全自动离线二维LC纯化蛋白

本文介绍了全自动离线二维液相色谱系统在分离复杂多肽混合物及混合蛋白质方面的应用 多维液相色谱在蛋白质组学研究领域中已成为一种成熟的用于分离复杂样品的分离技术。结合离子交换与反相色谱的二维液相常以离线或在线的形式被用于蛋白及多肽的分离中。在线方式虽具有分析自动化程度较高等优点,但比较而言离线方式具有更佳的分离性能;更高的方法灵活性,能方便地针对每一维优化分离条件;对于蛋白质组学领域的研究者而言,更高的分离效率、更高的选择灵活性意味着更宽阔的视野,更高的工作效率。 本文从蛋白质组学研究中最常见的两种策略Bottom-up及Top-Down入手,介绍全自动离线多维液相色谱系统在蛋白质组学前端分离中的应用,包括分离复杂多肽混合物及混合蛋白质方面的应用。现在纳升级液相色谱已在蛋白质组学研究领域中的地位非同一般,是蛋白质组学研究中质谱分析,特别是高端质谱分析的最佳前端分离工具。戴安公司(Dionex Corp.)是该领......阅读全文

全自动离线二维LC纯化蛋白

本文介绍了全自动离线二维液相色谱系统在分离复杂多肽混合物及混合蛋白质方面的应用 多维液相色谱在蛋白质组学研究领域中已成为一种成熟的用于分离复杂样品的分离技术。结合离子交换与反相色谱的二维液相常以离线或在线的形式被用于蛋白及多肽的分离中。在线方式虽具有分析自动化程度较高等优点,但比较而言离线

二维LC×LC耦合技术解析

近年来,关于二维液相色谱的研究和讨论日趋白热化。对于实验室的常规分析和研究工作来说,这种新技术的优势何在?在哪些地方仍有开发的需求?本文将对此予以详细解读。 生命科学各领域中分析的样品日趋复杂化,相应地也促进了环境分析的技术发展。科研人员于十几年前首次应用多组分分析方法检测目标分析物

全自动蛋白纯化系统可以检测、分离、纯化多种生物样品

全自动蛋白纯化系统可完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大。可以进行生物大分子的范例纯化,已知和未知蛋白质的纯化,蛋白质的结构动力学药物作用靶点研究,药物蛋白的分离,蛋白质工程药物的合成,蛋白质的定性,组织细胞中各种蛋白质在生物体中如何发展功能,基因表达产物的分离。全自动蛋白纯化系统可以检

全自动核酸纯化系统

创新的QIAcube工作站真正实现对离心柱进行全自动操作,将你从繁琐的手动操作中解放出来。多种QIAGEN手工试剂盒均可在 QIAcube上实现自动化,无需使用特殊的自动化试剂盒,工作站操作简单,操作者无需专门的培训,实验室可以轻松实现样本制备从手动到自动化的升级。

病毒纯化和蛋白纯化区别

病毒纯化和蛋白质纯化都是生物制剂工程中常见的分离纯化方法,但它们的对象不同,具体区别如下:1. 病毒纯化与蛋白质纯化对象不同。病毒纯化的目标是将病毒从其它生物物质中进行分离和去除,以获得单个且纯净的病毒颗粒,如用于疫苗生产的病毒载体,而蛋白质纯化的目标是从生物体或来源中提取和纯化单一或多种蛋白质,如

二维液相(2DLC)是什么

这个使用的不普遍。很多人不了解的。我也是查过才知道,粘贴过来供你参考:二维液相色谱(2D—LC)是将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联起来构成的分离系统。样品经过第一维的色谱柱进入接口中,通过浓缩、捕集或切割后被切换进入第二维色谱柱及检测器中。二维液相色谱通常采用两种不同的分离机理分析样品,即

蛋白纯化策略

(六)兴风作浪的乳糖(lactose)  晚上每天都有人做报告,我觉得让我收获最大的是Bill Studier的报告。本来这个报告是后来才听到的,但是由于Burgess的模块是唯一的涉及大肠杆菌钟表达蛋白的,我把这一段提前来说说。Studier这老哥是Brookhaven National Labo

蛋白纯化服务

蛋白纯化服务内容1、纯化抗血清、免疫腹水、细胞上清得到抗体IgG或IgM纯化方法免疫亲和层析纯化法Protein A/G亲和层析法辛酸-硫酸铵沉淀法饱和硫酸铵沉淀法等2、纯化重组蛋白粗品3、纯化客户天然蛋白粗品纯化方法离子交换疏水分子排阻色谱法4、可用客户提供的抗体制备免疫亲和层析柱,使用免疫亲和层

方案7-二维色谱和质谱结合分离多肽混合物:离线方法

实验材料肽标准品可溶性酵母蛋白或其他复杂蛋白混合物胰酶试剂、试剂盒CaCl2变性溶液透析液碘乙酰胺(IAA)反相色谱溶剂SCX (强阳离子交换)色谱缓冲液三氟乙酸(TFA)仪器、耗材透析管金导线LCQDECA 离子讲质谱仪微型四通毛细管分流器RP 毛细管层析柱SCX 层析柱SEQUEST 软件实验步

安捷伦推出新型快速制备纯化(Flash-LC)系统

  安捷伦科技推出分离更快、安装快速、简单易用的新型快速制备纯化(Flash LC)系统   2011 年 3 月 15日,北京 — 安捷伦科技公司(纽约证交所: A)今日推出了 Agilent 971-FP Flash LC纯化系统,这是一款为药物化学工程师量身打造的个人快速制备纯

CEXRPLCMS在线直联技术“仙人指路”-,为生物药蛋白电荷异构体杂质研究

“研究并明确生物药相关物质和杂质的种类、形成机制、影响因素,评估其对产品的作用或影响,并进行恰当合理的控制,是贯穿于整个生物药研发、生产周期中的重要工作。”【注】电荷异质性是蛋白类药物的关键质量属性,电荷异构体可能来源于天冬酰胺脱酰胺、天冬氨酸异构化、琥珀酰亚胺形成、C端赖氨酸丢失、N端环化(焦谷氨

方案4-离线-microIMAC-富集磷酸化蛋白实验

实验材料来自目标磷酸化蛋白的多肽试剂、试剂盒乙酸铵EDTA氯化铁仪器、耗材接口和组合件氮压缩气体IMAC树脂聚酷亚胺涂层熔融石英毛细管压力管聚四氟乙烯管实验步骤一、IMAC 微柱的构建制备二、磷酸化多肽的富集展开

蛋白纯化的原理

蛋白质分离纯化常用方法有: 1、沉淀, 2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析: a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物

蛋白纯化的原理

蛋白质分离纯化常用方法有: 1、沉淀, 2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析: a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物

蛋白质纯化

蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。 一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质,一些含量十分丰富,一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质,必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。

蛋白质纯化

  蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。  一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质,一些含量十分丰富,一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质,必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。用于分离蛋白质的最重要特性有大小、电荷、疏水性和对其他分子的

纯化蛋白的原理

原理是:与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白质在水中的溶解度显著降低;而且在一定温度、pH值和离子强度下,引起蛋白质沉淀的有机溶剂的浓度不同,因此,控制有机溶剂的浓度可以分离纯化蛋白质。例如,在冰浴中磁力搅拌下,在4℃预冷的培养液中缓慢加入乙醇(-25℃),可以使冰核蛋白析出,从而纯化冰核

蛋白纯化的原理

蛋白质分离纯化常用方法有: 1、沉淀, 2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析: a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物

蛋白纯化的原理

蛋白质分离纯化常用方法有: 1、沉淀, 2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析: a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物

蛋白分离纯化步骤

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有

蛋白分离纯化步骤

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有

蛋白纯化的原理

蛋白质分离纯化常用方法有: 1、沉淀, 2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析: a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离蛋白质的分离纯化在生物

蛋白纯化的原则

蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。 蛋白的纯化大致分为粗

GST蛋白纯化步骤

制备细胞裂解物:1.每100ml培养物的细胞沉淀悬于4mlPBS;2.加入溶菌酶至终浓度1mg/ml,冰上放置30min;3.用针筒将10ml 0.2%Triton X-100强行注入细胞裂解物中,剧烈震动数次混匀;4.加入DNase和RNase至终浓度5μg/ml,4℃震动温育10min;5.4℃

蛋白质纯化

是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。常用技术有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分

2DLC助力中药质量控制

二维色谱使样品组分在两个不同的分离条件下进行分离,可显著提高分离能力,降低色谱峰重叠,同时改善色谱峰鉴定的可靠性。在不同的二维色谱技术当中,在线全二维液相色谱技术由于其在较短时间内可以获得高峰容量、样品损失低、重现性好及自动化程度高,成为对于复杂体系分离时最受关注,发展最迅速的技术。本文着重介

绿绵科技十五周年行(天津站)-发布全自动固相萃取仪

  分析测试百科网讯 2016年7月29日,绿绵科技十五周年行-新品发布会在天津和平智选假日酒店举办,北京绿绵科技有限公司总经理欧阳伟民、市场部经理于世建、产品经理李斌、天津地区销售苏磊和市场助理曲彬出席了本次会议。另外,本次会议还邀请到天津出入境检验检疫局动

反渗透清洗离线清洗

离线清洗反渗透离线清洗的条件(1)反渗透膜元件污染符合“重度污染”标准;(2)反渗透系统通过在线清洗不能够达到系统额定标准的;(3)水处理系统由于供水紧张而不能够进行在线清洗或没有在线清洗设备的;(4)反渗透污染类型较为复杂,通过在线清洗容易引起交叉污染的;(反渗透系统前段污染物可能会通过在线清洗被

免疫球蛋白纯化技术——盐析法纯化免疫球蛋白

在大多数情况下,免疫血清、杂交瘤细胞培养上清以及腹水中的抗体需经纯化后再用于各种免疫学检测中去。免疫球蛋白常用的纯化方法有盐析法、凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析以及高效液相色谱等方法。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990)实验方法原理蛋白质在水

肌肉肌球蛋白和肌动蛋白纯化实验_DEAE纯化肌肉肌球蛋白

实验材料肌肉肌球蛋白试剂、试剂盒焦磷酸钠柱平衡缓冲液柱缓冲液高盐缓冲液肌球蛋白-DEAE 透析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤一、准备 DEAE 柱和材料1. 准备贮存液和材料200 mmol/L 焦磷酸钠(NaPPi ),pH 7.0用 HCl 和 H3PO4 调 NaPPi 溶液的 pH