CRISPRCas9为突破工程化细胞活性扫除障碍
多数癌症可被免疫系统识别并攻击,但是因为肿瘤介导的免疫抑制和免疫逃逸机制而进展不一。输注体外工程化T细胞,即T细胞过继疗法(adoptedT cell therapy),能增加患者的天然抗肿瘤免疫反应。基因疗法重定向免疫特异性与基因编辑相结合具有改善疗效并增加工程化T细胞安全性的潜力。CRISPR与Cas9(CRISPR相关蛋白9)偶联核酸内切酶是一项强有力的基因编辑技术,具有靶向T细胞中多个基因来改善肿瘤免疫疗法的能力。 工程化T细胞疗法给癌症治疗带来了革命性的变化,在血液相关癌症,如白血病和淋巴瘤的治疗过程中获得了长期持续的缓解。该疗法涉及取出患者T细胞,“重新编辑”使其攻击癌细胞,然后再将它们转移回患者。使用CRISPR-Cas9的靶基因灭活(敲除)能增强T细胞活性,并且有扩增细胞疗法应用的潜力。然而直到现在,仍然不知CRISPR-Cas9编辑T细胞在回输人体后能否耐受并增殖。Stadtmauer等人发表了I期临床试......阅读全文
CRISPR/Cas9技术,热度背后的冷思考
近年来,CRISPR/Cas9基因编辑技术正在给整个科研界带来革命性变化,该技术使用CRISPR系统将Cas9蛋白和向导RNA注入小鼠受精卵,就能轻松实现基因敲除,同时,注入Donor DNA则可实现基因敲入,甚至国际著名学术期刊Genome Biology有文章指出这项新技术将很快取代使用胚胎
PNAS:利用RNA控制CRISPR/Cas9基因编辑
在过去的几年里,研究人员找到了一种方法利用天然存在的细菌免疫系统CRISPR/Cas9来失活或纠正任何生物体内的特定基因。然而,CRISPR/Cas9持续地发挥基因编辑活性,带来了额外编辑不必要位点的风险。 现在,来自加州大学圣地亚哥医学院、Ludwig癌症研究所和艾希司制药公司(Isis P
基因编辑CRISPR/Cas9新技术路在何方?
CRISPR/Cas9这项新技术使人们能更精准地对DNA代码进行控制,引发了遗传学和细胞生物学领域的革新,科学家们对它寄予厚望,希望借助它的力量,治疗包括癌症在内的疾病并进一步解开人类细胞身上笼罩的谜团。 但这一基因编辑技术也引发了科学家们的忧虑。据美国趣味科学网站报道,有科学家担心,这一新工
Nature发布CRISPR/Cas9系统应用新突破
来自洛克菲勒大学的研究人员报告称,他们利用CRISPR/Cas9成功地有效引入了特异的纯合子和杂合子突变。这一突破性的成果发布在4月27日的《自然》(Nature)杂志上。 细菌CRISPR/Cas9系统使得人们能够在许多生物中实现序列特异性的基因编辑,有望成为在人类多能干细胞中建立人类疾病模
CRISPR/Cas9:基因编辑的历史与发展
CRISPR/Cas系统是细菌和古菌特有的一种天然防御系统,用于抵抗病毒或外源性质粒的侵害。当外源基因入侵时,该防御系统的 CRISPR 序列会表达与入侵基因组序列相识别的 RNA,然后 CRISPR 相关酶(Cas)在序列识别处切割外源基因组DNA,从而达到防御目的。根据Cas蛋白的特点,可将CR
CRISPR/Cas9技术,热度背后的冷思考
近年来,CRISPR/Cas9基因编辑技术正在给整个科研界带来革命性变化,该技术使用CRISPR系统将Cas9蛋白和向导RNA注入小鼠受精卵,就能轻松实现基因敲除,同时,注入Donor DNA则可实现基因敲入,甚至国际著名学术期刊Genome Biology有文章指出这项新技术将很快取代使用胚胎
CRISPR/Cas9-技术,热度背后的冷思考
近年来,CRISPR/Cas9 基因编辑技术正在给整个科研界带来革命性变化,该技术使用 CRISPR 系统将 Cas9 蛋白和向导 RNA 注入小鼠受精卵,就能轻松实现基因敲除,同时,注入 Donor DNA 则可实现基因敲入,甚至国际著名学术期刊 Genome Biology 有文章指出这
顶级期刊:用光控制CRISPR/Cas9基因编辑
一段时间以来,科学家们一直都在尝试操纵基因。最近,美国匹兹堡大学的Alexander Deiters就发现了一种方式,以更高的精度来控制这个过程。他采用的是光。Deiters及其研究团队首次实现了这一技术突破,他们将相关研究结果发表在最近的化学领域顶级期刊《美国化学学会杂志》(Journal o
CRISPR/Cas9技术或能增强治疗肝细胞癌有效性
声动力疗法(Sonodynamic therapy,SDT)能利用超声波与药物的结合,在肿瘤位点释放有害的活性氧(ROS),然而,这种疗法并没有十分有效,因为癌细胞会激活抗氧化剂防御系统来对抗ROS。近日,一篇发表在国际杂志ACS Central Science上题为“Ultrasound-Co
检测CRISPR/Cas9基因编辑系统的副作用
目前,弗吉尼亚大学医学院的研究人员设计出一种方法,检测风靡科学界的CRISPR/Cas9基因编辑系统中意想不到的副作用。相关研究结果发表在最近的《Nature Biotechnology》。 称为CRISPR的基因打靶系统,可让我们编辑基因组中特定靶位点的遗传信息。这种新方法揭示的系统,有可能
天生一对:CRISPR/Cas9与AAV
CRISPR/Cas9已经成为体外基因组编辑的最流行系统,但体内的基因编辑方法仍然受到Cas9导入问题的限制。腺相关病毒载体(AAV)因免疫原性低而常常用于基因的体内导入。不过,化脓链球菌(spCas9)和嵌合sgRNA(总共~4.2 kb)要包装到AAV载体中还蛮有挑战性的,因为AAV只能容
利用CRISPR/Cas9技术对抗艾滋病
艾滋病病毒(HIV)是一种有效和狡猾的逆转录病毒。一旦HIV将其DNA导入宿主细胞基因组,它就有一段很长的潜伏期,并能保持休眠状态潜伏很多年。虽然医生可以调制相匹配的抗逆转录病毒药物鸡尾酒,来抑制病毒,但是如果停止治疗病毒又会再度复活。 为了使潜伏性HIV变得完全无害,美国麻省大学医学院的研究
CRISPR/Cas9和ES打靶选择的优劣比较
近年随着生物医药技术快速迭代,靶向药物、免疫疗法、基因治疗等个性化治疗方式成为生物药创新的主要方向,这其中离不开基因编辑技术的发展。从一年前的ZL之争,到基因编辑公司Editas人类基因编辑的临床试验获FDA批准可知,基因编辑技术的发展备受期待。 目前动物模型基因编辑技术大抵分为两类:ES细胞打靶
全新CRISPR/Cas9基因编辑系统助力肝癌建模
最近发表在开放获取期刊《Genome Medicine》上的一项研究,报道了一种建立肝癌小鼠模型的新方法,即利用CRISPR/Cas9系统快速将癌症相关基因敲入小鼠的DNA中。 研究的通讯作者、麻省大学医学院RNA疗法研究所的王文说:“为了更好地理解肿瘤生物学、开展临床前研究以及为病人找到潜在
生物医药领域的黑马:CRISPR/Cas9-技术
CRISPR/Cas9基因编辑技术深受研究人员的喜爱,那么它为什么如此优秀呢? CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromicrepeats)规律成簇间隔短回文重复;Cas9(CRISPR associated nucle
用CRISPR/Cas9对CART细胞进行多重基因编辑(二)
细胞系 Cell linesThe following CD19-expressing immortalized cell lines were used: Raji (Burkitt’s lymphoma cell line, ATCC-CCL86),Daudi (B lymphoblast ce
用CRISPR/Cas9对CART细胞进行多重基因编辑(三)
流式细胞术 Flow cytometry CytoFLEX (Beckman Coulter Inc) was used to perform fluorescent expression analysis. Cells were harvested on the following day
用CRISPR/Cas9对CART细胞进行多重基因编辑(一)
作者:Xiaojuan Liu1, *, Yongping Zhang2, *, Chen Cheng1, 3, *, Albert W Cheng4, Xingying Zhang1, 5, Na Li1, Changqing Xia2, 6, Xiaofei Wei7, Xiang Li
如何在构建敲除细胞株时利用好CRISPR/Cas9技术?
从2013年1月份开始到现在,近2年的时间里,CRISPR/Cas9技术的应用领域被来自全球优秀的科学家们不断的扩大。其中包括基因敲除,定点突变,定点整合,基因沉默,基因定位和CHIP等多个领域,而且这个技术的应用领域还在不断的被扩大。笔者基于多年的基因重组经验(系统的研究过ZFN / IOS /
科学家利用CRISPR/Cas9技术来成功编辑人类T细胞
近日,来自加州大学旧金山分校(UC San Francisco)的研究人员通过研究设计了一种新型策略,其可以利用名为CRISPR/Cas9的基因编辑系统来精确修饰人类机体的T细胞,相关研究发表于国际杂志PNAS上。由于机体免疫细胞在一系列疾病的发病过程中扮演着中重要的角色,因此提供一种多样化的新
如何在构建敲除细胞株时利用好CRISPR/Cas9技术?
从 2013 年 1 月份开始到现在,近 2 年的时间里,CRISPR/Cas9 技术的应用领域被来自全球优秀的科学家们不断的扩大。其中包括基因敲除,定点突变,定点整合,基因沉默,基因定位和 CHIP 等多个领域,而且这个技术的应用领域还在不断的被扩大。吉锐生物基于多年的基因重组经验(系统的研究过
如何在构建敲除细胞株时利用好CRISPR/Cas9技术?
从2013年1月份开始到现在,近2年的时间里,CRISPR/Cas9技术的应用领域被来自全球优秀的科学家们不断的扩大。其中包括基因敲除,定点突变,定点整合,基因沉默,基因定位和CHIP等多个领域,而且这个技术的应用领域还在不断的被扩大。 笔者基于多年的基因重组经验(系统的研究过ZFN / IOS
利用CRISPR/CAS9对人类干细胞系进行可诱导基因敲除
近日,来自美国威斯康星大学的华人科学家Su-Chun Zhang在国际学术期刊Cell Stem Cell发表了一项最新研究进展,他们利用CRISPR/CAS9技术实现了对人类干细胞系进行可诱导基因敲除,这一方法的成功对于研究基因在干细胞及分化不同阶段中的作用具有重要推动作用。 对基因表达进行
吉林大学:可逃避CRISPR/Cas9抑制的病毒
细菌一直在与病毒或入侵核酸进行斗争,为此它们演化出了多种防御机制,CRISPR-Cas9适应性免疫系统就是其中之一。规律成簇的间隔短回文重复CRISPR与内切酶Cas9的组合,可以在引导RNA的指引下,靶标并切割入侵者的遗传物质。2012年研究者们利用这一特点,将CRISPR系统发展成了强大的基
全新CRISPR/Cas9基因敲入系统助力肝癌建模
最近发表在开放获取期刊《基因组医学》(Genome Medicine)上的一项研究,报道了一种建立肝癌小鼠模型的新方法,即利用CRISPR/Cas9系统快速将癌症相关基因敲入小鼠的DNA中。 研究的通讯作者、麻省大学医学院RNA疗法研究所的王文说:“为了更好地理解肿瘤生物学、开展临床前研究以及
吉林大学:利用CRISPR/Cas9构建转基因猪
来自吉林大学的研究人员报告称,他们利用CRISPR/Cas9系统高效构建出了myostatin (MSTN)基因突变猪。这一研究成果发布在11月13日的《Scientific Reports》杂志上。吉林大学的逄大欣(Daxin Pang)教授及焦虎平(Huping Jiao)是这篇论文的共同通
Cell发布CRISPR/Cas9重要研究成果
来自东京大学、麻省理工学院与哈佛大学Broad研究所的研究人员,在新研究中揭示出了新凶手弗朗西丝菌Cas9(FnCas9)的结构,并利用这一结构信息对FnCas9进行改造构建出了一个变异体。研究成果发布在2月25日的《细胞》(Cell)杂志上。 京东大学医学科学研究所基础医学系Osamu Nu
吉林大学:利用CRISPR/Cas9构建转基因猪
来自吉林大学的研究人员报告称,他们利用CRISPR/Cas9系统高效构建出了myostatin (MSTN)基因突变猪。这一研究成果发布在11月13日的《Scientific Reports》杂志上。吉林大学的逄大欣(Daxin Pang)教授及焦虎平(Huping Jiao)是这篇论
Genetics:电穿孔技术或提高CRISPR/Cas9系统效率
发表于国际杂志Genetics上的一篇研究论文中,来自美国杰克逊实验室(Jackson Laboratory)的研究人员通过研究表明,利用一种电流来运输CRISPR/Cas9系统对实验室小鼠进行工程化的遗传改造,或许可以明显而且有效地改善CRISPR/Cas9系统的作用效率。 CRISPR/C
快速便宜的CRISPR/Cas9突变体筛选方法
新的基因组编辑工具——如ZFNs、TALENs以及最近的CRISPR/Cas9系统,已经大大提高了在不同动物模型中敲除基因的能力,包括斑马鱼。然而,对数量庞大的动物进行筛选,所需的时间和成本,仍然是一个瓶颈。 最近,意大利多恩动物研究所(Stazione zoologica Anton Doh