ELISA方法学
ELISA方法用于杂交瘤和噬菌体展示筛选是最为广泛的高通量的抗体发现的筛选方法，其实质是亲和力测定方法的一种变种，其目的是需要建立ELISA信号值和样品亲和力大小之间的正相关性。相对于采用ELISA进行抗体的亲和力测定方法，用于杂交瘤和噬菌体展示筛选的ELISA方法有以下难点：待测样本极具多样性，且单一样品通常也是混合物，有很大的可能存在非特异吸附；2. 不同的待测样品之间可能存在较大的浓度差异，浓度的大小和亲和力的大小均会对检测结果产生影响。在进行杂交瘤和噬菌体展示筛选方法开发时，需要选择合适的条件使信号值主要能够表征亲和力的大小而一定程度上忽略浓度差异造成的影响。本文是ELISA定量测定方法开发和亲和力测定方法开发的进阶版本，配体受体反应的基本原理解析，和两种应用的差异性区分是进行ELISA筛选方法的开发的基础。 Part 2 - 原理解析 - ELISA信号值和亲和力大小......阅读全文
免疫学测定方法学评价
免疫测定法几乎可以用于所有细胞因子的检测。优点：①特异性高，使用特异的单克隆抗体，可用于单一细胞因子的检测;②影响因素相对较少且容易控制，重复性好，方法容易标准化；③操作简便、快速，无需依赖细胞株，故不需维持培养，可操作性增加，容易推广和便于普查。缺点：①所测定的只是细胞因子的蛋白含量，与其生物活性
化学发光与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物方法学比较
病毒性肝炎中乙型肝炎的危害较大，我国又为乙肝的高发区，约占世界HBV感染者的一半。乙肝病毒的病原体不仅具有传染性，还可能导致发展成肝硬化，甚至肝癌，所以HBV标记物的早期、准确、定量检测对乙肝临床诊断、疗效观察及预防具有重要意义。目前国内检测HBV-M使用较多的仍是占主导地位的ELISA法。随着
粪便检验化学检验方法学评价
(1)化学法：操作简单易行，但缺乏特异性和准确性。①动物性食品可使隐血试验出现假阳性；大量生食蔬菜也可使结果出现假阳性。②如服用大量维生素C可出现假阴性。血液在肠道中停留过久，血红蛋白被细菌降解也会导致假阴性等。因此，采用此类方法检验隐血前，要求患者素食3d，并且不要服用维生素C等还原性的药物。(2
生物学活性测定方法学评价
用于细胞因子生物学活性测定，对细胞因子前体或其降解产物与可溶性受体结合的细胞因子、细胞因子聚合物等，均不能用此法检测。细胞因子受体拮抗物、细胞因子的天然抗体和类细胞因子等，也将干扰细胞因子活性的测定。细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点：①操作繁琐；②易受干扰；③敏感性较高；④特异性不高。
《自然—方法学》年度方法：单细胞测序
2014年1月《自然—方法学》(Nature Methods)上发表年度特别报道，将“单细胞测序”(Singled out for sequencing)的应用列为2013年度最重要的方法学进展。 近几年来，基于单细胞测序技术的科学研究取得了突飞猛进的发展，其成果有望为一些重
红细胞沉降率的方法学评价
血沉测定的方法有多种，有魏氏法（Westergren法）、库氏法（Coulter法、）、温氏法（Wintobe-landsbrey法）、潘氏法。其差别在于抗凝剂、用血量、血沉管、观察时间以及记录结果方面不同。库氏法每5分钟记录一海外侨胞结果，它除获得1小时沉降结果外，还可以看到这段时间内沉降曲线
便隐血试验的方法学分类
按实验方法学分为：a、免疫法（以金标层析法为代表）；b、化学法（以匹拉米洞法为代表）；c、免疫a+化学b为双联法（也称序贯法）。另有查卟啉铁及卟啉衍生物，该实验优点是可以定量，缺点是需要特殊的检测设备及成本过高。目前国外已开发出了全自动或半自动OB检测仪，不足之处在于成本太高。
钾钠氯测定的方法学评价
钾、钠的测定方法：火焰光度法、离子选择电极法、冠醚法（化学测定法）和酶法。氯的测定方法：离子选择电极法、硫氰酸汞比色法、硝酸汞滴定法和电量分析法（库仑滴定法）。（1）火焰光度法：原理：火焰光度法是一种发射光谱分析法，利用火焰中激发态原子回降至基态时发射的光谱强度进行含量分析。该方法属于经典的标准参考
尿胆原定性测定（干法学法）
1. 实验原理试带有两种，一种是以Ehrlich醛反应为基础的快速检验试带，另一种是利用尿胆原与重氮化合物的耦联反应，根据产生红色的深浅判断尿胆原含量。既可以定性，也可以定量。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求
脑脊液蛋白质的方法学评价
分类方法优点缺点定性法Pandy试验操作简便，标本量少，易于观察，灵敏度高假阳性率高Ross-Jone试验检测球蛋白，特异性高灵敏度低Nonne-Apelt试验检测球蛋白和清蛋白，特异性高操作繁琐定量法比浊法操作简便、快速，无需特殊仪器标本用量大，重复性差，影响因素多染料结合比色法操作快速，灵敏度高
尿液酸碱度测定（干法学法）
1. 实验原理干化学试带的测试模板区含有甲基红（PH4.6-6.2）和溴麝香草酚蓝（PH6.0-7.6），两种酸碱指示剂适量配合可测试尿液酸碱度。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：以清晨第一次尿为宜，急诊患者可随时留取。2.2 标本种类：新鲜尿液2.3 标本要求：采集患者尿液标本时，盛尿液的
白细胞分类计数的方法学评价
1、显微镜分类法能准确地根据细胞形态特征进行分类，并可发现细胞形态及染色有无异常，是白细胞分类计数参考方法，但耗时、精确性和重复性较差。 2、血液分析仪分类法有三分群和五分类两法，速度快、准确性高、易于标准化、能提示异常结果、结果以数据、图形、文字等多种形式展示，是白细胞分类和筛检首选方法，但
矿区生态修复方法学获批备案
日前，记者从北京环境交易所和大自然保护协会获悉，由他们联合编制的《小规模非煤矿区生态修复方法学》获国家发展改革委正式批准备案，在中国自愿减排交易信息平台上公布。 该方法学为矿区生态修复碳汇项目开发及市场化生态补偿机制建设提供了关键技术支撑。与国内已有的造林和草地管理方法学相比，这个以生态补偿和
微量元素检测的方法学分析
准确检测微量元素在人体中的含量是任何理论研究与临床应用的前提和基础，如果没有准确地检测，根本谈不上研究与应用。虽然从20世纪70年代就开始了微量元素研究，但它毕竟是一个新兴学科，检测微量元素的手段还比较陈旧和落后，无论从采样到测试前处理到测试直到结果分析都需专业人士来操作，步骤相当复杂，污染严重，且
《自然—方法学》特写：无需标记的激光特技
哈佛大学的Brian Saar，Gary Holtom和谢晓亮教授（从左至右）发展了非线性显微成像技术和应用。 一个富含蛋白质的毛发及其周围的富含脂肪的皮脂腺。该图像是通过受激拉曼散射方法采集的，绿色为脂肪，蓝色为蛋白质。 最近出版的《自然—方法学》刊登特写文章——《无需标记的激光
《自然·方法学》：新方法探测朊病毒
朊病毒是大脑中一种传染性蛋白质病毒，能导致牛出现疯牛病、羊患上痒病、人患上克雅氏病。在7月的《自然·方法学》杂志网络版上，美国健康研究院慢性病毒疾病实验室的研究人员发明了一种非常敏锐而快速探测传染性朊病毒蛋白质的新方法。 为了设计出有效的朊病毒探测方法，研究人员利用了这样一个事实，即朊病毒能将某
大乳粒检测的分析方法学探究
大乳粒检测的分析方法学探究小编在研究大乳粒的时候，发现有几篇好的文章。感觉这些文章可以分享给大家，各位可以根据内容，自行参考哦！！在实际的注册申报和研发资料数据整理中，分析方法验证不完善是常见的问题。造成不完善的有两个主要原因：一是研发分析人员对仪器原理（测量原理）和方法不熟悉，不知道怎么做；二是相
中法学者追忆数学天才伽罗瓦
“伽罗瓦虽然英年早逝，但却照亮了数学界一个不为人知的隐秘天地。”近日，在中科院武汉物理与数学研究所举办的中法交流学术沙龙上，来自法国图卢兹大学数学学院的让-皮埃尔·米斯教授在介绍法国天才数学家埃瓦里斯特·伽罗瓦时表示。 1811年，伽罗瓦出生在法国巴黎附近的拉赖因堡。1832年，这位未
敲降斑马鱼基因的方法学比较
一、基因敲降的前期准备工作相同1.1 生物信息学分析目标基因在斑马鱼早期胚胎发送过程中是否有表达。1.2 收集斑马鱼早期发育胚胎（通常为48 hpf前的胚胎），提取总RNA，然后进行体外转录（RT）。1.3 设计检测目标基因表达的PCR引物，以1.2获得的cDNA为模板，进行PCR扩增，确认目标基因
嗜碱性粒细胞计数的方法学评价
嗜碱性粒细胞数量很少，通常仅占白细胞的1/200～1/300。在一般白细胞分类计数中很难见到。自1953年Moore首次报告直接计数法以后对嗜碱性粒细胞在外周血变化的临床意义才逐渐了解。目前常用方法有两种。即甲苯胺痔支（Cooper法）和中性红法（shelley法）。 此二种方法操作步骤完全相
《自然方法学》：可视蛋白质组学
瑞士联邦技术学院的研究人员开发出一种在问号钩端螺旋体(Leptospira interrogans)这种病原体中定位蛋白复合物的新方法，称为“可视蛋白质组学”。文章发表在本期的《自然-方法学》上。 活细胞中的生化进程分为多个功能单元，它们在细胞内有着特定的时间和空间分布。一般来说，这些单元
网织红细胞计数的方法学评价
1、普通光学显微镜法：试管法操作简便、重复性较好。玻片法取血量少、染色时水分易蒸发，造成结果偏低。但显微镜法受主观因素影响较多，且耗时费力。 2、网织细胞计数仪法：可客观地将Ret分成高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）三类，有助于化疗
敲降斑马鱼基因的方法学比较
一、基因敲降的前期准备工作相同 1.1 生物信息学分析目标基因在斑马鱼早期胚胎发送过程中是否有表达。 1.2 收集斑马鱼早期发育胚胎（通常为48 hpf前的胚胎），提取总RNA，然后进行体外转录（RT）。 1.3 设计检测目标基因表达的PCR引物，以1.2获得的cDNA为模板，
微量元素检测的方法学分析
微量元素尤其是血铅水平与人体健康的关系，日益受到广大患者和医学工作者的普通关注。准确、方便检测，为临床诊疗提供指导是检测医师的职责所在。目前能进行微量元素检测的方法较多，原子吸收分光光度计（Atomic Absorption Spectrophotometer）是精密的分析仪器，刚开始在检验医学普
微量元素检测的方法学分析
微量元素尤其是血铅水平与人体健康的关系，日益受到广大患者和医学工作者的普通关注。准确、方便检测，为临床诊疗提供指导是检测医师的职责所在。目前能进行微量元素检测的方法较多，原子吸收分光光度计（Atomic Absorption Spectrophotometer）是精密的分析仪器，刚开始在检验医学普及
敲降斑马鱼基因的方法学比较
一、基因敲降的前期准备工作相同 1.1 生物信息学分析目标基因在斑马鱼早期胚胎发送过程中是否有表达。 1.2 收集斑马鱼早期发育胚胎（通常为48 hpf前的胚胎），提取总RNA，然后进行体外转录（RT）。 1.3 设计检测目标基因表达的PCR引物，以1.2获得的cDNA为模板，
微量元素检测的方法学分析
微量元素尤其是血铅水平与人体健康的关系，日益受到广大患者和医学工作者的普通关注。准确、方便检测，为临床诊疗提供指导是检测医师的职责所在。目前能进行微量元素检测的方法较多，原子吸收分光光度计（Atomic Absorption Spectrophotometer）是精密的分析仪器，刚开始在检验医学普及
免疫测定法方法学评价
免疫测定法几乎可以用于所有细胞因子的检测。优点：①特异性高，使用特异的单克隆抗体，可用于单一细胞因子的检测；②操作简便、快速，无需依赖细胞株，故不需维持培养，可操作性增加，容易推广和便于普查；③影响因素相对较少且容易控制，重复性好，方法容易标准化。缺点：①所测定的只是细胞因子的蛋白含量，与其生物活性
APTT的方法学评价与参考值
［方法学评价］ APTT测因所用的激活剂不同以及部分凝血活酶来类推制备的不同，均影响测定的结果。因此本试验的准确性首先取决于部分凝血活酶试剂的质量，常用的激活剂的有白陶土，此时APTT又称为KPTT不觉可用硅藻土等。即使是同一种激活剂，其质量也可有很大不同。APTT最禄是用玻璃试管激活接触因子，
尿液有形成分检测的方法学评价
1.显微镜检查：目前，尿沉渣检查虽可用尿沉渣分析仪进行定性或定量检查。但迄今为止，仍无任何一种仪器可以完全代替显微镜检查，尿沉渣显微镜检查仍然是一种方法简便、价廉、结果最可靠的检查方法，尿沉渣显微镜检查同时也是最重要参考方法。 （1）直接镜检法：简便但阳性率低，重复性差，易漏诊。仅适用于急诊有