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本实验所用基因传递系统（基因枪）原理：低压基因递送系统（GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1），根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计，是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图1中所示，当左侧出现输入气体压力时（如：氦气），两个腔室之间将形成巨大的压力差，一旦该气体穿过装载样品的咽喉处，GDS-80 中的气体输出将为生物粒子提供足够的动能量，使它们加速到接近超音速的速度（约 300m/s）。在加速过程中，样品溶液会雾化并均匀地喷洒到靶向目标的表面上。影响转染效率的因素：在执行 GDS-80 轰击的同时，有四个主要因素影响转染效率。涉及火箭喷嘴设计原理方面，有两个：传递压力的设定和枪管的直径。通过增加输送压力的设定，可以使两个腔室中的压力差变大，从而增加生物微粒的速度，增加动能；而增大枪管直径会降低微粒的输出速度。传递距离也在实验中起到重要的作用，通过增加从枪管到目标样品的传......阅读全文
有关Stealth™ RNAi的问题什么是Stealth™ RNAi？Stealth™ RNAi是RNAi化学的新一代产品。Stealth™ RNAi分子是经过专利化学修饰的、钝末端、双链25聚体（25mer）。这些化学修饰专门用来消除诱导的细胞应激反应。它也使Stealth™ RNAi比标准的si
步骤包括:(一)siRNA的设计1. 在设计RNAi实验时，可以先在以下网站进行目标序列的筛选：GenesilAmbion2. RNAi目标序列的选取原则：(1)从转录本（mRNA）的AUG起始密码开始，寻找“AA”二连序列，并记下其3'端的19个碱基序列，作为潜在的siRNA靶位点。有研究
原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统，由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷，人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今
我做了稳定转染，从G418浓度确定到最后的单克隆化鉴定。有自己的体会也有其他战友遇到的情况, 和大家分享. 没有总结好的地方，大家补充。筛选之前确定G418浓度：1，由于每种细胞对G418的敏感性不同，而且不同的厂家生产的G418有效成分的比重不同，一般1g的粉剂中有效的G418含量大约为0.722
作为一名生物工作者，在实验室七年的时间里几乎天天和“转基因”打交道，对我个人而言，转基因只是个技术，无所谓好坏。就好比一把菜刀，可以切菜也可以杀人——完全取决于使用目的。 所以面对网上不知道什么时候就闹得沸沸扬扬的挺转反
农杆菌介导基因转化： 转化原理:农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到
对粮食作物的基因改造为全球日益增长的人口提供了一个特别的技术解决方案。 然而在转基因作物的研究上，依然存在很大的困难，由于科学家能够成功修改的植物物种有限，目前主要局限在少数几种作物上，如玉米、大豆、棉花、油菜等。 现在这一情况有望获得改变，一个以中国科学家为主的团队已经宣布了一项名为花粉磁
dsRNA消化法的主要优点在于可以跳过检测和筛选有效siRNA序列的步骤，为研究人员节省时间和金钱（注意：通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜）。不过这种方法的缺点也很明显，就是有可能引发非特异的基因沉默，特别是同源或者是密切相关的基因。现在多数的研究显示 这种情况通常不会造成影
使用方法1. 接种细胞：用胶原酶消化细胞并计数（不建议用胰酶）。转染前 18-24 小时进行细胞的铺板，以便在转染时，贴壁细胞的密度大约在 80%左右。注：培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物1）转染前将所有试剂置于室温 10 分钟。下面，以转染 24
蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术。蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系，通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。1、宿主。表达蛋白的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性不同，适合表
作为一项新兴的分子、基因表达的分析检测技术，在体生物光学成像已成功应用于生命科学、生物医学、分子生物学和药物研发等领域，取得了大量研究成果，主要包括： 在体监测肿瘤的生长和转移、基因治疗中的基因表达、机体的生理病理改变过程以及进行药物的筛选和评价等。 1、在体监测肿瘤的生长和转移
人肺癌裸鼠原位移植模型的建立可用于：（1）建立一个良好的肺癌动物实验研究平台；（2）实时监测原发肿瘤的生长和转移；（3）在细胞和分子水平对活体内的生理和病理过程进行定性或定量可视化观察。实验方法原理利用逆转录病毒转染法将增强型绿色荧光蛋白基因导入人肺癌大细胞系NCI-H460，采用外科原位移植法建立
常规的转染包括脂质体，电转化和病毒法。普通的293、Hela等细胞系，脂质体转染也能达到70-80%。而对于其他一些极难转染的细胞，如原代神经元，原代神经干细胞，免疫细胞等来说，脂质体转染不仅转化效率很低（约10%），而且细胞死亡率极高。因此有些研究人员不得不转用更加昂贵而且毒性更大的病毒包被法。病
土壤盐渍化是世界范围内限制农作物产量和品质的重大问题。棉花是改良盐碱地的先锋作物。培育棉花耐盐品种，开发利用大面积盐碱地是棉花种植的必然趋势，通过分子生物学手段挖掘棉花耐盐相关基因，创新棉花种质资源，对棉花耐盐性研究尤为重要。系统进化分析表明 GhVP 与盐生植物盐爪爪、灰绿藜的亲缘关系最近，进一步
土壤盐渍化是世界范围内限制农作物产量和品质的重大问题。棉花是改良盐碱地的先锋作物。培育棉花耐盐品种，开发利用大面积盐碱地是棉花种植的必然趋势，通过分子生物学手段挖掘棉花耐盐相关基因，创新棉花种质资源，对棉花耐盐性研究尤为重要。系统进化分析表明 GhVP 与盐生植物盐爪爪、灰绿藜的亲缘关系最近，进一步
报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其 它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。
出于粮食安全的考虑，我国正逐年增加转基因生物的进口数量。图为转基因大豆。 养猪如果全部使用配合饲料，每年将消耗粮食生产总量的40%左右。本版图片来源：昵图网 目前我国所使用的饲料大多数都含有转基因成分。用转基因作物或者其加工副产品制作的转基因饲料是否会对动物乃
将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA )和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA 且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA 复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转
近日，中国农业科学院作物科学研究所作物转基因技术与应用创新团队与美国加州大学圣地亚哥分校合作,使用RNA作为同源重组修复（HDR）的模板，并分别利用核酶自切割和具有RNA/DNA双重切割能力的CRISPR/Cpf1基因编辑系统，成功获得后代无转基因成分的抗ALS抑制剂类除草剂水稻植株。该研究是在
设想，你要把一台机器，从生产厂里运输到需要这台机器的工厂里，并让它顺利工作，要通过几个步骤呢？首先呢，我们要先把这台机器生产出来，然后打包，装到汽车上并运输到目的工厂内，安装机器，最后经过一系列调试，才能让工厂使用这台新机器进行新产品的生产。和这一过程相似，生产转基因植物，也需要上面一系列步骤。在一
转录后基因沉默（PTGS， post- transcriptional gene silencing）-最初被认为仅限于矮牵牛花和其它一些植物中的奇异现象，是目前分子生物学研究中一个最热门的话题。过去几年中，科研工作者已明确转录后基因沉默现象普遍存在于动、植物中，在机体防御病毒入侵和转座子沉默效应中
全球公认的最高效转染技术，针对免疫细胞、神经细胞、干细胞等几乎所有的难转染细胞系或原代细胞，以及悬浮细胞。 ——Amaxa品牌Nucleofector细胞核转染技术 Amaxa®Nucleofector®技术是Lonza(原Amaxa)公司的专利创新技术，它综合应用传统的电穿孔技术及细胞特异性
将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转
将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种：1.磷酸钙共沉淀将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转染的成功至关
实验材料dCTP
实验材料dCTP试剂、试剂盒乙醇次氯酸钠β-葡萄糖醛酸酶基因活性测定液溴化乙锭仪器、耗材培养室MS 培养基实验步骤一、转基因插入位点的数目第一代（ T0）转基因植株外源基因的插入位点数目，一般都是通过遗传方法进行鉴定。虽然遗传分析可以在任何世代进行，但是一般选择转基因植株自交，或与野生型测交后得到的
旧金山的一位企业家安东尼·埃文斯，为了节约能源最近冒出了一个奇特的想法：“如果我们用树来充当路灯会是怎样的呢?” 埃文斯和他的同事——生物学家欧姆里·阿米拉夫中力和凯尔·泰勒——想创造出一种真正能发光的植物。埃文斯的灵感来自于转基因生物，即拥有其他物种 DNA的动植物，这种转基因生物已
1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法（in vivo electroporation）是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用，并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单，在直流电场作用的瞬间，细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115
实验原理：转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染（永久转染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的
CRISPR/Cas已成为强有力的基因组编辑技术，并已成功地应用于 许多生物，其中包括几个植物物种。然而，在植物中，基因组编辑试剂载体的传递仍然是一个挑战。最近，来自清华大学和中科院微生物研究所的研究人员，在 Nature子刊《Scientific Reports》发表的一项研究中，报道了一个基