特异性位点的DNA甲基化的检测方法
相关专题1 甲基化敏感性限制性内切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease，MS-RE)-PCR/Southern法这种方法利用甲基化敏感性限制性内切酶 对甲基化区的不切割的特性，将DNA消化为不同大小的片段后再进行分析。常使用的甲基化敏感的限制性内切酶有HpaⅡ-MspⅠ(识别序列CCGG)和SmaⅠ-Xmal(CCCGGG)等。由于后者识别的碱基数相对较多，其碱基序列在体内出现的概率相对较低，所以以前者即HpaⅡ-MspⅠ更常用。其中HpaⅡ和MspⅠ均能识别CCGG序列，然而当序列中的胞嘧啶发生甲基化时，HpaⅡ不切割，利用HpaⅡ-MspⅠ的这种属性处理DNA，随后进行Southern或PCR扩增分离产物，明确甲基化状态]。这是一种经典的甲基化研究方法，其优点是：相对简单,成本低廉，甲基化位点明确,实验结果易解释;缺点是：1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中，因此......阅读全文
ELISA试剂预防非特异性染色
非特异染色的原因包括一抗和二抗与血清蛋白的相互作用，抗体与组织之间的离子相互作用，以及与能够影响IHC检测系统的内源分子的相互作用。这些问题会产生高背景，以及无法在适当的细胞位置观察目的抗原。这种类型的染色问题可通过用封闭剂来封闭非特异相互作用来解决。在将样本与一抗共同孵育之前，可开展这些步骤：预防
组织特异性基因的生理功能
组织特异性基因（tissue-specific genes），或称奢侈基因（luxury genes），是指不同的细胞类型进行特异性表达的基因，其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构特征与特异的生理功能。
等位基因特异性PCR的应用
由于PCR过程中引物延伸是3'端开始的，所以3'末端的碱基对引物的延伸来说处于至关重要的位置。如果这个碱基与模板互补，则引物能从不间断延伸，PCR可以正常进行，得到特定长度扩增带。反之，则不能延伸。所以只要将与正常等位基因所不同的那个突变碱基安排在引物3'最末端，当用某一含突
非特异性酯酶染色实验
实验方法原理NAE将α－乙酸萘酚水解，产生α－萘酚，再与重氮盐偶联，生成不溶性的有色沉淀位于胞质中。试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液α－乙酸萘酚加重氮盐甲基绿水港派实验步骤一、 实验试剂：1. 作用液：l／20mol／L 磷酸盐缓冲液（PH7.4）40mg加10g／Lα－乙酸萘酚（以50％丙酮做溶剂）0.
特异性肺气肿的发病机制介绍
（Swyer-James综合征） Swyer和James（1953），首先报道此病，为1例6岁男孩。1954年Macleod报告了9例成人的类似患者，故此病也被称Macleods综合征或M-S-J综合征病理：主要表现为慢性炎症改变，无支气管狭窄、阻塞表现，此与先天性肺叶气肿不同；有肺动脉发育、且
等位基因特异性PCR的原理
等位基因特异性PCR（ allele specific PCR，AS-PCR ），是指利用引物与模板之间的碱基错配可以有效地抑制PCR反应，进而达到模板区分（等位基因区分）的目的。
特异性感染的临床表现
破伤风的潜伏期平均为6～10日，亦有短于24小时或长达20～30日，甚至数月，或仅在摘除存留体内多年的异物如子弹头或弹片后，才发生破 伤风。新生儿破伤风一般在断脐带后7月左右发病，故俗称“七日风”。一般来说，潜伏期或前驱症状持续时间越短，症状越严重，死亡率越高。 病人先有乏力、头晕、头痛、咬
特异性脱敏治疗采用的方法介绍
常采用的方法有三种：注射脱敏治疗过敏原注射脱敏治疗是指用过敏原提取物进行皮内注射。脱敏注射从小剂量开始，逐渐增加剂量，以增加对过敏原的耐受性。脱敏治疗一般至少需要2～3 年，长期的注射会带来一定痛苦。舌下含服脱敏治疗舌下含服脱敏治疗是将诱发过敏的物质(如尘螨活性蛋白)制成不同浓度的脱敏液，用患者能适
非特异性酯酶染色实验
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ELISA中分析非特异性显色
酶联免疫吸附试验(ELISA)自1971年自问世以来，以其敏感性高，特异性强，操作简便、安全，而广泛应用于临床诊断，开创了免疫学诊断的新纪元。但同其它免疫诊断方法一样酶免试剂在它的研究、生产及使用中常常会碰到非特异性问题。1、试剂盒特异性因素1、1 固相载体的选择。ELISA中常用的固相载体有微
基因的组织特异性表达的定义
克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体.组织特异性就是多细胞生物个体,每个组织具有与其它组织相区别的特征,组织特异性的存在是取决于构成该组织主要成分的细胞性质.而组织特异性表达克隆载体就是带有某种组织特殊的启动子,在该组织中才能表达
非特异性免疫的屏障结构
皮肤粘膜屏障：健康完整的皮肤和粘膜是阻止病原菌侵入的强有力屏障。汗腺分泌的乳酸，皮脂腺分泌的脂肪酸有一定抗菌作用。呼吸道和消化道粘膜有丰富的粘膜相关淋巴样组织和腺体，能分泌溶菌酶以及在胃酸、唾液、泪液等体液内均有SIgA等抗菌物质，表明粘膜屏障的重要性，已提出“粘膜免疫系统”的概念。血脑屏障：一般由
器官特异性自身免疫病介绍
组织器官的病理损害和功能障碍仅限于抗体或致敏淋巴细胞所针对的某一器官。主要有慢性淋巴细胞性甲状腺炎、甲状腺功能亢进、胰岛素依赖型糖尿病、重症肌无力、溃疡性结肠炎、恶性贫血伴慢性萎缩性胃炎、肺出血肾炎综合征、寻常天疱疮、类天疱疮、原发性胆汁性肝硬化、多发性脑脊髓硬化症、急性特发性多神经炎等，其中常
等位基因特异性PCR的功能
等位基因特异性PCR（ allele specific PCR，AS-PCR ），是指利用引物与模板之间的碱基错配可以有效地抑制PCR反应，进而达到模板区分（等位基因区分）的目的。
甲基化特异性的PCR检测
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变；随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物，如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段，则说明该位点存在甲基化；反之，说明被检测的位点不存在甲基化。
双特异性抗体：想说爱你口难开
目录 一、已上市品种市场表现平平 二、待上市品种前景并不美妙 三、在研品种原则上只能原地踏步 四、星星之火已经点燃 燎原之势其路漫漫 抗体药物里面的分支技术双特异性抗体（BiSpecific）药物过去几年绝对是红得发紫、火得发烫。只要是做药的人，感觉不知道这么个技术都不好出门；制药企业
前列腺特异性抗原的简介
医学术语，前列腺特异性抗原（Prostate specific antigen，PSA）是由前列腺上皮细胞合成分泌至精液中，是精浆的主要成分之一。在上个世纪60年代末，在研究免疫避孕过程中Hare等人发现，在前列腺液及精液中含有一种分子量大约34000的精液特异性蛋白质。1979年从前列腺组织中
等位基因特异性扩增法简介
等位基因特异性扩增法（allele -specific amplificarion,ASA) 是基于PCR技术的一种单核苷酸突变检测法，是分析已知碱基替代或微小片段缺失和插入型突变的常规技术。在PCR 的引物设计中，根据已知突变位点性质在引物3 ' 端或中间设计一错配碱基，使之仅能与突变
前列腺特异性抗原（PSA）简介
PSA检测方法：ELISA、RIA、荧光偏振免疫测定、免疫发光技术、自动化免疫分析等。 参考值：正常值0～4μg／L（EIA）；0～2.5μg／L（RIA）。 临床意义： （1）作为前列腺癌的辅助诊断项目。 （2）可用来监测前列腺癌疗效，判断预后。 常以>4μg／L作为前列腺癌的诊断标
几种生物大分子的特异性
[摘 要]本文将探讨高中生物教材上经常涉及到的几种生物大分子的特异性：载体蛋白的特异性、酶的特异性、DNA分子的特异性、受体的特异性以及抗原—抗体结合的特异性。 [关键词]特异性 生物大分子 选择透过性 诱导契合 碱基排序 配体 浆细胞 1.载体蛋白的特异性 载体蛋白是几乎所有
通用引物和特异性引物的区别
通用引物，含义为克隆位点两旁的序列匹配，目的是引扩出DNA片段，主要用来测序。而序列特异性引物指一种测定基因突变的方法。通用引物是一般和载体多克隆位点两旁的序列匹配，或者是与载体里面的一些启动、终止元件匹配。这样不管载体插入什么DNA片段，都可以用通用引物扩出来。通用引物可以用来测序，但是只是“通用
阿胶检测国家标准不具特异性
药食同源尴尬 阿胶是一种滋补品，又称驴皮胶，在我国有2500多年的历史。作为上品，自古以来，都是用于药用，1990年版、1995年版、2000年版《中华人民共和国药典》(下称《药典》)均有相关质量规定：以驴皮熬制的胶为阿胶正品。 但2002年2月28日，阿胶的这一定位开始改变。当日
肌炎特异性自身抗体的简介
多发性肌炎 (polymyositis, PM)是一种病因不明，主要损害近端横纹肌,以肌痛、肌无力、肌萎缩为主要表现的原发性炎性肌病。若伴有皮疹等皮肤表现则称为皮肌炎(der-matomyositis, DM)。PM/DM被普遍认为是一种自身免疫性疾病, 90%以上 PM/DM患者体内存在着抗细
新型纳米药物，特异性杀伤肿瘤细胞！
Dalhousie医学院的研究人员开发了一种运送化疗药物的新方式。利用纳米科技，这种新型药物运送系统仅仅在肿瘤细胞释放药物，从而保护健康细胞不受伤害。这项研究工作于近日发表在Scientific Reports杂志上。 Naga Puvvada博士是Dalhousie医学New Brunswi
MSP(甲基化特异性PCR)介绍
甲基化特异性 PCR(Methylmion Specific PCR，MSP)及其改进方法是检测基因甲基化的经典方法．MSP法的原理是首先用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶都被转化为 尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶则不变。然后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物并进行聚合酶链反应(P
肌炎特异性抗体可以预测肿瘤
精彩内容很多研究表明肿瘤与肌炎之间存在着相关性，但具体机理尚不明确。根据近20年的国内外文献报道，肿瘤在肌炎患者中的发生率为11%-36%，其中皮肌炎（DM）最为常见，多发性肌炎（PM）亦可见。由于肌炎合并肿瘤患者比单纯肌炎或肿瘤患者的生存率低，因此早期诊治对改善患者预后极为重要。常见肿瘤类型及发生
关于特异性IgE抗体的基本介绍
IgE主要来源于呼吸道、消化道黏膜下的浆细胞，是一种亲细胞性抗体，与变态反应、寄生虫病与皮肤过敏有关。另有一种能与某种过敏原特异性结合的IgE，称特异性IgE，对过敏性哮喘的诊断，其特异性强、敏感性高，对寻找变应原有重要意义。 血清免疫球蛋白E(IgE) 正常值为0.1-0.9mg/L。总Ig
关于特异性免疫的形成过程介绍
在抗原刺激下，机体的特异性免疫应答一般可分为感应、反应和效应3个阶段。分为三个阶段： 1.感应阶段是抗原处理、呈递和识别的阶段； 2.反应阶段是B细胞、T细胞增殖分化，以及记忆细胞形成的阶段； 3.效应阶段是效应T细胞、抗体和淋巴因子发挥免疫效应的阶段。 如果某些病原体突破了第一道和第二
关于病毒免疫的特异性免疫介绍
抗病毒的特异性免疫因有包膜病毒和无包膜病毒而异。有些病毒能迅速引起细胞破坏，释放病毒颗粒，称为细胞破坏型感染，有些病毒感染不引起细胞破坏称为细胞非破坏型感染，根据病毒感染类型的不同，在特异性体液免疫和细胞免疫的侧重性也不相同。 （一）体液免疫1.中和病毒作用 ；病毒的表面抗原刺激机体产生特异性
组织特异性基因是什么东西
1、持家基因(house-keeping genes)，又称管家基因，是指所有细胞中均要稳定表达的一类基因，其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。管家基因是一类始终保持着低水平的甲基化并且一直处于活性转录状态的基因。2、组织特异性基因（tissue