特异性位点的DNA甲基化的检测方法

相关专题1 甲基化敏感性限制性内切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease,MS-RE)-PCR/Southern法这种方法利用甲基化敏感性限制性内切酶 对甲基化区的不切割的特性,将DNA消化为不同大小的片段后再进行分析。常使用的甲基化敏感的限制性内切酶有HpaⅡ-MspⅠ(识别序列CCGG)和SmaⅠ-Xmal(CCCGGG)等。由于后者识别的碱基数相对较多,其碱基序列在体内出现的概率相对较低,所以以前者即HpaⅡ-MspⅠ更常用。其中HpaⅡ和MspⅠ均能识别CCGG序列,然而当序列中的胞嘧啶发生甲基化时,HpaⅡ不切割,利用HpaⅡ-MspⅠ的这种属性处理DNA,随后进行Southern或PCR扩增分离产物,明确甲基化状态]。这是一种经典的甲基化研究方法,其优点是:相对简单,成本低廉,甲基化位点明确,实验结果易解释;缺点是:1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中,因此......阅读全文

通用引物和特异性引物的区别

通用引物,含义为克隆位点两旁的序列匹配,目的是引扩出DNA片段,主要用来测序。而序列特异性引物指一种测定基因突变的方法。通用引物是一般和载体多克隆位点两旁的序列匹配,或者是与载体里面的一些启动、终止元件匹配。这样不管载体插入什么DNA片段,都可以用通用引物扩出来。通用引物可以用来测序,但是只是“通用

关于组织多肽特异性抗原的简介

  组织多肽特异性抗原(tissue polypeptide specific antigen)是细胞角蛋白18片段上与M3单克隆抗体结合的抗原表位,称为M3抗原决定簇,由BjorklundB等鉴定于1990年。是一种新型的反映肿瘤细胞分裂增殖活性的肿瘤标志物,它在肿瘤的诊断、预告复发和转移、评价疗

非特异性免疫指标有哪些

非特异性免疫又称天然免疫或固有免疫。它和特异性免疫一样都是人类在漫长进化过程中获得的一种遗传特性,但是非特异性免疫是人一生下来就具有,而特异性免疫需要经历一个过程才能获得。比如猪瘟在猪群中传播很快,但和人类无缘。这是因为人类天生就不会得这种病;还有炎症反应也是人一生下来就有的能力。   固有免疫对各

MSP(甲基化特异性PCR)介绍

甲基化特异性 PCR(Methylmion Specific PCR,MSP)及其改进方法是检测基因甲基化的经典方法.MSP法的原理是首先用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶都被转化为 尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。然后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物并进行聚合酶链反应(P

抗原抗体特异性反应的基础

  抗原抗体反应的基础就是体内外抗原抗体可特异性的结合,这种特异性结合是通过氢键结合力、电荷引力、范德华力、疏水作用力等几种分子间引力相互作用的结果,这些力的合力,使在空间位置上的互补抗原抗体可以相互结合在一起,在适宜的条件下,出现肉眼可见的现象。

组织特异性基因是什么东西

1、持家基因(house-keeping genes),又称管家基因,是指所有细胞中均要稳定表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。管家基因是一类始终保持着低水平的甲基化并且一直处于活性转录状态的基因。2、组织特异性基因(tissue

肌炎特异性自身抗体的简介

  多发性肌炎 (polymyositis, PM)是一种病因不明,主要损害近端横纹肌,以肌痛、肌无力、肌萎缩为主要表现的原发性炎性肌病。若伴有皮疹等皮肤表现则称为皮肌炎(der-matomyositis, DM)。PM/DM被普遍认为是一种自身免疫性疾病, 90%以上 PM/DM患者体内存在着抗细

特异性氨基酸尿的鉴别

  鉴别诊断:1. 肾性氨基酸尿(renal Aminoaciduria)是一组以近端肾小管对氨基酸转运障碍为主以致尿中排出大量氨基酸的肾小管疾病。  2. Hartnup病是一种遗传性氨基酸代谢病,又称遗传性菸酸缺乏症,或色氨酸加氧酶缺乏症。最早在1956年由Baron等报道发现于一个姓Hartn

特异性免疫应答的主要特点

与固有免疫相比,特异性免疫应答有三个主要特点:1.特异性:特异性是指某一特定抗原刺激可以从免疫系统淋巴细胞库中选择出相应的T细胞或B细胞克隆,淋巴细胞与相应抗原的结合具有高度的特异性;多样性是指T细胞库或B细胞库呈高度的异质性,是许许多多特异性识别抗原细胞克隆的总和,赋予机体具有识别周围环境中数量极

非特特异性免疫缺陷的相关介绍

  1 吞噬细胞缺陷病  --吞噬细胞包括组织中的吞噬细胞、单核细胞和血液中的中性粒细胞。先天性的吞噬细胞缺陷病主要指吞噬细胞的功能障碍引起的疾病,其相对发病率为1%~2%,最多见的为慢性肉芽肿病。  2 补体系统缺陷病  --该病是由于机体内补体成分的组分或它的调控蛋白发生遗传性缺陷所致。

抗原特异性免疫应答的过程介绍

  适应性免疫应答的过程非常复杂,可分为以下三个阶层:  (1)感应阶段(识别阶段)  指抗原提成细胞(APC)摄取、加工处理与提呈抗原和T细胞、B细胞通过TCR、BCR特异性识别抗原肽阶段。  (2)反应阶段(活化、增殖和分化阶段)  反应阶段是指T细胞、B细胞特异性识别、接受抗原刺激后活化、增殖

如何利用已知基因设计特异性引物

首先在NCBI进行blast比对,找到基因的特异序列,与其他基因同源性低的区域,然后再这些区域设计引物。还有一种方法是先在基因上设计引物,然后再blast比对引物,看看在你的目的物种中是否有同源基因。

前列腺特异性抗原(PSA)简介

  PSA检测方法:ELISA、RIA、荧光偏振免疫测定、免疫发光技术、自动化免疫分析等。  参考值:正常值0~4μg/L(EIA);0~2.5μg/L(RIA)。  临床意义:  (1)作为前列腺癌的辅助诊断项目。  (2)可用来监测前列腺癌疗效,判断预后。  常以>4μg/L作为前列腺癌的诊断标

PCR反应的特异性决定因素

①引物与模板DNA特异正确的结合;②碱基配对原则;③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;④靶基因的特异性与保守性。其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及TaqDNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度

PCR特异性反应的原则问题

  ①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。  ②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。  ③引物碱基:参照引物设计的基本原则  ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。  

特异性免疫的体液免疫的相关介绍

  胞外菌感染的致病机制,主要是引起感染部位的组织破坏(炎症)和产生毒素。因此抗胞外菌感染的免疫应答在于排除细菌及中和其毒素。表现在以下几方面:  ⒈抑制细菌的吸附 ;病原菌对粘膜上皮细胞的吸附是感染的先决条件。这种吸附作用可被正常菌群阻挡,也可由某些局部因素如糖蛋白或酸碱度等抑制,尤其是分布在粘膜

提高细胞检测技术特异性的方法介绍

提高细胞检测技术特异性的方法:优化抗体选择:选择具有高特异性和亲和力的抗体。可以通过比较不同克隆号、来源或经过严格验证的抗体来找到最适合的。多重标记策略:结合使用多种针对不同标志物的抗体,通过多个标志物的共表达来确认目标细胞,减少非特异性结合的影响。样本预处理:采用适当的方法纯化样本,去除杂质、细胞

非特异性抑制的基本信息

中文名非特异性抑制外文名non-specific inhibition 定义特指非特异性地对酶的抑制作用应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)  

特异性高雪氏症的治疗方法介绍

  美国食品药品监督管理局于 1991 年批准上市了由胎盘中提取的葡萄糖脑苷脂酶,后于 1994 年又批准了以基因重组方法研制的葡萄糖脑苷脂酶[注射用伊米苷酶(Imiglucerase)],用于戈谢病的 ERT治疗。临床实践显示,伊米苷酶可明显改善Ⅰ型戈谢病患者的临床症状体征,维持正常生长发育,提高

最小化非特异性染色方法

Ⅰ、将经荧光标记的抗体进行稀释。如果浓度过高,背景会因为的非特异性的相互作用的增加而增加。Ⅱ、在使用第一抗体之前,将样品与过量的蛋白一起培育,如小牛血清蛋白(BSA),脱脂干奶酪,或来自于同一寄主的正常血清来作为标记的第二抗体。这个步骤通过阻断第一抗体和细胞表面或胞内结构的非特异性的交互作用来降低背

原发性特异性免疫缺陷病的简介

  原发性免疫缺陷病是免疫系统先天性发育不全所致,根据所累及的免疫细胞或组分可以是特异性免疫缺陷,如B细胞或T细胞缺陷、两者联合缺陷等;也可以是非特异性效应机制的缺陷,如补体或中性粒细胞缺陷。

分子遗传学词汇组织特异性基因

中文名称:组织特异性基因外文名称:tissue-specific genes别    名:奢侈基因定    义:不同的细胞类型进行特异性表达的基因,其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构特征与特异的生理功能。释    义:组织特异性基因(tissue-specific genes),或称奢侈基因(lu

非特异性抑制剂的概念

中文名称非特异性抑制剂英文名称non-specific inhibitor定  义特指能对酶产生非特异性抑制作用的化合物。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

特异性感染的主要病因是什么

  破伤风是由破伤风杆菌侵入体伤口,生长繁殖,产生毒素,所引起的一种急性特异性感染。破伤风杆菌广泛存在于泥土和人畜粪便中,是一种革兰氏染色阳性厌氧性芽胞杆菌。破伤风杆菌及其毒素都不能侵入  正常的皮肤和,故破伤风都发生在伤后。一切开放性损伤如炎器伤、开放性骨折、烧伤,甚至细小的伤口如林刺或锈钉刺伤,

Nat-Commun:抗菌免疫反应如何保持特异性?

  一些类型的葡萄球菌能够在人体皮肤以及粘膜层生长,并且保持与宿主彼此之间相安无事。但其它一类型的则存在于土壤以及水环境中。当我们机体遇到上述细菌的时候,免疫系统会激活以消除任何可能的感染。但免疫系统究竟是如何分辨有害的病原菌以及无害的共生菌的呢?最近来自Tübingen大学的Friedrich G

关于特异性免疫的体液免疫的介绍

  胞外菌感染的致病机制,主要是引起感染部位的组织破坏(炎症)和产生毒素。因此抗胞外菌感染的免疫应答在于排除细菌及中和其毒素。表现在以下几方面:  ⒈抑制细菌的吸附 ;病原菌对粘膜上皮细胞的吸附是感染的先决条件。这种吸附作用可被正常菌群阻挡,也可由某些局部因素如糖蛋白或酸碱度等抑制,尤其是分布在粘膜

非特异性免疫的基本内容

  非特异性免疫(英文:nonspecific immunity;innate immunity)又称先天免疫或固有免疫,指机体先天具有的正常的生理防御功能,对各种不同的病原微生物和异物的入侵都能作出相应的免疫应答。它和特异性免疫一样都是人类在漫长进化过程中获得的一种遗传特性。  非特异性免疫是人一

特异性脂酶染色的临床意义

  特异性酯酶又称粒细胞酯酶,主要分布在粒细胞和肥大细胞内。原粒细胞为阴性或弱阳性反应,早幼粒细胞和中幼粒细胞呈强阳性反应,分叶核粒细胞酶活性减弱。嗜酸性粒细胞呈阴性,嗜碱性粒细胞、单核细胞和肥大细胞呈阴性或弱阳性反应。巨核细胞、血小板、浆细胞、红系细胞及淋细胞呈阴性。  本染色法主要用于鉴别急性白

抗原的异物性与特异性分析原理

抗原的异物性与特异性分析原理(一)抗原的两重特性:免疫原性(immunogenicity)。抗原性(antigenicity)。(二)半抗原(hapten)和载体。抗原的异物性与特异性(一) 异物性抗原的免疫原性的本质是异物性,异物性越强,其免疫原性就越强。自身物质在一定情况下也具有免疫原性。(二)

如何诊断非特异性尿道炎?

  尿道炎的诊断主要根据病史及尿道分泌物的检查。男性患者可用三杯试验确定尿道炎的部位。男性慢性尿道炎患者须行前列腺检查,必要时可作尿道镜检或膀胱镜检,以观察后尿道情况。女性患者须行妇科检查,以明确有无阴道炎和宫颈炎等。