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免疫印迹Westernbloting实验原理

免疫印迹Western bloting 这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。 材料(MATERIALS) o 试剂(REAGENTS) 1.0 M Tris-Hcl(PH6.8) 1.5 M Tris-HCl(PH8.8) 10% AP(不要配太多) 10% SDS 30% Acr 20% Tween20 10 mM PMSF 0.2 M NaH2PO4 0.2 M Na2HPO4 TBST 转移膜 化学发光试剂 转移缓冲液(TB buffer) 电泳缓冲液(EB buffer) PBS缓冲液 10×......阅读全文

免疫印迹Western bloting实验原理

  免疫印迹Western bloting    这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。

免疫印迹Western bloting实验原理

这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体(NC、PVDF膜),并以特异性抗体作为探针检测之。抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行定性、分析。材料(MATERIALS):o  试剂(REAGEN

Western免疫印迹(Western Blot)实验原理和主要试剂

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。实验原理与Southern或 Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电

Western 免疫印迹实验原理和操作步骤

[实验原理]Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶

Western免疫印迹的原理

  与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物

Western bloting 技术

一、实验目的与原理Western bloting技术是用来检测蛋白表达的特定的灵敏的方法,由蛋白质的SDS-PAGE、电转及杂交几部分组成。杂交技术主要有NC膜封闭,靶蛋白与第一抗体的反应,结合靶蛋白的一抗和二抗的反应,显色等组成。将凝胶上的蛋白质转移到NC膜上,用其他蛋白作为封闭液,将膜上余下的其

Western bloting 综述

摘要:本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述,Western印迹法是利用抗原抗体的免疫反应,先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来,然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体(NC膜)上,然后再加抗体形成抗原抗体复合物,利用发光或显色原理将结果显示到膜或底片

Western免疫印迹

 Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理    与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝

Western 免疫印迹

实验概要Western免疫印迹(Western   Blotting)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似,但Western   Blot采用的是聚丙烯

免疫印迹(Western blotting)实验原理、试剂和操作步骤

(一)原理Western blot是一种在PVDF或硝酸纤维素(NC)膜上进行的抗原抗体反应。蛋白电泳后,将蛋白转移至膜上,再与特异性抗体孵育,洗去游离的抗体,然后和酶标记的二抗孵育,再进行底物显色。由于抗原抗体反应特异性好,亲合力高,Western blot检测的灵敏度较高,尤其是采用