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这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体（NC、PVDF膜），并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。材料（MATERIALS）：o 试剂（REAGENTS）1.0 M Tris-Hcl（PH6.8）1.5 M Tris-HCl（PH8.8）10% AP（不要配太多）10% SDS30% Acr20% Tween2010 mM PMSF0.2 M NaH2PO40.2 M Na2HPO4TBST转移膜化学发光试剂转移缓冲液（TB buffer）电泳缓冲液（EB buffer）PBS缓冲液10×丽春红染液封闭液（5% 脱脂牛奶）滤纸SDS 上样缓冲液实验前准备：裂解液中加入终浓度为1 mM的PMSF，离心机预冷，PBS预冷，TB buffer 4℃预冷器械......阅读全文
摘要：本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述，Western印迹法是利用抗原抗体的免疫反应，先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来，然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体（NC膜）上，然后再加抗体形成抗原抗体复合物，利用发光或显色原理将结果显示到膜或底片