合理选择HPLC稀释剂有多重要？
应用高效液相色谱检测时，流动相的选择十分重要，因此稀释剂的选择就成为重中之重。根据高效液相色谱检测的不同要求，可以选择不同的类型的稀释剂。而选择时的LC-MS级这一指标到底有何意义?本文对此予以了详尽的解答。 众所周知，在高效液相色谱检测中要使用高纯度稀释剂作为流动相，在此有不同纯度指标的稀释剂可供选用，例如HPLC级稀释剂、梯度级稀释剂以及LC-MS级稀释剂。在色谱分析中，应用不同稀释剂的质量和稀释剂的纯度之间有什么关系?稀释剂的质量为何要与检测任务保持匹配? 稀释剂的质量表示的是：它们是由同一种原料生产的，理论上只有微量杂质(根据不同的产品：99.8%~99.9%)。但这微量的杂质却会在色谱分析中因不同的检测方法由被测样本而带来变化，此时的纯稀释剂已经不是原来意义上的“纯稀释剂”了。下面，我们将举例说明稀释剂质量的三个等级，以及使用合适质量稀释剂的意义。 图1. 使用何种质......阅读全文
HPLC－System－features－stackable,－modular－design
Product News Network, March 25, 2005 Finnigan™ Surveyor Plus provides PDA detection for high-throughput sample processing environments. It feature
HPLC常见故障排除小贴士
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。 鉴于HPLC在全行业运用越来越广泛，因此每一个实验室分析人员都应该熟练掌握并应用HPLC，对于一些常见的故障分析应该做到游刃有余，才能在运行故障的时候即使解决问题，提高工作效率。
HPLC仪的结构及功能
HPLC仪一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统（色谱柱）、检测系统和数据处理与记录系统组成，具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分。其中输液泵、色谱柱和检测器是HPLC仪的关键部分 。1. 溶剂输送系统储液器：用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器
HPLC基础知识教程（十）
一、基质（担体） HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大，在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩，溶剂或溶质容易渗入有机基质中，导致填料颗粒膨胀，结果减少
HPLC基础知识教程(十三)
3．流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分
HPLC日常操作注意事项
选择流动相时应注意的几个问题：尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有较强的紫外吸收，一般
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话，最好还是用（水：乙腈= 9：1）先冲洗一下，如果柱子里盐不冲洗干净的话，再用小极性的流动相冲柱子时，盐就会析出，影响色谱柱寿命。要是没有盐的话，就无所谓了，用甲醇 乙腈冲洗都行，冲洗到什么程度，主要看柱压是否已经回落，稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙腈最好）中
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
HPLC基础知识教程（四）
III．HPLC系统 HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还
HPLC基础知识教程（十一）
全屏显示表格硅胶氧化铝苯乙烯-二乙烯苯甲基丙烯酸酯耐有机溶剂++++++++++适用pH范围++++++++抗膨胀/收缩++++++++耐压+++++++++表面化学性质+++++++++效能+++++++注：+++好 ++一般 +差
HPLC基础知识教程（六）
1．柱的构造 色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛
关于HPLC的流动相问题
1)PH值特别重要：一般C18柱PH小于3时，容易损坏色谱柱，但是抗酸性的柱可以使用小的PH值。 2) 注意选择试剂的截止波长：如乙腈截止波长215nm、丙酮截止波长330nm、正丁烷210nm等等(具体情况请读者参阅本文的参考文献)。 3)流速：流速要适当，否则影响峰形、浪费溶剂，一般常规
HPLC基础知识教程（五）
2．泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作： ①、防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Mi
HPLC的故障及处理（二）
(五) 鬼峰1.进样阀残余峰 每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗。2.样品中未知物 处理样品。3.柱未平衡 重新平衡柱，用流动相作样品溶剂（尤其是离子对色谱）。4.三氟乙酸（TFA）氧化（肽谱）每天新配，用抗氧化剂。5.水污染（反相）通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水。(六) 基线
HPLC基础知识教程（一）
I．概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法
HPLC基础知识教程（十四）
V．HPLC应用 一、样品测定 1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱
HPLC部分问题解答
1、除了流速外，还有哪些因素能引起压力改变? 改变流动相组成和温度;改变柱长、柱内径和填料粒度;柱突然阻塞压力升高(正常情况下其它条件不变柱压都是逐渐升高的)。2、什么是强溶剂、弱溶剂? 改变流动相的组成或溶剂溶剂强度就可以改变峰容量因子和保留时间。在一定条件下，减少保留时间或缩短分析时间的
离子色谱和HPLC的区别
从色谱原理上分类，离子色谱属液相色谱的一种，但由于离子色谱与普通高效液相色谱在结构和分析对象上有一些差异，一般作为独立的一个色谱大类考虑。离子色谱与高效液相色谱的差别主要体现在仪器结构和应用范围两个方面。 1)在仪器结构方面：离子色谱和高效液相色谱均有溶剂输送系统、进样系统、检测系统和信号记录
HPLC的维护与使用注意
HPLC以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广及分析检测限低等优势，在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。本文就液相色谱仪在实际操作时应注意的事项及维护做了简单介绍。 主要部件介绍 输液系统 输液系统主要包括在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置。在线
HPLC基础知识教程(十二)
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1．键合相的性质 目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷
HPLC固定相及应用范围
名称 别名 功能基团 正相 反相 离子对 应用 Silica -OH √ 非极性和中等极性以及非离子性有机化合物（HPLC固定相及应用范围（液相配件：高效液相
HPLC基础知识教程(三)
4．相平衡参数 分配系数(distributioncoefficient，K)——在一定温度下，化合物在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的浓度之比。K＝。 分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中，K有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数
HPLC与GC有什么差别？
HPLC可通过高效液相色谱(HPLC)被称为(高效液相色谱)也称为高压液相色谱法。与气相色谱最重要的区别如下：高效液相色谱流动相为液体（液-液分配原理）。GC的流动相（载气）为气体（气-液分配原理）。但是，这两项工作所采用的分离原理基本相同，都是用色谱理论分析的，都可以使用多种检测器，常用于定量分析
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话，最好还是用（水：乙腈=9：1）先冲洗一下，如果柱子里盐不冲洗干净的话，再用小极性的流动相冲柱子时，盐就会析出，影响色谱柱寿命。要是没有盐的话，就无所谓了，用甲醇乙腈冲洗都行，冲洗到什么程度，主要看柱压是否已经回落，稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙腈最好）中，避
水质对－HPLC－分析的影响
简介： 优化的高效液相色谱法分析需要高纯度溶剂和试剂。同时，在流动相准备阶段，色谱柱中盐和有机溶剂的选择十分谨慎，所以水质是非常重要的。在洗脱液中，中痕量有机物的存在可能会导致长期不好的结果。随着时间推移，柱效可能会阻塞，导致分辨率降低，峰拖尾。大量实验表明，水中的有机物可能极大地影响液相色谱
做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰，顾名思义，就是指在相同的色谱条件下，有时候出现，有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的，查询了相关文献，结合本人以往的经验，来谈谈鬼峰的成因及应对策略，主要体现在以下几个方面：1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时，由于开始时有机相比例不高，洗脱能力不强，部分杂质在便富集在色谱
HPLC组分的快速冻干法
分析测试百科网讯 Genevac的系列3 HT蒸发器的快速冻干功能是为了提供一种快速、高通量可以替代冷冻干燥的HPLC纯化组分的方法而开发的。 传统的蒸发去溶剂方法，例如水和乙腈，通常会因为溶剂与样品的相互作用而形成胶状或油状物质。采用系列3 HT蒸发器的LyoSpeed™快速冻干技术，使得制
液相色谱（HPLC）入门（一）
什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料，粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
HPLC基础知识教程（九）
5）、池体积：除制备色谱外，大多数HPLC检测器的池体积都小于10µ；l。在使用细管径柱时，池体积应减少到1~2µ；l甚至更低，不然检测系统带来的峰扩张问题就会很严重。而且这时池体、检测器与色谱柱的连接、接头等都要精心设计，否则会严重影响柱效和灵敏度。 3．紫外检测器(ul