冷冻电镜捕获人副流感病毒影像或助力抗病毒药物开发
2月18日美国科研团队首次绘制出副粘病毒一个关键酶的3D原子结构,可帮助开发包括抗冠状病毒药物在内的抗病毒药物。研究成果日前发表在《美国科学院学报》上。 副粘病毒是包括麻疹、腮腺炎、人副流感病毒和呼吸道合胞体病毒等常见病原体的一类病毒。由于同为RNA(核糖核酸)病毒,副粘病毒与冠状病毒作用机理相似。酶在RNA分子组装中发挥重要作用,经常成为抗病毒药物的靶点。 美国西北大学研究人员使用冷冻电子显微镜技术深入分子内部观察,捕获了人副流感病毒5聚合酶的数十万张2D影像,并使用计算机算法重建了这种酶的3D原子结构。 研究发现,这种酶是一个不规则球体,带有一个由4个磷蛋白组成的长尾。研究还发现,这种病毒利用同一种蛋白质实现基因组复制和转录。 美国西北大学分子生物科学教授罗伯特·兰姆说,传统开发药物的方法有点“碰运气”,寄望候选药物能打中靶点。而阐明了病毒关键酶的3D原子结构,有望在设计药物时做到有的放矢,“我们需要更多的抗病毒......阅读全文
冷冻电镜捕获人副流感病毒影像-或助力抗病毒药物开发
2月18日美国科研团队首次绘制出副粘病毒一个关键酶的3D原子结构,可帮助开发包括抗冠状病毒药物在内的抗病毒药物。研究成果日前发表在《美国科学院学报》上。 副粘病毒是包括麻疹、腮腺炎、人副流感病毒和呼吸道合胞体病毒等常见病原体的一类病毒。由于同为RNA(核糖核酸)病毒,副粘病毒与冠状病毒作用机理
副流感病毒抗体的介绍
副流感病毒(parainluenza virus,PIV)是主要引起婴幼儿和儿童上呼吸道感染和严重的下呼吸道感染的重要病原。其结构为单负链RNA病毒,有囊膜,囊膜上有两种刺突,即HN蛋白和F蛋白。HN蛋白具有血凝和神经氨酸酶活性,F蛋白与呼吸道合胞病毒相似,介导病毒的包膜和宿主的细胞膜融合。
冷冻电镜样品冷冻
样品冷冻样品冷冻其实是科学家们很早就想到的思路,但是冷冻之后样品中水分子形成冰晶,不仅产生强烈电子衍射掩盖样品信号,还会改变样品结构。直到1974年,Kenneth A. Taylor和Robert M. Glaeser在-120℃观察含水生物样品时未发现冰晶形成,而且发现冷冻样品能够耐受更大剂量和
冷冻电镜
说起冷冻电镜,小编想不管是研究生还是教授大咖,可能和科研有那么一丁点联系的人对这个名字都不会陌生,因为它实在太出名了!基于冷冻电镜产出的科研成果很多都发表在Nature、Science、Cell等顶刊上(羡慕脸),堪称NSC神器。冷冻电镜技术的发展直接带动了生命科学领域,特别是结构生物学的飞速发展,
诊断人类副流感病毒的方法
有两种方法可以诊断人类副流感病毒的感染:1)通过组织培养:分离鉴定在细胞中的病毒或直接检测存在于呼吸道分泌物中的病毒,使用免疫荧光试验、PCR、酶联免疫反应测定等方法。2)适当时间收集的两份血清标本中IgG特异抗体的显著升高或检测单一血清标本中特异抗体IgM,而得出结论。
冷冻电镜原理
冷冻电镜原理冷冻电子显微学解析生物大分子及细胞结构的核心是透射电子显微镜成像,其基本过程包括样品制备、电子显微镜成像、图像处理及结构解析等几个基本步骤。冷冻电镜解析结构步骤 图片来源:中科院计算所透射电子显微镜成像过程中,电子束穿透样品,将样品的三维电势密度分布函数沿着电子束的传播方向投影至与传播
冷冻电镜成像
冷冻电镜成像冷冻的样品冷冻输送器转移到电镜的样品室,在电镜成像之前,需确认样品中的水处于玻璃态。由于生物样品对高能电子的辐射敏感,成像时必须使用低剂量技术(
冷冻电镜原理
冷冻电镜原理冷冻电子显微学解析生物大分子及细胞结构的核心是透射电子显微镜成像,其基本过程包括样品制备、透射电子显微镜成像、图像处理及结构解析等几个基本步骤(图3.1)。在透射电子显微镜成像中,电子枪产生的电子在高压电场中被加速至亚光速并在高真空的显微镜内部运动,根据高速运动的电子在磁场中发生偏转的原
冷冻电镜分类
冷冻电镜分类目前我们讨论的冷冻电镜基本上指的都是冷冻透射电子显微镜,但是如果我们以使用冷冻技术的角度定义冷冻电镜的话,冷冻电镜主要可以分为冷冻透射电子显微镜、冷冻扫描电子显微镜、冷冻蚀刻电子显微镜。 冷冻透射电子显微镜冷冻透射电镜(Cryo-TEM)通常是在普通透射电镜上加装样品冷冻设备,将样品冷却
冷冻蚀刻电镜技术
冻蚀刻(Freezeetching)技术是从50年代开始发展起来的一种将断裂和复型相结合的制备透射电镜样品技术,亦称冷冻断裂(Freezefracture)或冷冻复型(Freezereplica),用于细胞生物学等领域的显微结构研究。
冷冻电镜研究
在低温下使用透射电子显微镜观察样品的显微技术,就叫做冷冻电子显微镜技术,简称冷冻电镜(cryo-electron microscopy, cryo-EM)。冷冻电镜是重要的结构生物学研究方法,它与另外两种技术:X射线晶体学(X-ray crystallography)和核磁共振(nuclear ma
你知道人类副流感病毒吗?
近段时间因为感冒到医院就诊的儿童又多起来了,引起儿童感冒的罪魁祸首之一就是人类副流感病毒(HPIVs)。人类副流感病毒(HPIVs)是常常引起儿童下呼吸道感染的一种病毒,其致病性仅次于呼吸道合胞病毒 (RSV)。与RSV一样,人类副流感病毒可以造成反复发作的上呼吸道感染(如感冒和喉咙痛)。它也能
副流感病毒抗体的检查过程
洁净试管空腹静脉取血适量,通过组织培养:分离鉴定在细胞中的病毒或直接检测存在于呼吸道分泌物中的病毒,使用免疫荧光试验、PCR、酶联免疫反应测定等方法。适当时间收集的两份血清标本中IgG特异抗体的显著升高或检测单一血清标本中特异抗体IgM,而得出结论。
副流感病毒抗体的注意事项
检查前要求: (1)、酶联免疫吸附试验是一种敏感性较高的试验方法,影响因素较多。为了保证试验结果的稳定和重复性,对抗原、抗体以及酶结合物的浓度需进行预试验,选出合适的工作浓度,以便控制试验条件。 (2)、检查前当天需空腹 检查时要求: (1)、注意设各种对照(包括抗原、抗体以及酶结合物对
副流感病毒检验的临床意义
副流感病毒是引起儿童和成人呼吸道感染的一类较重要病原体。当时根据新发现病毒生物学性质和其引起类似流感样症状的特点定名为副流感病毒,分4型。通常它在成年人中引起的疾病较轻,在儿童中有可能引起严重后果。1型和2型可以在2~6岁的儿童中引起哮吼(喉器官支气管炎);3型是引起2岁以下儿童支气管炎的重要原因,
副流感病毒抗体的注意事项
检查前要求: (1)、酶联免疫吸附试验是一种敏感性较高的试验方法,影响因素较多。为了保证试验结果的稳定和重复性,对抗原、抗体以及酶结合物的浓度需进行预试验,选出合适的工作浓度,以便控制试验条件。 (2)、检查前当天需空腹 检查时要求: (1)、注意设各种对照(包括抗原、抗体以及酶结合物对
副流感病毒具有的临床意义
感染者呼吸道分泌物通过人与人密切接触或气溶胶传播;可引起儿童和成人呼吸道感染;1型和2型是主要的致病因子,而且常可引起哮喘;3型常引起下呼吸道感染;4型只引起轻型上呼吸道感染。
副流感病毒抗体的临床意义
异常结果: 阳性(或效价≥1∶160):病毒性流行性感冒。 需要检查人群: 流感症状患者,经常暴露在公众场所的人士。
副流感病毒抗体的正常值
血凝试验、中和试验、ELISA法:阴性。 单份血清中和抗体效价≤1∶160。
副流感病毒抗体的检查过程
洁净试管空腹静脉取血适量,通过组织培养:分离鉴定在细胞中的病毒或直接检测存在于呼吸道分泌物中的病毒,使用免疫荧光试验、PCR、酶联免疫反应测定等方法。适当时间收集的两份血清标本中IgG特异抗体的显著升高或检测单一血清标本中特异抗体IgM,而得出结论。
关于副流感病毒感染的检查介绍
1.病毒分离鉴定 一般采用鼻咽冲洗液或鼻咽拭子标本,接种易感的原代猴肾细胞、原代人胚肾细胞或人羊膜细胞进行培养。 2.快速病原诊断 可将患者鼻咽部分泌物作涂片,用1~3型副流感病毒荧光抗体检测脱落上皮细胞中的病毒特异性抗原。此外,PCR(聚合酶链式反应)法检测各型副流感病毒核酸
关于副流感病毒感染的病因分析
副流感病毒因被发现时的某些生物学性状及引起类流感样症状而得名,自1953年始相继分离出,属副黏病毒科副黏病毒属,分1~4型。副流感病毒呈球形,直径125~250nm,有包膜,单股RNA,在原代猴肾细胞或原代人胚肾细胞中均可分离到本病毒。由于本病毒从日本仙台一儿童死者分离,又称仙台病毒。
关于副流感病毒感染的基本介绍
副流感病毒感染是一种常见的急性病毒性呼吸道感染性疾病,在婴幼儿主要引起下呼吸道感染。在成人主要表现为上呼吸道感染。据统计,30%~40%的婴幼儿急性呼吸道感染都是由人类副流感病毒引起的。小儿喉炎中约33%、下呼吸道感染中约10%与副流感病毒有关,仅次于呼吸道合胞病毒和腺病毒感染。副流感病毒感染因
治疗副流感病毒感染的相关介绍
原则为对症、支持治疗,防治继发感染。 1.保持呼吸道通畅 对喉炎、喘息伴呼吸困难者予吸氧、化痰、平喘、雾化吸入减轻局部水肿,严重者可短期用肾上腺皮质激素,呼吸衰竭者必要时气管插管或气管切开。冷湿空气可减轻呼吸道黏膜水肿,促进分泌物排出,可用冷雾疗法以利临床症状缓解。要注意预防和治疗继发性细菌
冷冻电镜的发展
细胞里面的生命活动井然有序,每一个部分都有其特定的结构,承担不同的功能。生物大分子则是一切生命活动的最终执行者,它们主要是核酸和蛋白。核酸携带了生命体的遗传信息,而蛋白是生命活动的主要执行者。自现代分子生物学诞生以来的半个世纪里,解析和分析生物大分子的结构、进而阐释其功能机制一直都是现代生命科学
冷冻蚀刻免疫电镜技术
实验原理 冷冻蚀刻法(Freeze Ftching),也称冷冻复型法(Freeze Replica)或冷冻切断(Freeze Fracture),是研究生物膜结构的重要方法之一。其主要步骤首先是将样品在液氮中冷冻,然后放到真空喷镀仪中切断,切断后的切面上有细胞器,其间还有冻成洋的水分。再加热使冰升华
冷冻电镜的原理
冷冻电镜是用于扫描电镜的超低温冷冻制样及传输技术,可实现直接观察液体、半液体及对电子束敏感的样品,如生物、高分子材料等。样品经过超低温冷冻、断裂、镀膜制样(喷金/喷碳)等处理后,通过冷冻传输系统放入电镜内的冷台(温度可至-185℃)即可进行观察。冷冻电镜中的冷冻技术可以瞬间冷冻样品,并在冷冻状态下保
冷冻电镜是什么
冷冻电镜,是用于扫描电镜的超低温冷冻制样及传输技术(Cryo-SEM),可实现直接观察液体、半液体及对电子束敏感的样品,如生物、高分子材料等。能够斩获今年诺贝尔化学奖的原因是:诺奖委员会给出的获奖理由原话是“for developing cryo-electron microscopy for th
冷冻电镜颗粒挑选
颗粒挑选接下来需要从原始数据中筛选出颗粒投影,也被称为“颗粒挑选”,颗粒挑选的好坏也将影响所有后续的分析和处理过程,是一个重要并且繁琐的步骤。颗粒挑选方式可以分为手动挑选、半自动挑选和完全自动挑选这几种。在早期的分析中,对于结构的了解还非常少,优先考虑的都是人工挑选。但是自动的颗粒图像获取方法的出现
冷冻蚀刻免疫电镜技术
实验概要本文介绍了冷冻蚀刻免疫电镜技术,包括:冷冻蚀刻表面标记免疫电镜技术和断裂—标记免疫电镜技术。实验原理冷冻蚀刻法(Freeze Ftching),也称冷冻复型法(Freeze Replica)或冷冻切断(Freeze Fracture),是研究生物膜结构的重要方法之一。其主要步骤首先是