舟山眼镜蛇毒细胞毒素的分离纯化及其体外抗肿瘤活性
摘 要:目的 从眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素2F(CTX2F) 并鉴定其活性。方法 应用凝胶过滤、离子交换柱色谱及疏水柱色谱等方法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化CTX2F ,以SRB 法观察CTX2F 对体外培养癌细胞的杀伤作用。结果 眼镜蛇毒粗毒经凝胶过滤获得4 个蛋白峰,将CTX所在第Ⅳ峰用阳离子交换柱色谱获A、B、C、D、E、F 和G等7 个组分,其中E、F 和G具CTX 活性,将F 组分再经凝胶过滤和疏水色谱进一步纯化得不含磷酯酶A2 (PLA2 ) 的CTX纯品,暂定名为CTX2F ,它对多种癌细胞株有杀伤作用。结论应用凝胶过滤、离子交换和疏水色谱等方法可从眼镜蛇毒中获得不含PLA2 的CTX,其组分F 有抗肿瘤活性。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响..
凝胶过滤色谱、离子交换色谱和疏水作用色谱的主要影响因素一、凝胶过滤色谱:一般来说,凝胶过滤色谱的结果好坏直接取决于凝胶柱的柱效(每米多少理论塔板数),而影响柱效的因素主要有:1、凝胶本身性质:每一种凝胶均有其合适的分离范围,应选择合适的凝胶进行分离。同样分离范围的凝胶颗粒越细的,柱效越高。2、色谱柱
凝胶过滤色谱
根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。
下游纯化工艺简介4
2、离子交换色谱(ion exchange chromatography)蛋白质、多肽均属于两性电解质,在缓冲液pH小于其等电点时,带净正电荷,而在缓冲液pH大于其等电点时,带净负电荷。阴离子交换凝胶本身带有正电荷基团,阳离子交换凝胶本身带负电荷基团。由于静电相互作用而使样品结合到凝胶上,再采用盐浓
银环蛇毒素的毒素作用机理
β-BuTx主要作用于神经系统,在外周神经系统中它能不可逆地阻断神经肌肉的兴奋传递;在中枢神经系统中它能特异地抑制某些神经元突触前膜递质的释放。为了进一步研究β-BuTx对中枢神经系统的作用机理,大多数实验研究都是在分离出的突触体上进行的。β-BGT主要作用于神经系统,在外周神经系统中不可逆地阻
凝胶过滤色谱柱
凝胶过滤色谱柱如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分
凝胶过滤色谱与凝胶渗透色谱的区别
凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱,以有机溶剂为流动相的,称作凝胶渗透色谱。
凝胶过滤色谱-与凝胶渗透色谱的区别
凝胶过滤色谱 与凝胶渗透色谱的区别是凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱,以有机溶剂为流动相的,称作凝胶渗透色谱。
简述银环蛇毒素的应用
蛇毒神经毒素能抑制中枢神经系统,尤其是延髓呼吸中枢,对周围神经系统的作用主要是阻断神经-肌肉接头处冲动的传导,导致骨骼肌尤其是呼吸肌瘫痪。林鲁萍等采用小鼠化学法镇痛试验表明,重组α-银环蛇毒素有一定的镇痛药效,在外周镇痛作用中呈一定的量效关系。于是人们根据蛇毒α-神经毒素这一性质开发出了不成瘾的
被咬伤后用它对抗眼镜蛇毒
一项发表于《科学-转化医学》的研究发现,一种常用的血液稀释剂可以防止成千上万的人在被眼镜蛇咬伤后截肢。蛇咬伤每年造成多达13.8万人死亡,主要发生在撒哈拉以南非洲、南亚和东南亚。另有40万人出现并发症,如身体组织死亡,留下永久性疤痕,或者截肢后变成残疾,失去生计。一种黑颈射毒眼镜蛇,主要分布于撒哈拉
抗眼镜蛇毒血清的用法用量
用法:通常采用静脉注射,也可作肌内或皮下注射,一次完成。 用量:一般蝮蛇咬伤 注射抗蝮蛇毒血清6000U;五步蛇咬伤 注射抗五步蛇毒血清8000U;银环蛇或眼镜蛇咬伤 注射抗银环蛇毒血清10000U或抗眼镜蛇毒血清2000IU。以上剂量约可中和一条相应蛇的排毒量。视病情可酌情增减。 注射前
凝胶渗透色谱GPC/凝胶过滤色谱GFC基础知识
凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography, GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定,而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开),优点是:保留时间短,
凝胶过滤色谱仪分类
凝胶过滤色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室凝胶过滤色谱仪和工业凝胶过滤色谱仪。2、按功能可分:分析型凝胶过滤色谱仪和制备型凝胶过滤色谱仪。3、按灵敏性可分:微量凝胶过滤色谱仪和痕量凝胶过滤色谱仪。4、按产地可分:国产凝胶过滤色谱仪和进口凝胶过滤色谱仪。5、按使用范围可分:专用型凝胶过滤色谱
眼镜王蛇毒可用于新型抗生素研制
近日,中科院昆明动物研究所开展的眼镜王蛇毒OH-CATH30抗菌肽及衍生物的体内药效学评价获新进展。相关研究成果已在线发表于美国著名药理学和药学杂志《抗微生物剂与化疗》上。该研究由博士生李盛安等人在研究员张云和李文辉带领下完成。 张云告诉《中国科学报》记者,感染是住院病人死亡的主要原因之
抗眼镜蛇毒血清的适应症
用于蛇咬伤者的治疗,其中蝮蛇毒血清,对竹叶青蛇和烙铁头蛇咬伤亦有疗效。咬伤后,应迅速注射本品,愈早愈好。
关于银环蛇毒素的来源介绍
银环蛇(Krait,Bunga rus Spp.)属动物界,脊索动物门,爬虫纲,有鳞目,眼镜蛇科,环蛇属。全身背面是黑白相间的环纹,具30~50个白色或乳黄色窄横纹,是世界十大毒蛇之一。主要分布在泰国、缅甸、印度、中国的南部和中国台湾等地,有12种亚种。其中分布在中国南部和中国台湾省的Bunga
简述银环蛇毒素的应用介绍
蛇毒神经毒素能抑制中枢神经系统,尤其是延髓呼吸中枢,对周围神经系统的作用主要是阻断神经-肌肉接头处冲动的传导,导致骨骼肌尤其是呼吸肌瘫痪。林鲁萍等采用小鼠化学法镇痛试验表明,重组α-银环蛇毒素有一定的镇痛药效,在外周镇痛作用中呈一定的量效关系。于是人们根据蛇毒α-神经毒素这一性质开发出了不成瘾的
关于银环蛇毒素的分离纯化介绍
从粗毒液中分离纯化毒素一般采取离子交换层析柱及高效液相层析法。将粗毒素溶于0.05mol/L pH值5.8醋酸铵中,加于CM-Sephadex C-25柱中,采用两相线性梯度醋酸铵洗液洗脱:Ⅰ为从50mmol/L(pH值5.8)到500mmol/L(pH值7.0),Ⅱ为从500mmol/L到1.
生物大分子的色谱纯化方法
一、生物大分子色谱纯化方法的选择思路通常在做纯化前对自己的目标物质特性了解越多对纯化将会越有利,如果不太了解,也可以通过电泳知道目标物质和杂质的情况,找到一种简单的鉴定方法,此外在纯化前必须先建立可靠的活性测定的方法。如果是未知的蛋白,那么通常可以有几种简单的摸索:1. 凝胶过滤色谱。这个方法很常用
凝胶过滤色谱柱用于体积排阻层析
体积排阻,也叫凝胶过滤,根据物质尺寸大小的不同分离。如果分子的尺寸大于树脂的最大孔径,这种分子就不能进入树脂颗粒内部,它所经过的有效体积最小,最先从洗脱液中流出。而小分子能够进入树脂的孔道中,经过的有效体积比较大,从洗脱液中流出较晚,分子量越小,流出越晚。 体积排阻层析可以用于纯化的*步,按分子量
关于银环蛇毒素的主要成分介绍
银环蛇毒素的主要成分为蛋白质和多肽,其中毒性成分主要是多种毒性多肽中的神经毒素(Tu A T,1996)。李镇源等曾先后报道了从台湾银环蛇中分离鉴定出α-银环蛇毒素(α-BGT)、β-银环蛇毒素(β-BGT)、κ-银环蛇毒素(κ-BGT)和一些酶类如磷脂酶A、凝血酶因子等。钱友存等通过RT-PC
关于银环蛇毒素的基本信息介绍
银环蛇毒液中所含毒素,主要成分为蛋白质和多肽,以神经毒素为主,包括α-银环蛇毒素(α-BGT)、β-银环蛇毒素(β-BGT)、κ-银环蛇毒素(κ-BGT)、γ-银环蛇毒素(γ-BGT)和磷脂酶A等酶类等。对人致死剂量约1mg。 毒腺分泌的蛇毒含多种多肽成分,具有不同的生物学活性。随着捕食者和被
简述银环蛇毒素的化学性质
根据神经毒素的作用靶点不同,把银环蛇神经毒素分为两类:一类为突触后神经毒素或α-神经毒素,这类毒素竞争性的与神经肌肉接头处的乙酰胆碱受体结合,阻断神经递质的传导;另一类为突触前神经毒素或β-神经毒素,其直接作用于运动神经突触前膜,阻断乙酰胆碱的释放,使骨骼肌失去收缩功能而麻痹。根据相对的分子质量
重组蛋白[Recombinant-Protein]纯化的基本策略
一、融合表达蛋白的纯化:融合表达蛋白可以在原目标分子之外带有GST肽段或(His)6肽段,从而使得可以分别用Glutathione Sepharose凝胶或Chelating Sepharose凝胶进行亲和色谱分子,一步可以达到~90%的纯度,经过特异蛋白酶切后,再进行离子交换及高分辨凝胶过
毒蛇咬伤怎么办?这些检测方法来支招
2025年6月2日,一名游客在海南三亚疑似遭遇蛇咬伤,自行处理伤口后就医,仍因病情恶化最终不幸离世。6月3日,三亚市卫健委通报事件,引发公众广泛关注。这一事件令人痛惜,更提醒我们:毒蛇咬伤是对生命的直接威胁。科学自救、快速识别和规范治疗,才能挽救生命。全球至少有768种有毒蛇类,被毒蛇咬死、咬伤也是
揭开蛇“毒”基因里演化的“秘密”
近日,中国科学院成都生物研究所李家堂研究团队基于多种高通量测序技术,组装了染色体水平的银环蛇参考基因组,同时结合多组织转录组,对银环蛇毒素基因家族的构成进行了深入探索,并进一步解析了眼镜蛇科毒液中重要毒素成分之一——三指毒家族的演化。相关研究成果以《三指毒亚家族的新发现及其结构和功能的分化》为题
凝胶过滤实验
操作采用分子筛层析获得的洗脱图谱如图 23.1 A 所 75。零 洗 脱 体 积 (zero elution volu m e ) 是指上样于层析固定相的样品体积。无法进入介质的分子的洗脱体积定义为无效体 积 V 。,它表示颗粒外部的体积。可以进人介质的分子的体积定义为总体积%, 它表示
凝胶过滤实验
蛋白质纯化的层析技术中,凝胶过滤比较独特,它是基于蛋白质分子质量的相对大小而分离。与传统的过滤相反,通过凝胶过滤柱后,并没有任何蛋白质留存于其中。凝胶过滤优缺点明显;优点在于,脆性蛋白质与层析固定相结合并不会破坏其功能;缺点在于,和凝胶不结合则限制层析的分辨率。作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来
凝胶过滤实验
实验步骤 操作 采用分子筛层析获得的洗脱图谱如图 23.1 A 所 75。零 洗 脱 体 积 (zero elution volu m e ) 是指上样于层析固定相的样品体积。无法进入介质的分子的洗脱体积定义为无效体 积 V
关于银环蛇毒素的免疫学特性介绍
α-BGT与乙酰胆碱受体结合的亲和力高,因此是研究乙酰胆碱受体结构的理想探针,可用于显示完整细胞膜表面乙酰胆碱受体的分布和密度,观察各种药物、毒物和其他致病因子对乙酰胆碱受体动力学变化的影响,也是从组织中分离和纯化乙酰胆碱受体的重要工具。20世纪70年代末,应用I125标记的α-BGT作配体来探
被蛇咬200次男子血清可抵御19种毒蛇毒液侵害
科学家利用一名被毒蛇咬过数百次的男子身上的抗体制成了一种有效的抗蛇毒血清。这种疗法可以保护老鼠免受包括眼镜王蛇在内的19种致命蛇类的毒液侵害。5月2日,相关研究成果发表于《细胞》。这种抗蛇毒血清结合了现有药物伐瑞拉迪(varespladib)和来自美国捕蛇者Tim Friede血液中的抗体。Frie