凝胶色谱仪标准操作规程

一、基本理论 (一)分子筛效益 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出,这种现象叫分子筛效应。具有多孔的凝胶就是分子筛。各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围,有最大极限和最小极限。分子直径比凝胶最大孔隙直径大的,就会全部被排阻在凝胶颗粒之外,这种情况叫全排阻。 两种全排阻的分子即使大小不同,也不能有分离效果。直径比凝胶最小孔直径小的分子......阅读全文

毛细管凝胶电泳色谱仪工作原理

毛细管凝胶电泳色谱仪(CGE)是20世纪80年代后期发展起来的毛细管电泳分离模式。它是将常规凝胶电泳仪对生物大分子的分离能力与毛细管电泳仪的快速、微量和定量分析相结合,是当今分离度极高的一种分离技术。聚丙烯酰胺凝胶是CGE的理想载体,将聚丙烯酰胺等在毛细管中交联生成网状多孔凝胶,以凝胶作为载体进行电

怎样对凝胶色谱仪的色谱柱进行存放?

  如果色谱柱暂时不用,存放时要注意以下几点:  a.几天之内的短期放置,凝胶柱则用蒸馏水来冲洗,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。  b.如果色谱柱长期不用,仅用上述方法来处理就不行了,这时应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,凝胶柱则不能用水了,因柱内如果有微生物的生长则会使柱效

关于凝胶色谱仪的色谱柱的清洗介绍

  为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中,在每次的样品分析工作完成之后,都应及时地清洗色谱柱。首先要用对被测样品洗脱能力强的溶剂来洗脱色谱柱,以分析工作中常用的反相色谱分析法为例,因其先流出的物质是极性大的物质,此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗

毛细管凝胶电泳色谱仪分析技术

毛细管凝胶电泳色谱仪(CGE)是20世纪80年代后期发展起来的毛细管电泳分离模式。它是将常规凝胶电泳仪对生物大分子的分离能力与毛细管电泳仪的快速、微量和定量分析相结合,是当今分离度极高的一种分离技术。一、载体特性:采用聚丙烯酰胺凝胶作为载体的目是防止CGE电泳过程中分子的对流和扩散,使待测组分得到更

凝胶渗透色谱仪的样品配制与进样

凝胶渗透色谱仪的样品配制与进样:一、样品配制:由于凝胶色谱仪中的浓度检测通常用示差折光检测器,其灵敏度不太高,所以样品浓度不能太低。但色谱柱的负荷量是有限的,浓度太高易发生超载现象。一般情况下,进样浓度按分子量大小的不同在0.05%~0.5%(质量百分数)范围内配置,分子量越大,溶液浓度越低。样品配

凝胶渗透色谱仪试验的流动相相关介绍

  做GPC检测时首先要考虑被测样品的溶解情况,以此确定流动相,还要考虑柱子的测试范围,应使被测物分子量落在柱子的分子量-淋出曲线线性部分之内,若柱子范围太窄则可考虑将不同规格的柱子串联使用。对于适用于GPC仪器的每一根柱子都会配有详细的使用说明,使用之前应认真阅读,严格遵从,特别值得注意的是严禁超

凝胶色谱仪的排阻极限和渗透极限

       凝胶色谱仪是以多孔性物质(凝胶)作为固定相,样品分子受固定相孔径大小的影响而实现分离。小分子可以扩散到凝胶空隙中通过,出峰最慢。中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过。大分子被排斥在外,出峰最快。溶剂分子最小,在最后出峰。        排阻极限是指不能进入凝胶色谱柱凝胶空隙内

凝胶渗透色谱仪色谱柱的注意事项

凝胶渗透色谱仪色谱柱的注意事项色谱柱的安装和使用在连接色谱柱之前,预先用即将使用的流动相体系置换以前用的流动相体系。在连接色谱柱时,要赶走因色谱柱保存不当或长时间不用在色谱柱的进口或者出口处产生的一些气泡。连接色谱柱要注意标示的色谱柱进出口方向。如果分析所用的温度较高,应在较低的流速下比如0.2到0

凝胶色谱仪洗脱次序和分配系数K

凝胶色谱仪是使用大小不同的分子在多孔固定相(凝胶)中的选择性浸透来分离的,适用于分离分子量不同的大分子物质(Mr>2000)。一、洗脱次序:凝胶色谱中组分与凝胶之间无作用力,仅仅根据分子量大小来分离。凝胶是有一定孔径散布范围的多孔物质,组分进入色谱柱后,向凝胶的孔中分散,保存程度取决于孔和组分分子的

琼脂糖凝胶电泳色谱仪分析技术

琼脂糖凝胶电泳色谱仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳技术,广泛用于核酸研究,为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。一、工作原理:琼脂糖凝胶电泳中,DNA分子的迁移率与其分子量的常用对数成反比。DNA分子构象对迁移率也有影响,迁移率为共价闭环DNA>直线DNA>开环双链DNA

凝胶色谱仪的排阻极限和渗透极限

凝胶色谱仪是以多孔性物质(凝胶)作为固定相,样品分子受固定相孔径大小的影响而实现分离。小分子可以扩散到凝胶空隙中通过,出峰最慢。中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过。大分子被排斥在外,出峰最快。溶剂分子最小,在最后出峰。排阻极限是指不能进入凝胶色谱柱凝胶空隙内的最小分子分子量。所有分子量大于排阻极

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪凝胶载体合成方式

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术,由于分辨率高,目前已广泛用于蛋白质等生物大分子的分析。聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH2,简称Acr)和交联剂N,N′-甲叉双丙烯酰胺(CH2 = CH-CO-NH-CO-CH = CH2,简称B

单分散高分子试样凝胶色谱仪分类方法

单分散高分子试样凝胶色谱仪分类方法有多种。 1、按产地可分:国产单分散高分子试样凝胶色谱仪和进口单分散高分子试样凝胶色谱仪。 2、按功能可分:分析型单分散高分子试样凝胶色谱仪和制备型单分散高分子试样凝胶色谱仪。 3、按应用范围可分:专用型单分散高分子试样凝胶色谱仪和通用型单分散高分子试样凝胶

超高温凝胶渗透色谱仪的技术指标

  超高温凝胶渗透色谱仪是一台设计用于几乎所有聚合物、溶剂及温度范围(30℃到220℃)的全自动的极其灵活的系统。适用于操作温度从室温到220℃的聚合物的分析。  概述  直观、综合的软件对系统进行全面灵活的控制,专利的双温区自动进样器,方便样品进样前的预热但又不致于使样品发生热降解,特有溶剂传感器

超高温凝胶渗透色谱仪的性能特点简介

  性能特点  分析过程全部自动化、系统己实现无人监管分析  使用温度范围宽:30℃-220℃温度稳定性好,特别适合表征PE,PP,  UHMW-PE,聚醚醚酮,聚苯硫醚  检测器采用光纤传输,灵敏度高,避免高温影响  自动进样器采用双区域加热,避免了样品沉淀析出与降解  系统设有全部参数检查跟查功

关于凝胶渗透色谱仪色谱柱的拆除和保存

  完成实验分析后,在0.2ml/min的流速下,缓慢将柱温箱温度降到室温。  色谱柱降至室温后,要快速地用堵头将仪器上拆下的色谱柱密封好,避免柱子里面的流动相溢出。  将色谱柱放入到厂家提供的包装盒中,放置在温度变化很少的室内,恒温是最佳选择。  柱子如长期不用,最好隔一段时间在仪器上冲洗一下,以

凝胶渗透色谱仪的主要部件日常清洗流程

气路管路、进样器、注射器的清洗 对进样器(包括汽化室)的清洗应以疏通为先导。通常在进样器中的堵塞物是进样隔垫的碎片,样品中被炭化了的高沸点物,对这些固态杂质可用不锈钢捅针疏通,然后再用乙醇或丙酮冲洗。为了使清洗更彻底,可选用2:1:4的 H2SO4/HNO3/H2O混合溶液先对进样器清洗,然后再用蒸

全自动凝胶渗透色谱仪的数据处理方法

全自动凝胶渗透色谱仪的数据处理方法:  由于GPC/SEC的分离机理是按照分子尺寸的大小进行分离的,不考虑溶质和载体之间的吸附效应,也不考虑溶质在流动相和固定相之间的分配效应,其淋出体积(自试样进柱到被淋洗出来所接收到的淋洗液总体积)仅由溶质分子尺寸和载体的孔洞尺寸决定,与分子量只是间接的关系。不同

琼脂糖凝胶电泳色谱仪的载体分类

琼脂糖凝胶电泳色谱仪的载体按熔点可分为高熔点(标准)琼脂糖凝胶和低熔点琼脂糖凝胶。一、高熔点(标准)琼脂糖凝胶:制造高熔点琼脂糖凝胶的原料是Gelidium和Gracilaria海藻。这两种琼脂糖的熔点不同,但在实际应用中每种来源的琼脂糖都可以用于分离1~25kb的DNA段。新型的标准琼脂糖具有高凝

全自动凝胶渗透色谱仪的数据处理方法

 由于GPC/SEC的分离机理是按照分子尺寸的大小进行分离的,不考虑溶质和载体之间的吸附效应,也不考虑溶质在流动相和固定相之间的分配效应,其淋出体积(自试样进柱到被淋洗出来所接收到的淋洗液总体积)仅由溶质分子尺寸和载体的孔洞尺寸决定,与分子量只是间接的关系。不同的高分子,虽然分子量相同,但分子体积并

使用凝胶色谱仪的一些注意事项

  溶剂准备:使用HPLC纯溶剂,如有必要,进行过滤。保证溶剂的相溶性,避免使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。  溶剂脱气:超声脱气。  样品准备:过滤样品,确保样品中不含固体颗粒,用流动相溶解样品。  色谱柱的保护:  (1) 防止气体进入色谱柱。凝胶柱是不允许气泡进入的,否则将会使柱效降低甚至形成微小

全自动凝胶渗透色谱仪的数据处理方法

全自动凝胶渗透色谱仪的数据处理方法:  由于GPC/SEC的分离机理是按照分子尺寸的大小进行分离的,不考虑溶质和载体之间的吸附效应,也不考虑溶质在流动相和固定相之间的分配效应,其淋出体积(自试样进柱到被淋洗出来所接收到的淋洗液总体积)仅由溶质分子尺寸和载体的孔洞尺寸决定,与分子量只是间接的关系。不同

凝胶色谱仪常见故障断定及解决方法

  凝胶色谱又称分子排阻色谱法,主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试,在生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用。以下是凝胶色谱仪在使用过程中出现的常见故障的断定及解决方法:  (一)保留时间变化  1.柱温变化 柱恒温,必要时需配置恒温箱  2

凝胶色谱仪DNA电泳带模糊的解决方案

凝胶色谱仪DNA电泳带模糊的解决方案:一、可能原因:DNA降解。解决方案:避免核酸酶污染。二、可能原因:电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。解决方案:经常更换电泳缓冲液。三、可能原因:所用电泳条件不合适。解决方案:电泳时电压应<20V/cm,温度<30℃。

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪凝胶总浓度与蛋白质相对......

聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术。凝胶的三维网状结构具有分子筛效应,分子筛效应的大小取决于凝胶孔径大小与生物大分子大小的接近程度。凝胶总浓度不同,平均孔径不同,不同大小和形状的大分子通过筛孔时受到的阻力不同,加上大分子的电荷效应,使迁移率不同的大分子得以分离,广泛用

凝胶色谱仪对共聚物的分析的应用介绍

  共聚物除了分子量分布外,还有组成的多分散性。以往对共聚物的组成分析很麻烦,首先进行分级,然后用光谱、色谱等测定每级分组分,这样既费时又不准确。用凝胶色谱能快速、同时测定共聚物的组成分布及分子量分布。对于一个组分有紫外吸收另一组分没有紫外吸收的共聚物,Tung采用具有紫外和示差双检测器的凝胶色谱测

快速分析塑料添加剂的凝胶渗透色谱仪问世

Shimadzu科学设备公司推出一种用于超微量物质如塑料和合成聚合物中不纯物质和添加剂快速分析的凝胶渗透色谱仪(GPC)和质谱仪。GPC-AccuSpot-AXIMA含有高分辨率的GPC系统,AccuSpot全自动碎片收集和识别设备,以及 AXIMA系列的MALDI-TOF质谱仪。 时至今日,

对于凝胶渗透色谱仪的实验步骤你还有什么想法?

 凝胶渗透色谱仪是利用高分子溶液通过填充有微孔凝胶的柱子把高分子按尺寸大小进行分离的方法。主要用于有机溶剂中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢喃等有机溶剂。  凝胶渗透色谱仪不但可以用于分离测定高聚物

东曹携新品凝胶渗透色谱仪亮相BCEIA2019

  分析测试百科网讯 2019年10月23日,第十八届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA 2019)在北京•国家会议中心开幕(相关报道:活动缤纷 展商云集 BCEIA 2019北京开幕)。东曹(上海)生物科技有限公司携高性能凝胶渗透色谱仪、高性能亲和色谱分析柱、超高效液相尺寸排阻色谱柱等产品

简述高温凝胶色谱仪的技术指标和应用范围

  技术指标  分析型GPC,泵:流速范围0.1-10.0ml,重复性£;0.07%  温控范围:30-220°C,稳定性