关于流动相的疑问解答(一)
流动相的重要性大家都知道,一旦流动相出问题,那么分析仪器的结果就失去了参考价值,而其有效性对于很多人来说,一直都有很多不确定,很多人是靠经验来定,那么没有经验的人靠什么? 有人会说,靠资料,可是否有相关的流动相有效期的验证文件,或者是流动相的规定有效期资料供大家参考呢,答案是无,即使是国际上也没有特别针对每种流动相的有效期规定文件。大多有效期的规定都是根据试剂或常用药品的稳定性和化学性质来做参考,具体时间还要视当时的环境条件而定。也可以说,流动相的有效期规定是个经验活儿。今天小编给大家总结的就是关于流动相的有效期的给定原则、存放、和复验管理规定。 流动相放置时间影响 1、有机相挥发:有机试剂组成比例越大,沸点越低,其挥发程度越大,不过对于挥发相对比较好控制,只要密封好就可以; 2、pH值影响:反相色谱流动相往往是缓冲盐,其pH值受有机相的挥发、空气中的二氧化碳等影响,有时甚至浑浊;且......阅读全文
调整HPLC的流动相有哪些原则?
液相色谱仪的流动相调整非常重要,一般来说,应该考虑以下方面。 一 由强到弱。一般先用90%的乙腈/水进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂的比例。 二 三倍规则。每减少10%的有机溶剂的量,保留因子约增加3倍,此为3倍规则。调整过程中,注意观察各个峰的分离情况。 三
关于流动相过滤,你应该了解这些
众所周知,色谱系统是一种十分精密的设备,对结果的准确性要求也很高,因此,我们在样品制备的每一步都不可掉以轻心。正如液相色谱系统的说明书中所要求的,流动相必须使用HPLC级的试剂,且使用前必须过滤。 为什么要过滤? 流动相过滤可以保护色谱系统和色谱柱,延长柱子的使用寿命,并改善数据的精确度。同
液相报错,流动相吸空了,怎么处理
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走;4
离子交换色谱法流动相
离子交换色谱法流动相 :水的缓冲溶液。阴离子离子交换树脂作固定相,采用酸性水溶液;阳离子离子交换树脂作固定相,采用碱性水溶液;应用:离子及可离解的化合物,氨基酸、核酸等。
高效液相色谱仪流动相要求
高效液相色谱仪流动相要求1.流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选择流动相时应考虑以下几个方面: ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱
0.05%磷酸溶液流动相怎么配制
如果配制的磷酸溶液为1升,那么需要纯磷酸0.05×98=4.9克,如果使用的是85%食用级磷酸,那么需要磷酸的质量是4.9/0.85=5.765克。即称取5.765克85%的磷酸,在搅拌的同时,加水定容至一升即可。
选择液相色谱流动相时应考虑以下几个方面?
选择流动相时应考虑以下几个方面:1)流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2)纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含
液相色谱使用流动相时需要注意哪些问题
1.色谱柱中的流动相是否会会排干的问题: 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相泵将溶剂瓶中的流动相吸干了HPLC系统由此而停止工作了这会损坏色谱柱吗?泵是否排出了塔中的所有流动相?色谱柱还能用吗事实上,如果泵吸收了溶剂瓶中的流动相,就不会对色谱柱造成损坏,即使泵
化学键合相色谱仪流动相概述
根据流动相所起的作用,化学键合相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况,洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。一、正相键合相色谱:流动相极性小于固定相极性。常用非极性溶剂,样品组分的保留值可加入适当的有机溶剂(调节剂)调节。常用溶剂:氯仿、二氯甲烷、已
液相色谱流动相常用的添加剂有那些
离子对试剂:庚烷磺酸钠,表面活性剂:十六烷基三甲基溴化胺,甲酸调pH等
液相流动相可以将盐酸换成乙酸铵吗
HPLC中常用的缓冲盐就是醋酸铵或者磷酸盐等,无机酸一般很少用。但是用什么还是要取决于待分析物的性质。在使用缓冲盐后要确保将柱子中盐冲洗干净后再用有机相保存,不然有机盐会结晶出来,对柱子造成不可逆的损伤。
液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去
液相色谱对流动相选择的一般要求
液相色谱所采用的流动相通常为各种低沸点有机溶剂与水或缓冲溶液的混合物。为了保证色谱系统的分离过程可重复性,流动相所采用的溶剂必须具有较高的纯度和化学稳定性。从实用角度考虑,溶剂应价格低廉、容易购得且使用安全。对流动相选择的一般要求包括: 1 化学稳定性好,不与固定相和样品组分发生化学反应; 2
液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去
流动相出现问题,液相色谱图出现的问题
液相色谱中的许多问题都能在谱图上反映出来,其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。而面对常常发现的HPLC 谱图异常的问题,如何做到真正解决问题,则需坚持这几个原则:一具体问题具体对待原则; 二先外设
离子交换键合相色谱仪流动相概述
离子交换键合相色谱仪流动相多为一定pH值的缓冲液,有机成分作改性剂。一、溶质保留机理:兼有离子交换和吸附双重机理。二、影响溶质保留值的因素: 1、流动相的pH值:(1)弱酸和弱碱的保留值与洗脱液的pH值有关。解离并参加离子交换而被分离。不解离,不参加离子交换,以分子形式几乎无保留地通过色谱柱。流动
液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去
高效液相色谱中,为什么要对流动相脱气
防止溶解在流动相中的气体因为压力和温度的变化释出来 液相色谱柱的分离。
简介高效液相色谱(HPLC)流动相的性质要求
(1)流动不会相应地改变填料的任何性质 低交联度离子交换树脂和排斥色谱填料有时会遇到一些有机相的膨胀或收缩,从而改变色谱柱填料床的性能。碱性流动相不能用于硅胶柱体系中,酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附柱体系中。 (3)必须与探测器配套。当使用紫外检测器时,所用的流动相在检测波长上不应吸收
正相色谱中固定相,流动相极性有何特点
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-cn)、氨基(-nh2)、二醇基(diol)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流动相
液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去
关于液相色谱流动相的一些问题
流动相相当于液相的血液,可以想象对液相的重要程度。那么流动相都需要注意什么呢? 过滤溶剂 溶剂在使用前一定要用0.5μm的过滤器过滤,如果使用固体化学试剂(缓冲盐)配制流动相,过滤特别重要,不能让固体微粒污染泵,阻塞进样器和柱头过滤片。本实验室有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择(反光面朝上),
化学键合相色谱法的流动相
二. 流动相 化学键合相色谱所用流动相的极性必须与固定相显著不同,根据流动相和固定相的相对极性不同分为: 1. 正相键合相色谱法:流动相极性小于固定相极性。 常用非极性溶剂如烷烃类溶剂,样品组分的保留值可用加入适当的有机溶剂(调节剂)的办法调节洗脱强度。常用有机溶剂为极性溶剂如氯仿、
液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时,流动相在恢复到室温前,基线水平很难稳定,特别是发生漂移,也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时,混合液变化大,往往会与室温相差很大,务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水,水相流动相需经常更换,防止长菌变质。使用去
高效液相色谱中,为什么要对流动相脱气
脱气方式:在线脱气机脱气,前期流动超声波超声脱气;系统中气泡的产生:流动相本身存在,梯度淋洗混合后放出气泡;气泡的影响:存在于管路中,系统压力不稳定,实验结果有偏差;存在于单向阀中,易造成液体回流,流量不准确,甚至是不吸液;存在于检测器中,出现鬼峰,影响检测准确性。所以做液相对流动相的气泡和杂质要求
化学键合相色谱仪流动相概述
根据流动相所起的作用,化学键合相色谱仪流动相可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况,洗脱剂是为了调节样品组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。一、正相键合相色谱:流动相极性小于固定相极性。常用非极性溶剂,样品组分的保留值可加入适当的有机溶剂(调节剂)调节。常用溶剂:氯仿、二氯甲烷、已
HPLC常见问题和解决方法-没有压力显示没有流动相流动
没有压力显示,没有流动相流动原 因解决方法1、电源问题1、接通电源,开机2、保险丝被烧坏2、更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败3、a、采取恰当的设定b、修理或更换控制器4、柱塞杆折断4、更换柱塞杆5、泵头内有空气5、溶剂脱气、启动泵抽出空气6、流动相不足6、a、补充流动相b、更换入口滤头7、单
关于体积排阻色谱的流动相介绍
流动相的作用仅仅在于溶解样品,不控制分离度。选择的原则是低黏度,不损害柱填料。和键合相色谱不同,要根据填料的性质选用溶剂,特别是新填料,厂家往往提供可选溶剂的范围。常用的溶剂有己烷、四氢呋喃、二氯甲烷、二嗯烷、环己烷、二氯乙烷、氯仿、三氯乙烷、四氯化碳、苯、甲苯、乙苯、N,N一二甲基甲酰胺、水、
液相色谱仪流动相的贮存方法
液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂,导致溶剂被污染。被污染的溶剂如用于液相色谱仪系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成的变化,同时防止空气中的氧和二氧化碳溶入流动相中。磷酸盐、乙酸
LCMS流动相的制备要求
动相的制备要求:高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法。