合理选择HPLC稀释剂有多重要？
应用高效液相色谱检测时，流动相的选择十分重要，因此稀释剂的选择就成为重中之重。根据高效液相色谱检测的不同要求，可以选择不同的类型的稀释剂。而选择时的LC-MS级这一指标到底有何意义?本文对此予以了详尽的解答。 众所周知，在高效液相色谱检测中要使用高纯度稀释剂作为流动相，在此有不同纯度指标的稀释剂可供选用，例如HPLC级稀释剂、梯度级稀释剂以及LC-MS级稀释剂。在色谱分析中，应用不同稀释剂的质量和稀释剂的纯度之间有什么关系?稀释剂的质量为何要与检测任务保持匹配? 稀释剂的质量表示的是：它们是由同一种原料生产的，理论上只有微量杂质(根据不同的产品：99.8%~99.9%)。但这微量的杂质却会在色谱分析中因不同的检测方法由被测样本而带来变化，此时的纯稀释剂已经不是原来意义上的“纯稀释剂”了。下面，我们将举例说明稀释剂质量的三个等级，以及使用合适质量稀释剂的意义。 图1. 使用何种质......阅读全文
HPLC的故障及处理
(一) 保留时间变化1.柱温变化 柱恒温。2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。4.柱污染 每天冲洗柱。5.柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相。6.柱快达到寿命 采用保护柱。(二) 保留时间缩短1.流速增加 检查泵，重新
水质对HPLC的影响
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。 1、颗粒 颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并
水质对HPLC的影响
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它，这会导致回压增
GC和HPLC的区别
Gas Chromatography 气相色谱法气相色谱系统由盛在管柱内的吸附剂(表1) 或惰性固体上涂着液体的固定相和不断通过管柱的气体的流动相组成。将欲分离、分析的样品从管柱一端加入后，由于固定相对样品中各组分吸附或溶解能力不同，即各组分在固定相和流动相之间的分配系数有差别，当组分在两相中反复多
HPLC－故障及排除方法
详细说明: 诊状 可能的原因 解 决 方 法 一 保留时间变化 1.柱温变化 柱恒温 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱 3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液 4.柱污染 每天冲洗柱 5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相 6.柱快达到寿命 采
HPLC基础知识（六）
三、流动相1．流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数
HPLC基础知识（三）
3．柱外效应速率理论研究的是柱内峰展宽因素，实际在柱外还存在引起峰展宽的因素，即柱外效应（色谱峰在柱外死空间里的扩展效应）。色谱峰展宽的总方差等于各方差之和，即： σ2＝σ2柱内＋σ2柱外＋σ2其它柱外效应主要由低劣的进样技术、从进样点到检测池之间除柱子本身以外的所有死体积所引起。为了减少柱外
HPLC基础知识（一）
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。I．概论 一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和
HPLC基础知识（四）
4．柱的使用和维护注意事项 色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内
Waters－HPLC故障排除指南
Waters公司的，HPLC故障排除指南1. Column Life-Time 2. Variable Retention Times 3. Drifting Retention Times 4. Column-to-Column and Batch-to-Batch Reprodu
水质对HPLC的影响
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。1、颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它，这会导致回
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时，如果得到的色谱图出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质，要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对
HPLC与FPLC的异同
FPLC全称为快速蛋白液相色谱（Fast protein liquid chromatography），其原理与GX液相色谱理论类似，是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论，并且对相体进行了改革，配用高压输液泵，采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。 近些年
HPLC保留时间限制多少？
HPLC只是分离的手段，如果保留时间太短，说明被分离物质在固定相上面的保留较差，就有可能与不保留的杂质混在一起而干扰待测物的测定，当然，这只是在使用UV、ELSD等特异性不是很强的检测器时的常见情况，但是如果使用荧光、质谱等特异性较强的检测器时，这种干扰会被大大降低或者排除。保留时间与使用的液相色谱
如何提高HPLC柱效？
要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。 以下介绍了几种国际上流行的测量和计算柱效值的方法。 1、提高液相色谱柱柱效的方法要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。 （1）降低移动相的流速,但会使分析时间延长。 （2）减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。 （3）减小固定相的颗粒度,但不能
HPLC－故障及排除方法
诊状 可能的原因 解 决 方 法 （ 一 ） 保留时间变化 1. 柱温变化柱恒温2. 等度与梯度间未能充分平衡至少用 10 倍柱体积的流动相平衡柱3. 缓冲液容量不够用 >25mmol/L 的缓冲液4. 柱污染每天冲洗柱5. 柱内条件变化稳定进样条件 , 调节流动相6. 柱快达到寿命采用保护柱（ 二
HPLC基础知识（二）
3．离子交换色谱法 固定相是离子交换树脂，常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架，在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基（称阳离子交换树脂）或季氨基（阴离子交换树脂）。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换，根据各离子与离子交换基团具有不同的
基于温度梯度的HPLC分析——温度梯度淋洗的HPLC方法
在近年来所开发的一系列液相色谱方法中，温度梯度淋洗方法有着独特的应用，尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析中。本文介绍了如何将已存在保留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色谱（HPLC）的方法开发中，原则上都是采用反复试验法来建立的，实验室用户根据自己的经验来改变一
实验室分析仪器稀释剂对ICP分析的影响
稀释剂的粘度对雾化进样、速率产生影响；密度、粘度和表面张力影响形成雾滴的初始致敬；沸点影响雾滴的挥发及进入ICP通道的有机溶剂蒸发量，从而影响ICP的稳定性。
稀释剂对3氧戊二酰胺类萃取剂萃取稀土的影响
为了从风化壳淋积型稀土矿铵盐浸出液中萃取分离出稀土离子,合成3种3-氧戊二酰胺类萃取剂N,N,N′,N′-四丁基-3-氧戊二酰胺、N,N,N′,N′-四己基-3-氧戊二酰胺和N,N,N′,N′-四辛基-3-氧戊二酰胺.考察在NH4Cl、(NH4)2SO4、NH4NO3这3种铵盐溶液中,萃取剂浓度和不
丙二醇甲醚醋酸酯用在醇溶油墨当中当稀释剂怎么配比
首先同性能油墨要设定同溶剂混合其需要根据印刷操作环境温度、湿度、印刷设备、印刷速度、印刷版辊同拟定溶剂配制比例面印刷室温20℃左右印刷速度50～100米/情况塑料凹印四种油墨印刷用稀释剂配比例提供凹印操作者参考：1、印塑料凹版油墨使用稀释剂配比：快干溶剂：醋酸乙酯20％甲苯80％干溶剂：醋酸乙酯20
HPLC基础知识教程（七）
几种检测器的主要性能全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射信号吸光度荧光强度电流离子流强度散射光强噪音10-510-310-9线性范围105104105宽选择性是是是否否流速影响无无有无温度影响小小大小
HPLC基础知识教程（十一）
全屏显示表格硅胶氧化铝苯乙烯-二乙烯苯甲基丙烯酸酯耐有机溶剂++++++++++适用pH范围++++++++抗膨胀/收缩++++++++耐压+++++++++表面化学性质+++++++++效能+++++++注：+++好 ++一般 +差
HPLC基础知识教程（八）
全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射全屏显示表格检测限(g/ml)10-1010-1310-13＜10-9g/s10-9池体积(ul)2~10~7＜1————梯度洗脱适宜适宜不宜适宜适宜细管径柱难难适宜适宜适宜样品破坏无无无有无
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
HPLC部分问题解答
1、除了流速外，还有哪些因素能引起压力改变? 改变流动相组成和温度;改变柱长、柱内径和填料粒度;柱突然阻塞压力升高(正常情况下其它条件不变柱压都是逐渐升高的)。2、什么是强溶剂、弱溶剂? 改变流动相的组成或溶剂溶剂强度就可以改变峰容量因子和保留时间。在一定条件下，减少保留时间或缩短分析时间的
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话，最好还是用（水：乙腈= 9：1）先冲洗一下，如果柱子里盐不冲洗干净的话，再用小极性的流动相冲柱子时，盐就会析出，影响色谱柱寿命。要是没有盐的话，就无所谓了，用甲醇 乙腈冲洗都行，冲洗到什么程度，主要看柱压是否已经回落，稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙腈最好）中
HPLC基础知识教程（十四）
V．HPLC应用 一、样品测定 1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱
HPLC日常操作注意事项
选择流动相时应注意的几个问题：尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有较强的紫外吸收，一般
HPLC保留时间快速变化现象
1. 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合