从精子中提取DNA的方法
步骤：1、从棉签上取下有检材的棉花并置于1.5塑料离心管中。2、管中加入400微升TNE缓冲液；25%微升sarcosyl（硅鱼精）；75微升水；5微升蛋白酶K溶液手混匀，37度保温2小时。3、用一新的灭菌牙签将棉花拧干后管中取出,再用12000rpm离心5分钟。4、.移上清液(内含裂解细胞或雌性片段)于一新的15微升管，不要震荡沉淀物（内含非裂解细胞或精子），再用TNE洗脱四次。5、在有沉淀物的管中加入10微升TNE；20%sarcosyl（硅鱼精）；40微升DTT；151微升水；10微升蛋白酶K溶液；手摇混匀，37度保温2小时。 ......阅读全文
重组DNA转化
目的：在体外连接组装而成的重组DNA分子只能转入合适的受体细胞，才能大量地进行复制、增殖和表达。通过实验学会重组DNA转化的最基本的操作以及如何提高转化效率的基本思路。 原理：带有外源DNA片段的重组体分子在体外构建成后，需要导入适当的宿主细胞内进行繁殖或表达出具有一定生物活性的蛋白。能够作为重组体
纯化DNA实验
从哺乳动物细胞或组织分离DNA 基因组DNA的快速纯化 纯化质粒（碱裂解法） 实验材料 细胞
DEPHOSPHORYLATION－OF－LINEARIZED－DNA
DEPHOSPHORYLATION OF LINEARIZED DNAALKALINE PHOSPATASE(CIP) DIGESTIONDigestion of protruding 5'-ends1. Precipitate digested DNA and resuspend in a
DNA测序仪
DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括sanger双脱氧链终止法和maxam-gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今 dna序列分析的主流。美国pe abi公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等dna测序仪，其中310型是临床检测实验室中使用最多的一
DNA指纹法
DNA Fingerprinting (David F. Betsch)the theory, procedures and applications · DNA Fingerprinting (Polyarylamide Gel) (Caltech)BAC DNA sample
DNA提取原则
1.保证核酸一级结构的完整性；2.核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；3.其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；4.其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。
DNA的定量
一、 实验原理核酸分子（DNA或RNA）由于含有嘌吟环和嘧啶环的共轭双键，在260 nm波长处有特异的紫外吸收峰，其吸收强度与核酸的浓度成正比，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。1 OD260相当于dsDNA 50 ug/ml，ssDNA 33 ug/ml和ssRNA 40 ug/ml。可以
DNA作图实验
多种酶消化 限制酶部分消化 实验方法原理 应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。
Preparing－Lambda－DNA
Preparing Lambda DNA1- Coliphage lambda DNA is a widely used vector for recombinant DNA. The middle third of its 48,000 bp contains no genes required
纯化DNA实验
从哺乳动物细胞或组织分离DNA 基因组DNA的快速纯化 纯化质粒（碱裂解法） 实验材料 细胞
Cosmid－DNA－Isolation
实验概要Isolation of high yields of highly pure cosmid DNA using PureLink™ HiPure Plasmid Purification Kits.实验原理The PureLink™ HiPure Plasmid Purification
Yeast－DNA－Prep
Protocolgrow up yeast culture to appropriate density (near saturation)spin 1.5 mls of culture for 1 min in microfuge and aspirate off supernatantresus
DNA－methyltransferase－Assay
Methylated CpG island Amplification Protocol written by Minoru Toyota2. Materials2.1. MCARestriction enzymes SmaI, XmaIT4 DNA ligaseTaq DNA polymerase
DNA酶切
一、 DNA酶切反应 1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶
DNA纯化实验
PCR清洁试剂盒纯化法 实验方法原理 硅胶膜可在高盐条件下结合DNA，又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油
DNA酶切
一、 DNA酶切反应 1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在
DNA作图实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 限制酶缓冲液仪器、耗材 电泳仪实验步骤 用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。2. 从每个反应取小份样品作电泳分析，用已知的分子量标准作对照。剩余的样品置于冰浴。3. 比较分子量标准估算出DNA片段的长度，推导出每种限制性内切酶的酶切位点数目。4.
DNA－mobility－in－gels
1. Migration of marker dyes in native polyacrylamide non-denaturing gels Gel % Bromophenol blue (BP) Xylene cyanole (XC) 3.5 100 460 5.0
DNA－Cell－Cycle
Solutions70% ethanolribonuclease (100 µg/ml DNase free, Sigma)propidium iodide ( 50 µg/ml in PBS)ProcedureHarvest cells. Spin at 1200 rpm for 5 minute
DNA重组技术
连接反应的策略 可以采用几种策略来进行外源ＤＮＡ片段和质粒载体的连接。对此，可依据外源ＤＮＡ片段未的性质，以及质粒载体与外源ＤＮＡ上限制酸切位点的性质来作出选择。（一）外源ＤＮＡ片段未的性质带有各种未的外源ＤＮＡ的克隆方法见下表：────────────────────────────────
DNA连接试验
当我们已经获得目的基因片段，选择好适当的克隆（或表达，转化）质粒载体， 并确定重组方案后，下面要进行的就是ＤＮＡ片段之间的体外连接，从而获得重组子。 此重组子可转入相应的宿主菌中用于对目的基因的扩增以及目的基因表达（如现代基因工程药物的生产），还可用于序列分析和转基因等重要生物技术的研究中。 DNA
DNA提取仪
DNA提取仪也叫核酸纯化仪，是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。
DNA酶试验
DNA酶试验是检验技师考试的内容，医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。（1）原理：某些细菌产生DNA酶，可使长链DNA水解成寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀，寡核苷酸链则溶于酸，所以当在菌落平板上加入酸后，会在菌落周围出现透明环。（2）培养基：0.2%DNA琼脂平板。（3）方法：将被检菌点种于
DNA－isolation－extraction
CTAB TECHNIQUE / Method / Schedule / Protocol FOR DNA ISOLATION / DNA EXTRACTION FROM PLANT LEAF / LEAVES SAMPLES (see also DNA RNA double isolation
植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量
第一种方法是测量260/280的比例，判断是否有蛋白质的污染。在260nm和280nm处测定DNA溶液的光吸收，A260与A280之比应在1.75-1.80之间。低于此值表明制备物中残留蛋白质成分较高或含有酚，高于此值表明有RNA的残留。第二种方法是凝胶电泳分析，看有无断裂降解。影响DNA提取质量的
DNA拓扑异构酶（DNA－topoisomerase）的相关介绍
为催化DNA拓扑学异构体相互转变的酶之总称。催化DNA链断开和结合的偶联反应，为了分析体外反应机制，用环状DNA为底物。在闭环状双链DNA的拓扑学转变中，要暂时的将DNA的一个链或两个链切断，根据异构体化的方式而分为二个型。切断一个链而改变拓扑结构的称为Ⅰ型拓扑异构酶（top -oisomera
细菌DNA浓度如何换算为DNA拷贝数
需要知道DNA浓度、DNA片段长度。即可换算成拷贝数1A260 吸光度值＝ds DNA 50 ug/ml=ss DNA 33 ug/ml=ss RNA 40 ug/ml核酸浓度＝(OD260) x (dilution factor) x [33 或40或50]= ng/ulMW 代表 克/摩尔，单位
DNA的酶切与连接——质粒DNA酶切
DNA的连接和酶切可用于：（1）利用限制性核酸内切酶切割DNA和利用DNA连接酶连接DNA是DNA重组过程中的关键步骤之一；（2）成功的酶切和有效的连接为后续的外源基因进入宿主细胞进行表达提供了有效的实验材料。实验方法原理限制性内切酶能够特异性地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附
A型DNA与B型DNA的区别对比
A型DNA与B型DNA是在两种环境下同种物质不同的形式。B型DNA：92%RH，钠盐，溶液和细胞中天然状态中的DNA多以此状态存在A型DNA：75%RH，钠盐A型DNA也是由反向的两条多核苷酸链组成的双螺旋，为右手螺旋，但螺旋体较宽而短，碱基与中心轴之倾角也不同，呈19度。
纯化DNA实验_基因组DNA的快速纯化
试剂、试剂盒尾部缓冲液蛋白酶 K仪器、耗材离心管玻璃棒实验步骤第 1 天1. 大约 1.5 cm 长的尾部活检样品放在一个 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部缓冲液的小离心管中，加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K，在 55℃ 振摇温育过夜。尾部缓冲液（配 25 ml）50 mmol/L