合理选择HPLC稀释剂有多重要?
应用高效液相色谱检测时,流动相的选择十分重要,因此稀释剂的选择就成为重中之重。根据高效液相色谱检测的不同要求,可以选择不同的类型的稀释剂。而选择时的LC-MS级这一指标到底有何意义?本文对此予以了详尽的解答。 众所周知,在高效液相色谱检测中要使用高纯度稀释剂作为流动相,在此有不同纯度指标的稀释剂可供选用,例如HPLC级稀释剂、梯度级稀释剂以及LC-MS级稀释剂。在色谱分析中,应用不同稀释剂的质量和稀释剂的纯度之间有什么关系?稀释剂的质量为何要与检测任务保持匹配? 稀释剂的质量表示的是:它们是由同一种原料生产的,理论上只有微量杂质(根据不同的产品:99.8%~99.9%)。但这微量的杂质却会在色谱分析中因不同的检测方法由被测样本而带来变化,此时的纯稀释剂已经不是原来意义上的“纯稀释剂”了。下面,我们将举例说明稀释剂质量的三个等级,以及使用合适质量稀释剂的意义。 图1. 使用何种质......阅读全文
HPLC入门问题FAQ
HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多:调整衰减即可。检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数检测器池窗污染:解决
HPLC基础知识
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 (一)概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的
HPLC入门问题FAQ
HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器 检测器衰减太多:调整衰减即可。 检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数 检测器池窗
HPLC分类及其原理
HPLC分类有很多种,可以根据不同的依据进行分类。1. 根据流动相和固定相的极性不同,HPLC可以分为正相色谱和反相色谱。正相高效液相色谱: 色谱柱中的固定相是由硅胶、氧化铝等极性化合物组成。当色谱运行时,由于样品中的极性化合物对固定相有较强的亲和力,使它们在色谱柱中的保留时间比非极性化合物长,因此
HPLC维护知识问答
1、为什么溶剂和样品要过滤? 溶剂和样品过滤非常重要,它会对色谱柱、仪器起到保护作用,消除由于污染对分析结果的影响。 色谱柱:由于填料颗粒很细,色谱柱内腔很小,溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。 仪器:溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损,同时也会增加泵头内的蓝
HPLC基础知识
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 (一)概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary ph
HPLC名词术语
色谱图(Chromatogram) : 色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图,其纵坐标为信号强度,横坐标为时间。色谱峰(Peak):色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号。峰底(Peak Base):峰的起点与终点之间连接的直线。峰高(Peak Height):峰最大值到峰底的距
uhplc和hplc区别
hplc是高效液相色谱,uplc是超高效液相色谱,这两个的区别是超高效液相色谱借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。
HPLC填料的选择
基质HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。陶瓷性质的无机物基质主要是硅胶和氧化铝。陶瓷性质的无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。HPLC级的有机聚合物是基于交联的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小,更易压缩。溶剂或溶质容易渗入有机质基质中,导致填料颗粒
HPLCICPMS和HPLCAFS助力食品安全检测
近期,天津滨海新区召开2011年度科学技术奖励大会,隆重表彰为滨海新区科技发展作出突出贡献的单位和科技工作者。天津检验检疫局动植物与食品检测中心申报的天津检验检疫局重点科技项目《食品安全关键因子的新型检测技术研究与应用》(TK041-2009)荣获科学技术进步奖二等奖。 该项目针
HPLC峰变宽的原因
原因:a.在使用过程中柱本身退化,逐渐降低柱效; b.柱外峰宽效应。一根很好的专用柱用于另一液相色谱系统引起塔板数降低,说明新系统有很大的柱外峰宽效应; c.化学效应,多数是流动相和固定相相互作用所致,改变流动相可使宽峰有所改善。
HPLC级环己烷-促销
CAEQ-4-011556-4000 HPLC级环己烷 CYCLOHEXANE (UV-IR-HPLC)报价:520元/瓶整箱起订促销价为420元/瓶,4瓶/箱促销时间:12月6日至12月31日
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时,如果得到的色谱图出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质,要选用乙腈/水作流动相。
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时,如果得到的色谱图出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质,要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对
水质对HPLC的影响
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。 1、颗粒 颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并
GC和HPLC的区别
Gas Chromatography 气相色谱法气相色谱系统由盛在管柱内的吸附剂(表1) 或惰性固体上涂着液体的固定相和不断通过管柱的气体的流动相组成。将欲分离、分析的样品从管柱一端加入后,由于固定相对样品中各组分吸附或溶解能力不同,即各组分在固定相和流动相之间的分配系数有差别,当组分在两相中反复多
HPLC与FPLC的异同
FPLC全称为快速蛋白液相色谱(Fast protein liquid chromatography),其原理与GX液相色谱理论类似,是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。 近些年
HPLC的故障及处理
(一) 保留时间变化 1.柱温变化 柱恒温。 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。 3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。 4.柱污染 每天冲洗柱。 5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相。 6.柱快达到寿命 采用保护柱。 (二) 保留时间缩短 1.流速增
纯水对于HPLC的影响
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它,这会导致回压增大
Waters-HPLC故障排除指南
Waters公司的,HPLC故障排除指南1. Column Life-Time 2. Variable Retention Times 3. Drifting Retention Times 4. Column-to-Column and Batch-to-Batch Reprodu
水质对HPLC的影响
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。1、颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它,这会导致回
HPLC直接液体导入接口
直接液体导入接口(DLI)是将HPLC的流动相沿着进样杆流动,然后通过一个直径为3-5μm的针孔,使液体射入质谱计的CI离子源中。仅仅大约10-50μl/min的液流,就如小液滴流一样可进入离子源(是传统HPLC流量的1%-5%),否则质谱计的泵系统将被损伤。当它通过一个加热的去溶剂区域时,溶剂蒸发
HPLC基础知识(七)
V.HPLC应用一、样品测定1.流动相比例调整:由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度,因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相(按经验,主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜)。所以建议第一次检验时请少配流动相,以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到,请注意充分平衡柱。2.样品配
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时,如果得到的色谱图出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质,要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对
纯水对于HPLC的影响
纯水对于HPLC的影响液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLCzui常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且
HPLC如何计算样品含量
你是用什么样的定量方法呢?如果面积归一化法的话就直接用你的待检峰面积除上你的样品所有峰面积和再乘100就是你的样品中待检成分的百分比浓度了。如果是内标或外标法应该要进标准溶液
HPLC基础知识(三)
3.柱外效应速率理论研究的是柱内峰展宽因素,实际在柱外还存在引起峰展宽的因素,即柱外效应(色谱峰在柱外死空间里的扩展效应)。色谱峰展宽的总方差等于各方差之和,即: σ2=σ2柱内+σ2柱外+σ2其它柱外效应主要由低劣的进样技术、从进样点到检测池之间除柱子本身以外的所有死体积所引起。为了减少柱外
HPLC的故障及处理
(一) 保留时间变化1.柱温变化 柱恒温2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液4.柱污染 每天冲洗柱5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命 采用保护柱(二) 保留时间缩
HPLC良好的连接方略
毛细管对高效液相色谱分离的影响 若高效液相色谱 (HPLC) 系统采用了不适当的连接方式或者应用不正确的毛细管,均可能导致均可能导致不良的峰扩宽,色谱柱的最佳分离效率就更无从谈起。甚至还可能发生使用的柱子越细,其洗脱峰的扩宽反而越大的情况。本文将详细介绍毛细管对高效液相色谱分离的影响,