大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选
【实验目的】1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。【实验原理】在以微生物为材料的遗传学研究中，用某些物理因素或化学因素处理细菌，可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力，不能在基本培养基上生长，必须补充某些物质才能生长，称为营养缺陷型。实验室获得营养缺陷型菌株通过经过以下几个步骤：诱变处理、突变型筛选、缺陷型检出，缺陷型鉴定。诱变处理首先要选择诱变剂，诱变剂可分为物理和化学两类。微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。进行诱变处理时为了避免出现不纯的菌落，一般要求微生物呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液，分布均匀。试验表明处于对数生长期的细菌对诱变剂的反应最灵敏。诱变处理必须选择合适的剂量，不同微生物的最适处理剂量不同，须经预备实验确定。物理诱变的相对剂量与三个因素有关：诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)功率、处理时间，往往......阅读全文
大肠杆菌质粒DNA的提取实验_碱裂解法
实验方法原理碱法提取主要是利用共价闭合环状质粒与线性染色质在拓扑学上的差异来分离它们。在碱性pH环境，DNA变性，当恢复中性并在高盐离子浓度时，绝大多数质粒DNA可以准确复性，留在上清中；而线性染色体DNA不能准确复性，相互交联缠绕附着在细胞壁碎片上与蛋白质发生沉淀。离心后获得大量质粒的上清液，利用
大肠杆菌生化培养基的配方及原理
1、MR-VP培养基Methyl Red Voges Proskauer Broth用途： 用于大肠杆菌的甲基红和V-P试验(SN标准)。配方：（g/L） 原理： 甲基红（MR）试验：肠杆菌科的细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮酸再被分解，生成甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸。大肠杆菌
恒温震荡培养箱如何培养大肠杆菌
培养箱做不同菌的培养条件是不一样的，恒温震荡培养箱控温范围挺宽的，要是带制冷功能的话0℃-50℃，0-300rpm足够你用了。 恒温震荡培养箱我们俗称恒温摇床 摇床根据需要调节温度和转速就好了，大肠杆菌的zui适生长温度为37℃，生长温度范围为15-46℃，培养温度一般设置在36-37℃。
大肠杆菌转化实验所需材料和操作步骤
实验材料准备1. 器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5 ml 微量离心管，双面微量离心管架，干式恒温气浴（或恒温水浴锅），制冰机，恒温摇床，培养皿（已铺好固体LB-Amp），超净工作台，酒精灯，玻璃涂棒，恒温培养箱。2. 试剂培养基（不加抗菌素），LB培养基（加抗菌素），无菌ddH2O
植物基因在大肠杆菌中的原核表达
通过大肠杆菌表达目的基因大量获得重组蛋白是一个方便快捷的方法。植物中克隆的目的基因被克隆到特异设计的质粒载体上，受噬菌体T7强启动子控制；表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导。当需要表达蛋白时，在细菌培养基中加入IPTG来启动表达。不同载体在邻近克隆位点处具有编码不同的多肽“标签”的序
用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
实验概要了解细菌生长曲线的持点及测定原理，学会用比浊法测定细菌的生长曲线。实验原理将一定数量的细菌，接种于适宜的液体培养基中，在适温下培养，定时取样测数，以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定
致病性大肠杆菌性肠炎的发病机制
EPEC比较肯定的致病性是它们对肠道表面具有黏附能力。病原菌经口进入小肠，在十二指肠、空肠、回肠上段生长繁殖，紧密黏附于肠上皮细胞表面，或嵌入肠上皮细胞表面的凹陷中，使黏膜呈特征性损伤，局部微绒毛萎缩，肠功能紊乱，甚至导致肠黏膜坏死、溃疡，出现腹泻。此外，EPEC尚可产生非洲绿猴细胞毒素（VT）
大肠杆菌OD值与菌密度有何关系
OD值指的就是吸光度值，在一定范围内，液体中大肠杆菌的数量越多，那么这个液体的吸光度值也就越大。因此用吸光度值可以大致判断溶液中含有多少大肠杆菌。但是这只能粗略的判断。同时使用这种方法判断大肠杆菌数量也存在一个线性范围关系，液体中大肠杆菌数量太少或者太多都不能准确判断。
大肠杆菌感受态细胞制备和转化
实验概要转化是将外源基因引入受体细胞，使之获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术。转化过程所用的受体细胞经过一些特殊方法处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性改变，成为允许外源DNA分子进入的状态，这种细胞称为感受态细胞。进入受体细胞的DNA分子通过复制，
微生物实验大肠杆菌能水解淀粉吗
不能，淀粉水解实验，大肠杆菌没有圈，枯草芽孢杆菌有透明圈，基本说明大肠杆菌不水解淀粉。
大肠杆菌转化实验——高效率电转化法
实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LBSOC仪器、耗材电转化仪离心机分光光度计实验步骤1. 接种一个单菌落于5 ml LB培养液，37℃温和振摇培养5 h 或过夜。2. 将2.5 ml 培养物加人到盛有500 ml LB培养液的2 L 烧瓶中，37℃摇匀振荡培养至OD600为0.5~0.6。 3.
恒温震荡培养箱如何培养大肠杆菌
培养箱做不同菌的培养条件是不一样的，恒温震荡培养箱控温范围挺宽的，要是带制冷功能的话0℃-50℃，0-300rpm足够你用了。 恒温震荡培养箱我们俗称恒温摇床 摇床根据需要调节温度和转速就好了，大肠杆菌的zui适生长温度为37℃，生长温度范围为15-46℃，培养温度一般设置在36-37℃。
大肠杆菌检测培养基的配方及原理
1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)原 理： 月桂基硫酸钠，别名月桂醇硫酸钠，表面活性作用强，具有乳化作用。 一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等胰蛋白胨或胰酪胨 20g 提供碳源和氮源满
大肠杆菌乳糖操纵子的基团介绍
大肠杆菌乳糖操纵子包括4类基因： ①结构基因,能通过转录、翻译使细胞产生一定的酶系统和结构蛋白,这是与生物性状的发育和表型直接相关的基因。乳糖操纵子包含3个结构基因：lacZ、lacY、lacA。lacZ合成β—半乳糖苷酶,lacY合成β—半乳糖苷透过酶,lacA合成β—半乳糖苷乙酰基转移酶。
关于大肠杆菌的免疫磁珠法检测介绍
该分离技术的主要原理是以磁珠为载体和抗体，进行抗体和磁珠的结合，然后通过磁力技术完成力学的移动，进而分离大肠杆菌。与其他分离细菌的方式相比，这样的方式方法具有一定的优点，该技术可以提升样本中病原性弧菌的检测成功率，并且免疫磁珠技术可以于不同菌种中对不同的微生物进行处理，进而在很大程度上提高检测效
噬菌体侵染大肠杆菌的实验过程以及原理
将宿主大肠杆菌细胞分别放在含放射性同位素35S或32P的培养基中，用35S标记蛋白质，32P标记蛋DNA。宿主细胞在生长过程中就被35S或32P标记上了。然后用T2噬菌体分别感染被35S或32P标记的细菌，并在这些细菌中复制增殖。宿主菌裂解释放出很多子代噬菌体，这些子代噬菌体也被标记上35S或32P
噬菌体侵染大肠杆菌的实验过程以及原理
将宿主大肠杆菌细胞分别放在含放射性同位素35S或32P的培养基中，用35S标记蛋白质，32P标记蛋DNA。宿主细胞在生长过程中就被35S或32P标记上了。然后用T2噬菌体分别感染被35S或32P标记的细菌，并在这些细菌中复制增殖。宿主菌裂解释放出很多子代噬菌体，这些子代噬菌体也被标记上35S或32P
大肠杆菌的拓扑异构酶的相关介绍
大肠杆菌的拓扑异构酶II(gyrase)除了引入负超螺旋以外．还具有形成或拆开双链DNA环连体和成结分子的能力。II类拓扑异构酶没有碱基序列特异性，它们可以和任何相交的两对双链DNA结合。DNA旋转酶有两个α亚基和两个β亚基。α亚基约105KDa，为gyrA基因所编码，具有磷酸二脂酶活性，可为萘
大肠杆菌检测培养基的配方及原理
1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)原 理： 月桂基硫酸钠，别名月桂醇硫酸钠，表面活性作用强，具有乳化作用。 一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等胰蛋白胨或胰酪胨 20g 提供碳源和氮源满
T2噬菌体侵染大肠杆菌实验步骤
1、对噬菌体侵染细菌实验结果的表述没有抓住要害(45页)原文进一步观察发现：细菌裂解放出的噬菌体中，可以检测到32P标记的DNA，但却不能检测到35S标记的蛋白质。想一想，这一结果说明了什么？赫尔希和蔡斯的实验表明：噬菌体侵染细菌时，DNA进入到细菌的细胞中，而蛋白质外壳仍留在外面。因此子代噬菌体的
IPTG诱导大肠杆菌表达目标蛋白的作用原理
用乳糖操纵子作为启动子进行蛋白质表达的时候,需要诱导物进行诱导(相当于点火),但乳糖可以被细胞利用掉,所以利用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)在结构上与乳糖的相似性也可以将基因表达启动,但它不能被细胞利用掉,从而实现持续的表达.
大肠杆菌转化实验——一步法
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 TSS葡萄糖LB仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 按1：100的比例将过夜培养的菌液如人到新鲜的LB培养液中，于37℃培养至为OD600为0.3~0.4。 2. 加入等体积的2x SS于菌液中，在冰上温和地混匀。 3. 将10
饮用水中大肠杆菌及检测方法
在水淨化和污水处理领域，因大肠杆菌在粪便中数量极多，故常用为检查水源是否被粪便污染的标志，其测量标准爲大肠菌群指数。此外大肠杆菌多数情况下无害，不会从实验室「逃脱」而伤害人类。利用大肠杆菌作爲粪便污染的指示物也可能产生误导性的结论，因爲其它环境如造纸厂中，大肠杆菌也可大量存在。 一、大肠杆菌细菌
T2噬菌体侵染大肠杆菌实验步骤
第一步：噬菌体吸附在大肠杆菌上；第二步：噬菌体将自身遗传物质（DNA）注入大肠杆菌内部.侵染完成!
噬菌体侵染大肠杆菌的实验过程以及原理
将宿主大肠杆菌细胞分别放在含放射性同位素35S或32P的培养基中，用35S标记蛋白质，32P标记蛋DNA。宿主细胞在生长过程中就被35S或32P标记上了。然后用T2噬菌体分别感染被35S或32P标记的细菌，并在这些细菌中复制增殖。宿主菌裂解释放出很多子代噬菌体，这些子代噬菌体也被标记上35S或32P
大肠杆菌O157:H7的检验
出血性大肠杆菌O157:H7介绍 1、培养基制备：改良EC新生霉素增菌肉汤 （mEC）： EC肉汤灭菌后添加20mg/mL过滤除菌的新生霉素，使终浓度为20μg/mL。 改良山梨醇麦康凯琼脂（TC-SMAC）：山梨醇麦康凯琼脂加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液，使终浓度2.5mg/L，头孢克污，使终浓
用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
(一)实验目的 了解细菌生长曲线的持点及测定原理，学会用比浊法测定细菌的生长曲线。 (二)实验原理 将一定数量的细菌，接种于适宜的液体培养基中，在适温下培养，定时取样测数，以菌数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群
如何区分emb平板中大肠杆菌与产气肠杆菌
吲哚试验中,产生红色反应的是大肠杆菌,不能的为产气肠杆菌；甲基红试验,颜色由橙黄色变为红色的为大肠杆菌,不能的为产气肠杆菌；伏—普试验,有红色化合物产生的为产气肠杆菌,不能的为大肠杆菌；柠檬酸盐试验,深蓝色的为为产气肠杆菌,不能的为大肠杆菌.
关于大肠杆菌的流行病学介绍
区域分布 大肠杆菌的发生与流行感染是呈世界性分布的，但大肠杆菌的流行性还是存在一定的区域分布特征的。这些区域分布的特征在人的大肠杆菌感染中表现的更明显些，最大的可能是因为与区域间经济条件和社会卫生状况等有一定联系的 [1] 。 易感宿主 动物的大肠杆菌病可以发生在多种家畜、家禽、养殖经济动
大肠杆菌质粒DNA的提取实验_煮沸法
实验材料大肠杆菌细胞试剂、试剂盒溶菌酶仪器、耗材eppendorf管卫生纸STET溶液水浴锅牙签电泳实验步骤1、将1.5 ml培养液倒入eppendorf管中,4 ℃下12000ｇ离心30秒。2、弃上清，将管倒置于卫生纸上几分钟，使液体流尽。3、将菌体沉淀悬浮于120 ml STET溶液中, 涡旋混