地下感应器线路跑偏,倾斜导致,或有杂物侵扰进秤体,使其顶住了秤体钢板,从而导致了坍塌,甚至有更甚的,两边碰装螺丝跟墙壁完全顶住也有发生,这往往是使用过于暴

旋光仪常见问题

1、旋光仪主要应用在哪些行业?答:食品、化工、医药、香精香料等行业中都有广泛的应用。2、在选购旋光仪时应该注意哪些指标?答:准确度、重复性都是仪器最重要的指标,样品透过率这一指标可以反映仪器的灵敏度,一般样品透过率1%的都相对灵敏度比较高的。如果选购控温型旋光仪,那么控温精度就比较重要,如果控温精度

原子吸收常见问题处理

A、最好每次都做标准曲线,如果单次样品量比较多的话,在测试过程中还要加入标准点进行校正。B、如果每天有很多样品要测试,你就用QC来控制了,如果你控制的QC能过,那你也可以不用做标准曲线了。

定量PCR常见问题(一)

1.      定量PCR仪的开关机顺序是怎样的?    按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率。开机顺序:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验。关机顺序:确认实验已经结束后,首先关闭信号收集

PH计常见问题分析

常见问题及解决方案1.同一样品,两次测量的 pH值不一样?温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起 pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。2.同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?由于两台 pH计的校正条件不一样(如,不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一

PCR克隆常见问题分析

    1、克隆PCR产物的最优条件是什么?    最佳插入片段:载体比需实验确定。1:1(插入片段:载体)常为最佳比,摩尔数比1:8或8:1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶,插入片段共10ul。室温保温1小时,或4℃过夜。在

凝胶成像系统常见问题

凝胶成像系统,大家在使用过程中会遇到各种问题,下面巴玖就为您介绍一下凝胶成像系统常见问题。希望对大家有所帮助。凝胶成像系统常见问题:1、是不是像素越高,产品就越好?像素是要针对成像设备来看的,比如数码相机与CCD的像素就不具备可比性,其次CCD本身的质量比单纯的像素高低更重要。对于同级别CCD最重要

色谱耗材常见问题(五)

 1、如何清洗分流平板(镀金密封垫)A.在溶剂中超声清洗,烘干;B.用非氯硅烷化试剂去活化:HMDS(六甲基二硅烷)或BSTFA(N,O双(三甲基硅烷基)或BSA(N,O-双(三甲基硅烷基)乙酰胺)或TSIM、TSIM(N-三甲基硅烷咪唑);C.用溶剂清洗,先惰性洗涤——甲苯,再用醇类清洗——甲醇,

箱式电炉的常见问题

  1、 电炉不加热:检查进电,和电炉内部保险  2、 有电压无电流:发热元件损坏  3、 温度不受控制:MAN手动指示灯是否亮(正常不亮)  4、 仪表显示END ,启动不了:表示运行结束,在运行要是仪表关机后在启动  5、 仪表显示nnn1 :热电偶损坏或者室温过低

原子吸收常见问题处理

1、校正曲线为何会发生弯曲呢?原子吸收常见问题处理  光吸收的最简式A=KC,只适用于理想状态均匀稀薄的蒸汽原子,随着吸收层中原子浓度的增加,上述简化关系就不应用了。  在高浓度下,分子不成比例地分解;相对于稳定的原子温度,较高浓度下给出的自由原子比率较低。  (1)由于有不被吸收的辐射、杂散光的存

QPCR常见问题及其分析

一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400

Ph常见问题汇总2

6.样品温度为 10℃,此时仪表显示的是 10℃还是 25℃下的 pH值?  酸度计显示的是溶液在当前温度下的 pH值,若在 10℃测量,仪表显示的是溶液 10℃的值,如果需要得到 25℃的 pH,必须把溶液温度升/降温至 25℃,再进行测量。酸度计的温度补偿指的是补偿温度对 pH电极的影响

水质试剂应用常见问题

预装管法(Test’N Tube)● 精确制备的试剂-以比色瓶或密封袋分装成一次实验的用量。 ● zui小的处理量和zui短的准备时间。 ● 更少依靠个人技术,减少人工配制试剂的误差,以提供精确和重现性好的结果。 ● 减少和避免使用危险化学试剂,例如 酸盐测定不需镉,氨氮测定不需汞等。 ● 在加盖的

ICPAES常见问题

  电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES),是以电感耦合等离子矩为激发光源的光谱分析方法,具有准确度高和精密度高、检出限低、测定快速、线性范围宽、可同时测定多种元素等优点,国外已广泛用于环境样品及岩石、矿物、金属等样品中数十种元素的测定。今天,我们为您带来ICP-AES分析常见12个故障问

QPCR常见问题及其分析

一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400

PH计电极常见问题

1、什么是pH指示电极?  对溶液中氢离子活度有响应,电极电位随之而变化的电极称为pH指示电极或pH测量电极。pH指示电极有氢电极、锑电极和玻璃电极等几种,但最常用的是玻璃电极。玻璃电极是有玻璃支杆,以及由特殊成份组成的对氢离子敏感的玻璃膜组成。玻璃膜一般呈球泡状,球泡内充入内参比溶液,插入内参比电

QPCR常见问题及其分析

一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓

pH计常见问题介绍

测量问题: 同一样品,两次测量的pH值不一样? 温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。测量问题: 同一样品,同时在两台pH计上测量,读数不一致 ? 由于两台pH计的校正条件不一样(如不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液

微量水分仪常见问题

 一、为什么滴定结果偏低?    这种情况是因为 滴定过早终止,相对漂移值可以适当降低,以继续反应剩余的水份。加样方式不合理,采用减量法进行加样,可以避免加样不完全带入的误差,尤其是附着力较强的样品。还有一种情况就是样品在溶液中不能溶解,形成乳浊液,此时可以更换阳极电解液,或者加入辅助溶剂增强电解液

TUNEL检测的常见问题

a. 有些细胞或组织,例如平滑肌细胞或组织,nuclease或polymerase的酶活性水平较高,易导致出现非特异性的荧光标记。解决方法是,取细胞或组织后立即固定并且要充分固定,以阻止这些酶导致假阳性。b. 使用了不适当的固定液,例如一些酸性固定液,导致出现假阳性。建议采用推荐的固定液。c. TU

PCR常见问题及回答

 PCR常见问题及回答 1. cDNA产量的很低 可能的原因:*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大,不应超过50μl 2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 *zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系

蛋白纯化常见问题总结

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了以下几个蛋白纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助

涂层测厚仪常见问题处理

1.仪器开机没反应怎么办?答:首先检查一下电池是否装反;或考虑电池是否没电,如排除电池问题后仍然无法开机,即需要与厂家。 2.正常开机,但测试没反应?答:首先排除是否校了空零位,重新校零即可正常操作(操作见第九章)。 3.为什么在随机附带的校准试片上校准后,测量工件还是出现测值“不准”?答:影响测值

石墨消解仪常见问题

    石墨消解仪采用石墨炉加热方式,硅酸盐隔热方式,具有消解快速、、节能、方便等优点,且独特的数字串口设计,可实现远程控制。已成功用于环保、化工、食品、医药、生化等行业样品前处理,同时可用于微波消解的预处理和赶酸处理,是原子吸收、原子荧光、ICP-AES等分析仪器的理想配套产品。    以下是

Western-Blot常见问题总结

  Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与或标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电

水平仪常见问题

  1 开关旋钮没旋转到底。  2 打开机壳,检查一下铜丝有没有脱焊。一般情况,上电池后有喇叭响声,而没有灯亮,就属于该种情况  3 电池盒——检查焊线有没有断,弹簧与电池是否接触良好。  4 测一下开关线路,看微动开关通不通电,若是通电代表开关没有问题,若是不通电,请更换微动开关。  5 线路主板

胸腔引流常见问题(一)

  1.放置胸腔引流管的适应症有哪些?     (1)气胸时的空气     (2)血胸时的血液     (3)胸膜腔渗出液,特别是恶性渗出液     (4)脓液     (5)开胸手术或心脏手术后     2.放置胸腔引流的操作者应具备什么样的资格和经验?     根据香港中文大学心胸