IDMS法测定血清中的生长激素
图1. 生长激素的IDMS测定法示意图：将“指纹碎片”T6以胰蛋白酶进行蛋白质水解，并对分析溶质予以富集后，借助于RP-LC-MS/MS进行定量测定。 在医学上，为了进行早期诊断以及对疾病进行医疗控制，经常需要对血清中的所谓标记蛋白质进行量化。这些蛋白质分子尺寸微小，结构复杂，血清蛋白浓度需在超过10个数量级的动态范围中进行定量测定，为准确的分析方法建立提出了挑战。 人类的生长激素由脑垂体产生，这是一种由多种蛋白变异体（亚型）构成的异质性产物。除了22 kDa（千道尔顿）分子量的主要组分外，还具有20 kDa分子量的亚型以及更小的变异体。由于生长激素的供应不足会导致儿童侏儒症，而供应过度又会造成成年人肢端肥大症或儿童巨人症，生长激素的测定被用于对疾病进行诊断。在生长激素定量测定的例行分析方法中，免疫测试法并未将亚型加以区分，这样做虽然灵敏度较高，然而可能存在因试剂盒不同而导致结果偏差较大的缺点......阅读全文
IDMS法测定血清中的生长激素
图1. 生长激素的IDMS测定法示意图：将“指纹碎片”T6以胰蛋白酶进行蛋白质水解，并对分析溶质予以富集后，借助于RP-LC-MS/MS进行定量测定。 在医学上，为了进行早期诊断以及对疾病进行医疗控制，经常需要对血清中的所谓标记蛋白质进行量化。这些蛋白质分子尺寸微小，结构复杂，血清
抗血清制备法生化检验
抗血清制备法：抗血清指含有抗体的血清。传统的抗血清制备方法是将某种抗原通过多次注入动物，数十天后或数月后，采集动物血，立即分离出血清。此抗血清在保存或应用前必须作效价和特异性鉴定及纯化。（一）免疫动物的选择免疫动物的选择基本要求：1.抗原与免疫动物的种属差异越远越好。2.动物必须适龄、健壮、无感染、
血清IgG的分离制备—盐析法
原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称IgG）的主要成分之一，分子量约为15万~16万，沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种，要从血浆中分离出IgG，首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序，使IgG在样品中比例大为增高，
霍乱弧菌的血清凝集法检测
根据弧菌O抗原不同，分成Ⅵ个血清群，第Ⅰ群包括霍乱弧菌的两个生物型。第Ⅰ群A、B、C三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型：含AC者为原型（又称稻叶型），含AB者为异型（又称小川型），A、B、C均有者称中间型（彦岛型）。 1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株（01
血清学筛选克隆新抗原/新基因——血清学筛选法
通过以血清的各种反应为中心的机体免疫反应和变态反应的研究体系来筛选新抗原和新基因。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒TBST 裂解液 血清 NZY top IPTG 一抗 二抗 SM 封闭液 MgSO4 LB AP BCIP-NBT 显色液仪器、耗材硝酸纤维素膜 滤纸 冰箱 培养箱 水浴锅 平板 脱色摇床
用顺序浮选法快速分离血清脂蛋白
用超速离心机分离血清脂蛋白，常用顺序浮选法（Sequence floating）和单次垂直管分离法(SVS),各种转速和容量都可以做，下面介绍一种简单、快捷的微量固定角式转头分离法，结果可供研究与临床分析。 一）设备：● 日立CS150GXL 制备型微量超速离心机● 转头：S140AT 固定角式转头
大鼠血清淀粉样蛋白(SAA)ELISA检测法
大鼠血清淀粉样蛋白(SAA)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 SAA 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 SAA与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠SAA，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Str
磷钨酸还原法检测血清尿酸（UA）实验
实验方法原理去蛋白血滤液中的尿酸在碱性溶液中被钨酸氧化成尿囊素及二氧化碳，磷钨酸在此反应中则被还原成钨兰，钨兰的生成量与反应液中尿酸含量成正比，可进行比色测定。实验步骤一、实验试剂：1. 磷钨酸贮存液：称取钨酸钠50g，溶于约400ml蒸馏水，加浓磷酸40ml及玻璃数粒，煮沸回流水冷却至室温，用蒸馏
磷钨酸还原法检测血清尿酸（UA）实验
实验方法原理去蛋白血滤液中的尿酸在碱性溶液中被钨酸氧化成尿囊素及二氧化碳，磷钨酸在此反应中则被还原成钨兰，钨兰的生成量与反应液中尿酸含量成正比，可进行比色测定。实验步骤一、实验试剂：1. 磷钨酸贮存液：称取钨酸钠50g，溶于约400ml蒸馏水，加浓磷酸40ml及玻璃数粒，煮沸回流水冷却至室温，用蒸馏
病毒中和实验_固定病毒－稀释抗血清法
中和试验 (neutralization test)是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物，使病毒与抗体相互反应，再将混合物接种到敏感的宿主体内，然后测定残存的病毒感染力的一种方法。凡是能与病毒结合，并使其失去感染力的抗体称为中和抗体。因为病毒要依赖于活的宿主系统复制增殖，因此，中和试验必须
双缩脲法血清总蛋白测定实验
实验方法原理 凡分子中含有两个甲酰胺基（－CONH2－）的化合物都能与碱性铜溶液作用，形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健（－CONH2－）都能起此反应，而且各种血浆蛋白显色程度基本相同．实验步骤 一、实验操作：按表进行混匀，置25℃30min。（37℃10min）在波长540
双缩脲法血清总蛋白测定实验
实验方法原理凡分子中含有两个甲酰胺基（－CONH2－）的化合物都能与碱性铜溶液作用，形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健（－CONH2－）都能起此反应，而且各种血浆蛋白显色程度基本相同．实验步骤一、实验操作：按表进行混匀，置25℃30min。（37℃10min）在波长540nm
血清脂蛋白电泳法的操作与增速
血清脂蛋白电泳法是近些年临床上经常采用的一种检验方法，由于其分离和显色效果均不是很满意，目前不少实验室已废弃脂蛋白电泳法，改用脂蛋白胆固醇和载脂蛋白测定。 在国外，脂蛋白电泳方法已商品化，在分析速度精度等方面均可满足常规应用。参照有关方法和技术[1,5]，我们得到了一种适合于国
乙酸丙酮法血清甘油三酯测定实验
实验方法原理 本法用异丙醇抽提血清TG，氧化铝吸附磷脂及游离甘油氢氧化钾皂化，过碘酸钠氧化生成甲醛，甲醛与乙酸丙酮在氨离子存在下加热生成黄色的 3，5二乙酰-1，4二甲基吡啶〔Hantgsch止反应）显色程度与标本中TG浓度成正比。实验步骤 一、实验试剂：1. 异丙醇（分析试剂）2. 氧化铝（中性、
乙酸丙酮法血清甘油三酯测定实验
实验方法原理本法用异丙醇抽提血清TG，氧化铝吸附磷脂及游离甘油氢氧化钾皂化，过碘酸钠氧化生成甲醛，甲醛与乙酸丙酮在氨离子存在下加热生成黄色的 3，5二乙酰-1，4二甲基吡啶〔Hantgsch止反应）显色程度与标本中TG浓度成正比。实验步骤一、实验试剂：1. 异丙醇（分析试剂）2. 氧化铝（中性、层分
病毒中和实验_固定抗血清－稀释病毒法
实验材料已知标准的抗病毒血清 (20抗体单位 0. 1 ml)试剂、试剂盒已知阴性血清 (56℃ 30 min 灭活）宿主：敏感细胞、敏感动物、鸡胚仪器、耗材细胞培养板水浴锅细胞培养箱实验步骤（以细胞培养为例）：①用细胞维持液连续 10倍稀释病毒分离物10-1~10-8);②取 0. 6ml不同浓度
化学发光免疫法与放射免疫法检测血清AFP的比较
摘要 本文采用放射免疫法和化学发光免疫法平行测定60例临床送检血清标本的甲胎蛋白(AFP)含量，结果表明两法的相关性良好(r＝0.995)，但化学发光免疫法的精密度和准确性均优于放射免疫法。 关键词 化学发光免疫法 放射免疫法 甲胎蛋白 临床检测血清AFP常规多采用放射免疫法，而近年发展
血清融化三步法为什么对胎牛血清更好呢？重点有二！
一：关系到沉淀出现的几率！ 记得吗？血清在融化过程中，瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝在下沉，如同蜂蜜溶于水时的亮线，这就是血清中大量的蛋白在快速融化，而水的熔点高于蛋白，融化的速度是比蛋白慢的。 （回想一下高级冰淇淋和大棒冰的区别，你懂得！） 试想，如果采用4℃过夜的方法，1瓶500毫升的血清
血清脂蛋白的快速离心分离法
血清脂蛋白的快速离心分离法 YU.2003.7利用不同容量的角式转头及很容易配制的梯度液，在各种型号的超速离心机上都能得到满意的分离结果。下面举了几个分离实例，实际上还可以应用于各种
酚试剂（Lowry）法测血清蛋白质含量
一、 相关理论1、 血清（浆）蛋白质是血清（浆）固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化和物。2、 血清（浆）蛋白质的分类：目前已研究的有300 余种，已分离提纯的有100 余种，大部分在肝脏合成。1） 盐析法可将血浆蛋白分为白蛋白（Albumin, Alb 或A）和球蛋白（Globulin,
血清脂蛋白的快速离心分离法
利用不同容量的角式转头及很容易配制的梯度液，在各种型号的超速离心机上都能得到满意的分离结果。下面举了几个分离实例，实际上还可以应用于各种型号各种容量的固定角式转头。（一） 梯度液A液：11.40gNacl，0.1g EDTA-Na2，置于1000ml量筒中加入500ml重蒸水及1ml 1N Na
辛酸硫酸铵法从人血清中纯化IgG
一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白，辛酸为短链脂肪酸，在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质；第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来，操作步骤如图3-10所示。
志贺菌属血清凝集法的检验方法介绍
志贺氏菌有 K和O抗原而无H抗原。K抗原是自患者新分离的某些菌株的菌体表面抗原，不耐热，加热100℃1小时被破坏。K抗原在血清学分型上无意义，但可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应。根据志贺氏菌抗原构造的不同，可分为四群48个血清型（包括亚型）。 （1)A群：又称痢疾志贺氏菌(Sh.dysent
脑膜炎奈瑟菌的血清凝集法介绍
根据荚膜多糖可将脑膜炎奈瑟氏菌分为A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、L、H、I、K等13个血清群，其中A、B、C群最为多见，约占90%。 关于血清凝集法用的诊断血清方面，推荐天津生物芯片公司生产的脑膜炎奈瑟氏菌全套诊断血清产品。这套产品除了包含脑膜炎奈瑟氏菌菌10个常见血清群的诊断
胶体金法和化学发光免疫法联合检测血清β―HCG、假阳性分析
人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，HCG）是受精卵着床后由胎盘合体滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素，分子量为3868.8u，结构中包括β链和α链2条非共价结合的亚基。α链亚基与黄体生成素（LH）、促卵泡成熟激素（FSH）、促甲状腺成熟激素（TSH）的α
透射比浊法(turbidimetry)测定血清C3含量
1、原理血样本中C3与抗C3血清在液相中反应，比例合适时形成可溶性免疫复合物。聚乙二醇（PEG6 000）可沉淀其免疫复合物，使溶液的透光率（T）下降。免疫复合物的量与C3和抗C3量呈函数关系，当固定抗C3浓度时，免疫复合物的形成量主要取决于样本中C3的含量，并与其呈正相关。故通过检测溶液吸光度
脑膜炎奈瑟氏菌的血清凝集法检查
根据荚膜多糖可将脑膜炎奈瑟氏菌分为A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、L、H、I、K等13个血清群，其中A、B、C群最为多见，约占90%。 关于血清凝集法用的诊断血清方面，推荐天津生物芯片公司生产的脑膜炎奈瑟氏菌全套诊断血清产品。这套产品除了包含脑膜炎奈瑟氏菌菌10个常见血清群的诊断
血清白蛋白和球蛋白的分析测定－盐析法
【目的与原理]】掌握血清白蛋白和球蛋白测定的原理和方法，并用盐析法测定水产动物血清中白蛋白和球蛋白的含量。血清中含有多种不同成分的蛋白质，主要为白蛋白和球蛋白。用盐析法沉淀血清中球蛋白，用双缩脲法测定上清液中白蛋白，同时测定血清总蛋白。血清球蛋白的量从两者的差值求得。【[试剂与器材】试剂： 1、
豚鼠的取血法及血清和血浆的制备方法
一、豚鼠的取血法（1）足背中静脉取血：助手固定动物，将其后肢膝关节伸直捉到实验者面前，实验者将动物脚背面用酒精消毒，找出背中足静脉后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿注射器针刺入静脉。拔针后立即出血，呈半球状的隆起。采血后，用纱布或脱脂棉压迫止血。反复取血时，两后肢交替使用。（2）心脏取血：
血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定（凝胶层析法）2
（5）20%磺基水杨酸溶液（6）奈氏(Nessler)试剂应用液贮存液；称取碘化钾(KI)7.58g于250ml三角烧瓶中，用蒸馏水5ml溶解，再加入碘（I2） 5.5g溶解，加7～7.5gHg用力振摇10min(此时产生高热，须冷却)，直至棕红色的碘转变成带绿色的碘化汞钾液为止，过滤上清液倾入