离子排阻色谱仪概述
离子排阻色谱仪是利用溶质和固定相之间的Donnan排斥、吸附和空间排阻作用而达到分离。一、分离模式:1、Donnan排斥:带负电荷的Donnan膜允许未离解的化合物通过,而不允许完全离解的化合物通过。2、吸附:保留时间与有机酸的烷基键的长度有关。通常烷基键越长,保留时间越长。3、空间排阻:有机酸的分子量大小和交换树脂的交联度有关。二、固定相:固定相通常是由总体磺化的聚乙烯和二乙烯基苯共聚物形成的高容量阳离子交换树脂。三、一元羧酸的分离:一元羧酸的分离主要由发生在固定相表面的Donnan排斥和吸附决定。由于Donnan排斥,完全离解的强电解质受排斥而不被固定相保留,而未离解的化合物不受Donnan排斥,能进入树脂的内微孔,分离是基于溶质和固定相之间的非离子性相互作用。四、二元和三元羧酸的分离:二元和三元羧酸的分离,空间排阻起主要作用,保留主要取决于样品分子的大小。五、应用:可用于无机弱酸和大量有机酸的分离,也可用于醇类和醛类的分离......阅读全文
排阻色谱法的原理
排阻色谱的分离机理是立体排阻,样品组分与固定相之间不存在相互作用的现象。色谱柱的填料是凝胶,它是一种表面惰性,含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质。凝胶的孔穴大小与被分离的试样大小相当。仅允许直径小于孔开度的组分分子进入,这些孔对于流动相分子来说是相当大的,以致流动相分子可以自由地扩散出人。对不同大
什么是排阻色谱法?
排阻色谱法(size exclusion chromatography,SEC)是一种根据试样分子的尺寸进行分离的色谱技术。又称为凝胶色谱法、分子排阻色谱法、尺寸排阻色谱法等,是液相色谱的一种。
Zenix-体积排阻色谱柱特点
Zenix 体积排阻色谱柱特点:● 3 μm粒径● 100、150、300 Å的孔径选择● 极高的分离效率和分辨率● 高容量● 在低和高盐浓度下有高稳定性● 批间重复性● 高的蛋白回收率而不破坏生物活性● 可忽略的非特异性反应● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒类生物分子能实现理想的分析和分离● 自
关于分子排阻色谱的介绍
SEC 是利用多肽分子大小、形状差异来分离纯化多肽物质,特别对一些较大的聚集态的分子更为方便,如人重组生长激素(hgH)的分离,不同结构、构型的GH 在SEC 柱上分离行为完全不同,从而可分离不同构型或在氨基酸序列上有微小差异的变异体,利用SEC 研究修饰化的PEG 的分离方法,此PEC 具有半
空间排阻色谱法介绍
空间排阻色谱法(Steric Exclusion Chromatography) 空间排阻色谱法以凝胶 (gel)为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶
排阻色谱法的原理
排阻色谱的分离机理是立体排阻,样品组分与固定相之间不存在相互作用的现象。色谱柱的填料是凝胶,它是一种表面惰性,含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质。凝胶的孔穴大小与被分离的试样大小相当。仅允许直径小于孔开度的组分分子进入,这些孔对于流动相分子来说是相当大的,以致流动相分子可以自由地扩散出人。对不同大
分子排阻色谱的原理简介
分子排阻色谱,有时又叫“尺寸排阻色谱”或“体积排阻色谱”,是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。 分子排阻色谱法的分离原理为分子筛机制,色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经过修饰的凝胶,如葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶等为填充剂,这些填充剂表面分布着不同孔径尺寸的孔。分子进入色谱柱后,它们中的不
离子色谱仪排气排太久会怎样
寿命缩短、仪器性能下降等。色谱仪排放的气体中含有有机溶剂、酸液蒸汽等物质,这些物质会与色谱柱表面产生氧化作用。如果离子色谱仪排气排太久,就会导致离子色谱仪寿命变短、仪器性能下降等问题。避免过长时间的排放,尽可能将排气控制在必要的范围内,以减少对仪器的长时间暴露。
离子交换色谱仪概述
20世纪40年代初,离子交换色谱仪用于稀土元素和裂变产物的分离,对原子能工业的发展起了重要作用。近年来随着液相色谱仪技术的飞速发展和各种新型离子交换材料的出现,离子交换色谱仪获得了很大发展。一、基本原理:组分在离子交换色谱仪固定相上发生反复离子交换反应,组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电
离子对色谱仪概述
离子对色谱仪将一种或多种与溶质离子电荷相反的离子(对离子或反离子)加到流动相中,使其与溶质离子结合形成疏水性离子对化合物,使其能够在两相之间进行分配,从而实现分离。一、固定相:固定相为疏水性填料,可采用苯乙烯、二乙烯苯树脂和十八烷基硅胶等。二、流动相:流动相由含有对离子试剂和含适量有机溶剂的水溶液组
离子对色谱仪概述
离子对色谱仪是离子对萃取技术与色谱技术相结合的产物,首先在20世纪70年代中期出现,后来发展十分迅速,是分离强极性有机酸和有机碱的极好方法。一、基本原理:将一种或数种与样品离子电荷相反的离子(称为对离子或反离子)加入到离子对色谱仪的流动相中,使其与样品离子结合生成弱极性的离子对(中性缔合物),从而控
离子交换色谱仪概述
20世纪40年代初,离子交换色谱仪用于稀土元素和裂变产物的分离,对原子能工业的发展起了重要作用。近年来随着高效液相色谱仪技术的飞速发展和各种新型离子交换材料的出现,离子交换色谱仪获得了很大发展。一、基本原理:组分在离子交换色谱仪固定相上发生反复离子交换反应,组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径
空间排阻色谱法的简介
空间排阻色谱法以凝胶 (gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及
分子排阻色谱法的简介
分子排阻色谱法又称凝胶色谱法,它是按照分子尺寸大小顺序进行分离的一种色谱方法。分子排阻色谱法的固定相凝胶是一种多孔性的聚合材料,有一定的形状和稳定性,利用分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异而完成分离。根据所用流动相的不同,凝胶色谱法可以分为两类:即用水溶剂做流动相的凝胶过滤色谱法(GF
全新Phenomenex-Yarra体积排阻色谱柱
2012年6月5日,全球色谱科技领域的领导者----Phenomenex公司发布了一新产品Yarra™-----用于分析生物样品的体积排阻法色谱柱(SEC),Yarra对生物样品的分离较其他同类色谱柱相比提高了70%的柱效。Yarra色谱柱有三种3µm粒径的固定相可供选择,不但非常适合用于分解各
空间排阻色谱法的详解
空间排阻色谱法以凝胶(gel)为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流
分子排阻高效液相层析实验
基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
分子排阻色谱相关内容
分子排阻色谱法又称空间排阻色谱法(SEC)是利用多孔凝胶固定相的独特性产生的一种,主要根据凝胶孔隙的孔径大小与高分子样品分子的线团尺寸间的相对关系而对溶质进行分离的分析的方法。分子排阻色谱又叫凝胶色谱法。 分子排阻色谱法是根据分子大小进行分离的一种 液相色谱技术。分子排阻色谱法的 分离原理为
分子排阻色谱法的介绍
分子排阻色谱法又称空间排阻色谱法(SEC)是利用多孔凝胶固定相的独特性产生的一种,主要根据凝胶孔隙的孔径大小与高分子样品分子的线团尺寸间的相对关系而对溶质进行分离的分析的方法。分子排阻色谱又叫凝胶色谱法。
尺寸排阻色谱法的定义
基于分子尺寸不同的分析物在化学惰性的多孔固定相的孔隙中保留作用的差异实现分离的一种色谱技术。
分子排阻高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SE缓冲液仪器、耗材 层析柱实验步骤 1. 用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂,流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2. 注射100 μl 缓冲液进行一次空白样品的假层析,检测器
分子排阻高效液相层析实验
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SE缓冲液仪器、耗材层析柱实验步骤1. 用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂,流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2. 注射100 μl 缓冲液进行一次空白样品的假层析,检测器设定在210
离子排阻色谱的紫外—可见光度检测器的应用介绍
紫外—可见光度检测器(以下简称光度检测器)在离子色谱中的应用越来越受重视。这是由于它具有以下优点: 1、选择性好。仅需变更入射光的波长,即可有选择性地进行检测。 · 2、通用性好。除可以直接测定许多有吸收光谱的物质外,还可用间接光度法和柱后反应法分析许多不吸收紫外线或可见光的离子。 3、敏
尺寸排阻色谱法的固定相
尺寸排阻色谱常用固定相有无机和有机两大类。 无机凝胶:又称硬质凝胶。是具有一定孔径范围的多孔性凝胶,如多孔硅胶、多孔玻璃珠等,此类凝胶化学惰性、稳定性及机械强度均好,耐高温,使用寿命长,但装柱时易碎,不易装紧,柱效较低。 有机凝胶:又称半硬质凝胶。如苯乙烯二乙烯苯交联共聚物凝胶,能耐较高压力
尺寸排阻色谱法的分离原理
一. 分离原理 尺寸排阻色谱法:是按分子尺寸的差异进行分离的一种液相色谱方法,也称凝胶色谱法。 排阻色谱的固定相多为凝胶。凝胶是一种由有机分子制成的分子筛 , 其表面惰性 , 含有许多不同大小孔穴或立体网状结构。凝胶的孔穴大小与被分离组分大小相当 , 对不同大小的组分分子则可分别渗到凝胶
关于空间排阻色谱法的介绍
空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔
关于体积排阻色谱的固定项介绍
体积排阻色谱所用的填料习惯上称为凝胶。填料的分类有两种方法,一是按机械强度,如软性、刚性、半刚性。二是按材料来分,又分为有机胶与无机胶两大类。因此就出现了有机硬胶和有机软胶的概念。 由于分离机理单纯,溶剂只是溶解样品,因此填料的发展过程就是排阻色谱的发展过程。从1955年淀粉开始,先后研制的填
尺寸排阻色谱柱的清洗流程
尺寸排阻色谱柱包括分子量测定范围不同的5种规格的色谱柱,可以将适合样品分子量和分子量分布的不同级别的色谱柱串联起来进行分析。尺寸排阻色谱柱通过优化填料的粒径和细孔容积,实现了色谱柱性能的提升,和色谱柱操作压强的降低。特别是对单克隆抗体三聚体/二聚体/单体的分离性能有很大的提高,对单体/片段也有很好的
关于体积排阻色谱的流动相介绍
流动相的作用仅仅在于溶解样品,不控制分离度。选择的原则是低黏度,不损害柱填料。和键合相色谱不同,要根据填料的性质选用溶剂,特别是新填料,厂家往往提供可选溶剂的范围。常用的溶剂有己烷、四氢呋喃、二氯甲烷、二嗯烷、环己烷、二氯乙烷、氯仿、三氯乙烷、四氯化碳、苯、甲苯、乙苯、N,N一二甲基甲酰胺、水、
空间排阻色谱法的分离原理
空间排阻(Steric Exclusion Chromatography)空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动