特异性位点的DNA甲基化的检测方法
相关专题1 甲基化敏感性限制性内切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease,MS-RE)-PCR/Southern法这种方法利用甲基化敏感性限制性内切酶 对甲基化区的不切割的特性,将DNA消化为不同大小的片段后再进行分析。常使用的甲基化敏感的限制性内切酶有HpaⅡ-MspⅠ(识别序列CCGG)和SmaⅠ-Xmal(CCCGGG)等。由于后者识别的碱基数相对较多,其碱基序列在体内出现的概率相对较低,所以以前者即HpaⅡ-MspⅠ更常用。其中HpaⅡ和MspⅠ均能识别CCGG序列,然而当序列中的胞嘧啶发生甲基化时,HpaⅡ不切割,利用HpaⅡ-MspⅠ的这种属性处理DNA,随后进行Southern或PCR扩增分离产物,明确甲基化状态]。这是一种经典的甲基化研究方法,其优点是:相对简单,成本低廉,甲基化位点明确,实验结果易解释;缺点是:1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中,因此......阅读全文
非特异性免疫的分类
固有免疫(非特异性免疫)系统包括:组织屏障(皮肤和黏膜系统、血脑屏障、胎盘屏障等);固有免疫细胞(吞噬细胞、杀伤细胞、树突状细胞等);固有免疫分子(补体、细胞因子、酶类物质等)。
什么是非特异性免疫?
非特异性免疫(英文:nonspecific immunity)又称先天免疫或固有免疫。它和特异性免疫一样都是人类在漫长进化过程中获得的一种遗传特性。非特异性免疫是人一生下来就具有,而特异性免疫需要经历一个过程才能获得。炎症反应是人一生下来就有的能力。 固有免疫对各种入侵的病原微生物能快速反应,同时在
酶的作用特点和特异性
酶是生物催化剂(biological catalyst),具有两方面的特性,既有与一般催化剂相同的催化性质,又具有一般催化剂所没有的生物大分子的特征。 酶与一般催化剂一样,只能催化热力学允许的化学反应,缩短达到化学平衡的时间,而不改变平衡点。酶作为催化剂在化学反应的前后没有质和量的改变。微量
更快、特异性更好的生物分析
位于英国亚伦维克的赛诺菲-安万特药物公司的药物代谢与药物代谢动力学部门,为全球各分公司的科学研究提供生物分析的技术支持。每天都需要分析各种各样生物样品:从早期的非临床、临床研究实验样品到后来的三期临床试验以及生物等效性实验样品等。面对生物分析中越来越多的挑战,该公司生物分析部门将TurboFlow在
简述特异性免疫的基本特性
特异性 1、具有特异性(或称专一性):机体的二次应答是针对再次进入机体的抗原,而不是针对其他初次进入机体的抗原; 免疫记忆 2、有免疫记忆:免疫系统对初次抗原刺激的信息可留下记忆,即淋巴细胞一部分成为效应细胞与入侵者作战并歼灭之,另一部分分化成为记忆细胞进入静止期,留待与再次与进入机体的相
前列腺特异性抗原-(PSA)
前列腺癌是出现在美国男性中的常见癌症,发病率大约为十分之一,即每十名男性中有一名患者。它也是导致美国男性死亡的第二大癌症。进行可靠的测试来发现早期的前列腺癌( 也就是当肿瘤只是局限在腺体中并且可以施以有效治疗措施的时候),这点对医师来说意义重大。 大多数前列腺癌的诊断早先都是在越出了腺体后
如何提高PCR的扩增特异性?
疫情当下,最热频的词汇莫过于核酸检测了。而核酸检测最核心的技术也越来越被大众所熟知,就是我们高中就学过的聚合酶链式反应,又称为PCR。 自从1983年,Kary Mullis才发明出这个用于扩增目标DNA的研究工具—PCR技术后,其逐渐成为分子生物学研究必不可少的一部分
非特异性抑制的概念
中文名称非特异性抑制英文名称non-specific inhibition定 义特指非特异性地对酶的抑制作用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
抗原的特异性由什么决定
抗原的特异性是由分子表面特定的化学基团所决定的,这些化学基团称为抗原决定簇。抗原决定簇是免疫应答和免疫反应具有特异性的物质基础。抗原决定簇可以是由连续序列(蛋白质一级结构)组成或由不连续的蛋白质三维结构组成,决定抗原性的特殊化学基团,又称抗原表位。抗原决定簇大多存在于抗原物质的表面,有些存在于抗原物
组织特异性基因敲除的定义
中文名称组织特异性基因敲除英文名称tissue-specific gene knockout定 义在特定组织细胞类型中使基因功能完全丧失的实验技术。应用学科遗传学(一级学科),发育遗传学(二级学科)
酶的特异性的选择类型
酶的特异性是指酶对底物的选择性,有以下三种类型:1.绝对特异性 酶只作用于特定结构的底物,生成一种特定结构的产物。如淀粉酶只作用淀粉。2.相对特异性 酶可作用于一类化合物或一种化学键。例如磷酸酶可作用于所有含磷酸酯键的化合物。 来源:考试大3.立体异构特异性 一种产仅作用于立体异构体中的一种。例如L
位点特异性重组的简介
位点特异性重组(site-specific recombination)是遗传重组的一类。这类重组依赖于小范围同源序列的联会,重组也只发生在同源的短序列的范围之内,需要位点特异性的蛋白质分子参与催化,重组的蛋白不是rec 系统而是int 等,如噬菌体l 的定点插入。重组时发生精确的切割、连接反应
非特异性免疫的特点
①作用范围广。机体对入侵抗原物质的清除没有特异的选择性。 ②反应快。抗原物质一旦接触机体,立即遭到机体的排斥和清除。 ③有相对的稳定性。既不受入侵抗原物质的影响,也不因入侵抗原物质的强弱或次数而有所增减。但是,当机体受到共同抗原或佐剂的作用时,也可增强免疫的能力。 ④有遗传性。生物体出生后
非特异性免疫的功能
发挥保护功能的几道屏障 首先是外围屏障。皮肤粘膜是机体第一道防线,包括:皮肤粘膜的机械阻挡作用和附属物(如纤毛)的清除作用;皮肤粘膜分泌物(如汗腺分泌的乳酸、胃粘膜分泌的胃酸等)的杀菌作用;体表和与外界相通的腔道中寄居的正常微生物丛对入侵微生物的拮抗作用等。其次是内部屏障。抗原物质一旦突破第一道
非特异性酯酶染色
【临床意义】 血细胞中所含酯酶各不一致,但皆系作用于短链脂肪酸的酯酶,统称非特异性酯酶。其显示方法是采用偶氮偶联法。由于提供水解的基质不同,血细胞中常见酯酶有以下几种: α-乙酸萘酚酯酶(α-naphthol acetate esterace,α-NAE) 乙酸AS-D萘酚酯酶(naphtho
非特异性什么意思
用简单的话说特异性就是有一定规律性,相对来说针对某地事物具有固定的特征。而非特异性就是不固定的,没有特征性的。
新型纳米药物,特异性杀伤肿瘤细胞!
Dalhousie医学院的研究人员开发了一种运送化疗药物的新方式。利用纳米科技,这种新型药物运送系统仅仅在肿瘤细胞释放药物,从而保护健康细胞不受伤害。这项研究工作于近日发表在Scientific Reports杂志上。 Naga Puvvada博士是Dalhousie医学New Brunswi
简述特异性IgE的临床意义
变态反应通常分为速发型、细胞毒型、免疫复合物型和迟发型4型。血清过敏原特异性IgE检测只能检测速发型变态反应,即Ⅰ型变态反应。Ⅰ型变态反应引起的反应包括: ①眼部:过敏性结膜炎; ②鼻部:过敏性鼻炎; ③气管、肺:过敏性哮喘、过敏性支气管肺曲霉病等; ④消化道:过敏性胃肠炎; ⑤皮肤:
细胞化学词汇织特异性消失基因
中文名称:组织特异性消失基因英文名称:tissue-specific extinguisher;TSE定 义:在体细胞杂交中杂种细胞失去的亲本细胞基因。一种在体细胞杂种中能对某些亲本细胞基因的转录起明显抑制作用的基因,其产物为依赖于环腺苷酸(cAMP)的蛋白激酶的调节亚基,通过环腺苷酸应答元件发挥
特异性氨基酸尿的诊断
诊断:(1)糙皮病样皮疹:皮肤暴露部位呈红色干燥有鳞屑或皲裂起泡和渗出有光敏感阳光晒后加重对烟酰胺治疗反应良好 (2)发作性小脑共济失调:多发生于疾病严重期表现为步态不稳四肢震颤可有不自主舞蹈状动作眼聚集力差眼球震颤常有复视严重者可有发作性虚脱或昏厥偶有精神症状和情绪不稳定幻觉谵妄或痴呆等发作
特异性氨基酸尿的鉴别
鉴别诊断:1. 肾性氨基酸尿(renal Aminoaciduria)是一组以近端肾小管对氨基酸转运障碍为主以致尿中排出大量氨基酸的肾小管疾病。 2. Hartnup病是一种遗传性氨基酸代谢病,又称遗传性菸酸缺乏症,或色氨酸加氧酶缺乏症。最早在1956年由Baron等报道发现于一个姓Hartn
分析特异性皮炎的形成病因
特异性皮炎与遗传因素、过敏因素都有着密切的关系。有资料研究表明,约有60%~90%患者受季节因素影响,冬天由于寒冷刺激,加上阳光照射时间少,衣物的摩擦等均可能成为特异性皮炎的诱发因素。瘙痒和摩擦会导致瘙痒--搔抓--发疹--瘙痒的循环。其他病因因素包括免疫反应异常、血管及血管药物反应异常、精神因
甲基化特异性的PCR检测
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物,如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段,则说明该位点存在甲基化;反之,说明被检测的位点不存在甲基化。
等位基因特异性PCR的功能
等位基因特异性PCR( allele specific PCR,AS-PCR ),是指利用引物与模板之间的碱基错配可以有效地抑制PCR反应,进而达到模板区分(等位基因区分)的目的。
特异性免疫的细胞免疫的介绍
病原菌侵入机体后主要停留在宿主细胞内者,称为胞内菌感染.例如结核杆菌、麻风杆菌、布氏杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、军团菌等,这些细菌可抵抗吞噬细胞的杀菌作用,宿主对胞内菌主要靠细胞免疫发挥防御功能。参与细胞免疫的T细胞主要是TD(CD4+)细胞和TC(CD8+)细胞。此外,分布在粘膜、皮下组织和小肠
非特特异性免疫缺陷的相关介绍
1 吞噬细胞缺陷病 --吞噬细胞包括组织中的吞噬细胞、单核细胞和血液中的中性粒细胞。先天性的吞噬细胞缺陷病主要指吞噬细胞的功能障碍引起的疾病,其相对发病率为1%~2%,最多见的为慢性肉芽肿病。 2 补体系统缺陷病 --该病是由于机体内补体成分的组分或它的调控蛋白发生遗传性缺陷所致。
增加PCR特异性的方法有哪些
预测一下扩增产物,在NCBI做一个primer blast如果需要设计定量PCR引物,可以在“引物库”中直接搜索,不用查找序列,设计引物,选择参数,确定引物等,输入基因名,直接提供引物序列,并进行非特异性检测
非特异性免疫的4意义
非特异性免疫是特异性免疫的基础,特异性免疫所产生的免疫物质又能增强非特异性免疫的作用。例如,巨噬细胞吞噬、加工、处理抗原物质,并把抗原传递给淋巴细胞,使其产生抗体或淋巴因子,加强杀伤靶细胞的能力。反过来,抗体和淋巴因子的产生也加强了巨噬细胞的趋化、活化和吞噬作用。因此,增强机体的非特异性免疫对提高机
简述特异性免疫的治疗机制
1、调节性T细胞对辅助性T细胞亚群(Th1/Th2)功能的调节; 2、“阻断抗体”理论:该理论认为由于IgG可以竞争性地阻断变应原与肥大细胞表面IgE的结合,从而避免肥大细胞的激活和炎性介质的释放; 3、对IgE的调节; 4、对效应细胞和炎症应答的抑制; 5、修饰树突状细胞(DC)诱导免
如何提高细胞检测技术的特异性?
提高细胞检测技术特异性的方法:优化抗体选择:选择具有高特异性和亲和力的抗体。可以通过比较不同克隆号、来源或经过严格验证的抗体来找到最适合的。多重标记策略:结合使用多种针对不同标志物的抗体,通过多个标志物的共表达来确认目标细胞,减少非特异性结合的影响。样本预处理:采用适当的方法纯化样本,去除杂质、细胞