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Westernbloting综述

摘要:本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述,Western印迹法是利用抗原抗体的免疫反应,先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来,然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体(NC膜)上,然后再加抗体形成抗原抗体复合物,利用发光或显色原理将结果显示到膜或底片上。同时对Western bloting在实际操作中应注意的细节问题进行了归纳以及与其它免疫技术就抗体检测方面进行了比较。关键词:Western bloting;免疫;转膜;显色;抗体印迹法(bloting)是指将样品转移到固相载体上,而后利用相应的探测反应来检测样品的一种方法。1975年,Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜(NC)上,并利用DNA-RNA杂交检测特定的DNA片段的方法,称为Southern印迹法。而后人们用类似的方法,对RNA和蛋白质进行印迹分析,对RNA的印迹分析称为Northern印迹法,对单向电泳......阅读全文

Western bloting 综述

摘要:本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述,Western印迹法是利用抗原抗体的免疫反应,先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来,然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体(NC膜)上,然后再加抗体形成抗原抗体复合物,利用发光或显色原理将结果显示到膜或底片

Western bloting 技术

一、实验目的与原理Western bloting技术是用来检测蛋白表达的特定的灵敏的方法,由蛋白质的SDS-PAGE、电转及杂交几部分组成。杂交技术主要有NC膜封闭,靶蛋白与第一抗体的反应,结合靶蛋白的一抗和二抗的反应,显色等组成。将凝胶上的蛋白质转移到NC膜上,用其他蛋白作为封闭液,将膜上余下的其

免疫印迹Western bloting实验原理

这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。材料(MATERIALS):o  试剂(REAGEN

免疫印迹Western bloting实验原理

  免疫印迹Western bloting    这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。

丙二醛TBARS定量分析的产品

丙二醛TBARS定量分析的产品除了TBARS分析,针对MDA的检测,Cell Biolabs还提供了比OxiSelect™ TBARS更直接的定量MDA的脂质过氧化检测方案,即OxiSelect™ MDA Assays(货号:STA-331/STA-332)。该MDA分析试剂采用免疫学方法(包括EL

Western Blotting

实验概要Western Blot (AP)主要试剂1. Membrane Blocking buffer:5% Milk   0.05% of Tween 20 PBS2. antibody dilution buffer: PBS 0.05% of Tween20 1.0% Milk(or BSA

Western杂交

Western杂交l      组织印迹的Western杂交在硝酸纤维素膜上制备组织印迹1.在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸,在滤纸上方放上一张普通纸,然后铺上一层硝酸纤维素膜。2.用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片(厚度约为1mm)。如果组织表面是湿的,则在Kimwipes纸上

Western杂交

实验概要本实验介绍了Western杂交的基本流程。主要试剂液氮,提取缓冲液(1 x PBS,10ug/mL  Leupeptin,1 mM PMSF,5 mMBenzamidine. 2mM EDTA),转移缓冲液(39mM Glycine,48mM  Tris,0.037% SDS,20%甲醇),

Western 杂交

Western 杂交(主要内容如下)Preparing of Protein LysatesWestern BlottingFar Western BlottingSemi Dry BlottingStripping MembranesTrouble Shooting and OthersPrepa

Western Blotting

1. Optional: "Renature" gel- this is thought to permit some refolding of proteins and may be important in finding epitope recognition of monoclonal an