分子排阻高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SE缓冲液仪器、耗材 层析柱实验步骤 1. 用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂，流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2. 注射100 μl 缓冲液进行一次空白样品的假层析，检测器设定在210~220 nm，0.1~1.0 AUFS。适宜的设定一般是：100 pmol 时为0.1AUFS，500 pmol 时0.3，1 nmol 时0.5，2 nmol 时1.0 ；作图速度为0.5 cm/min。3. 在2 000 g 离心蛋白标准或蛋白混合物5 min 注射100 μl 上清，并重复步骤2操作。收集每个层析峰于不同的聚丙烯管子，并确定峰的洗脱体积。4. 各分部组分脱盐，并用Speedvac蒸发器除去溶剂。 5. 最后一个洗脱峰的保......阅读全文
分子排阻高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SE缓冲液仪器、耗材 层析柱实验步骤 1. 用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂，流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2. 注射100 μl 缓冲液进行一次空白样品的假层析，检测器
分子排阻高效液相层析实验
基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
分子排阻高效液相层析实验
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SE缓冲液仪器、耗材层析柱实验步骤1. 用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂，流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2. 注射100 μl 缓冲液进行一次空白样品的假层析，检测器设定在210
高效排阻液相色谱
实验材料 nrhTNF 试剂、试剂盒 氯化钠 PB 仪器、耗材
高效排阻液相色谱
高效排阻液相色谱又叫体积排阻色谱（ SEC），分子筛色谱，凝胶过滤等，生化界常用凝胶过滤。SEC是一种纯粹按照溶质分子在流动相溶剂中的体积大小分离的色谱法，填料具有一定范围的孔尺寸，大分子进不去而先流出色谱柱，小分子后流出。用于生物大分子分离的传统SEC填料主要是多糖聚合物软胶，只能在低压下作慢速分
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱（High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC）又叫高压、高速、近代液相色谱，通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法，到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面，现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
反相高效液相层析实验
多肽和蛋白质的分离 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
反相高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材 层析柱HPLC进样器实验步骤 1. 用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂，梯度从100%有机溶剂到100%水，流速1 ml/min，持续15 min 以上。 2. 以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用1
关于高效液相色谱的空间排阻的介绍
空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用，但凝胶的孔径比分子筛要大得多，一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离，而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后，随流动相在凝胶外部间隙以及孔
离子交换高效液相层析实验
阴离子交换HPLC 阳离子交换HPLC 实验材料 蛋白质 试剂、
离子交换高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 Tris·ClNaCl磷酸钠缓冲液仪器、耗材 交换柱实验步骤 1. 在使用IEX柱前，依次以序列溶液洗柱去除柱上吸附的蛋白质：10倍柱床的已脱气水和10倍柱床的高盐缓冲液，对聚合体IEX柱，洗柱液在8 ~10，对硅胶类柱，洗柱液pH在7~8。2. 在室温平衡IE
高效液相层析法
高效液相层析法（HPLC）是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上，引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高，可在室温下进行，应用范围极广，无论是极性还是非极性，小分子还是大分子，热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋白质
高效液相层析的特点
高压液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～3.5万KPa。高速流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于 1h 。高效近来研究
高效液相层析的概述
70年代新发展的层析法。其特点是：用高压输液泵，压强最高可达5000psi（相当于34个标准大气压）。用直径约3～10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1～2微米的二氧化硅，经硫酰氯反应生成Si—Cl，进一步连接疏水的烷基，如Si—C18H37，或阳离子交换基团
高效液相层析法简介
高效液相层析（HPLC）在经典液相层析法基础上，引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点，对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和类脂等尤其有利，根据流动相和固定相相对极性，高效液相色谱分析可分为正相和反相两种。
高效液相层析法生化检验
高效液相层析法是生化检验考试复习需要了解的知识，医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。 高效液相层析（HPLC）在经典液相层析法基础上，引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点，对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类
高效液相层析的相关介绍
高效液相层析（又名高压液相色谱），70年代新发展的层析法。其特点是：用高压输液泵，压强最高可达5000psi（相当于34个标准大气压）。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达3.5万KPa）；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填
高效液相层析的特点介绍
高压 液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～3.5万KPa。 高速 流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于 1h
高效液相层析的技术特点
高压液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～3.5万KPa。高速流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于 1h 。高效近来研究
高效液相层析的结构组成
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、．分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。 1．进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。2．输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l
高效液相层析技术介绍
70年代新发展的层析法。其特点是：用高压输液泵，压强最高可达5000psi（相当于34个标准大气压）。用直径约3～10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1～2微米的二氧化硅，经硫酰氯反应生成Si—Cl，进一步连接疏水的烷基，如Si—C18H37，或阳离子交换基团—S
高效液相层析法的特点
高压液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～3.5万KPa。高速流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于 1h 。高效近来研究
高效液相层析操作注意要点
1)首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。 2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3)正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直
高效液相层析的技术特点
高效液相层析（又名高压液相色谱），70年代新发展的层析法。其特点是：用高压输液泵，压强最高可达5000psi（相当于34个标准大气压）。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达3.5万KPa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而
高效液相层析法生化检验
高效液相层析法是生化检验考试复习需要了解的知识，医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。高效液相层析（HPLC）在经典液相层析法基础上，引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点，对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和
薄层层析，高效液相层析各有什么特点
纸层析：英文为thin layer chromatography 又称薄层色谱,色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品（几到几微克,甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又
分子排阻色谱探究竟
分子排阻色谱，有时又叫“尺寸排阻色谱”或“体积排阻色谱”，是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。 分子排阻色谱法的分离原理为分子筛机制，色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经过修饰的凝胶，如葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶等为填充剂，这些填充剂表面分布着不同孔径尺寸的孔。分子进入色谱柱后，它们中
分子排阻色谱探究竟
分子排阻色谱，有时又叫“尺寸排阻色谱”或“体积排阻色谱”，是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。 分子排阻色谱法的分离原理为分子筛机制，色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经过修饰的凝胶，如葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶等为填充剂，这些填充剂表面分布着不同孔径尺寸的孔。分子进入色谱柱后，它们中
常见色层分析高效液相层析
高效液相层析（又名高压液相色谱）70年代新发展的层析法。其特点是：用高压输液泵，压强最高可达5000psi（相当于34个标准大气压）。用直径约3～10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1～2微米的二氧化硅，经硫酰氯反应生成Si—Cl，进一步连接疏水的烷基，如Si—C
高效液相层析的输液系统介绍
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X107Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的