用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要的意义。 针对糖基化分析中的种种困难,沃特世公司开发了亲水作用色谱法,以及荧光-质谱结合检测的分析方法。 ACQUITY UPLC系统配合荧光检测器?(FLR)以及多聚糖分析专用(GST )色谱柱,比HPLC方法有更高的分离度。多聚糖分析专用色谱柱装填了1.7μm的酰胺吸附剂,可在HILIC模式下有效分离荧光标记的多聚糖。UPLC 配合荧光检测器®分析多聚糖可以获得很高的分离度和定量准确性,特别是对于位置异构体以及有共流出的小峰分析;而质谱检测为糖链鉴定提供了更多的结构信息。通过与标准糖链保留时间的比较,该流程能......阅读全文
用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重
使用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要
使用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要的意
使用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要
使用UPLC荧光/质谱法分析2AB标记的多聚糖混合物
蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一,在免疫识别,蛋白分泌,信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体,特别是对于单克隆抗体药物,多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。因此,发展分离效率高,检测灵敏度好的糖基化分析方法对单克隆抗体药物分析具有十分重要的意
GlycoWorks用于N糖分析中HILIC-SPE及IgG对照标准品(一)
目的展示GlycoWorksTM工作流程的各方面优势,包括在方法验证和故障排除中适用于不同SPE型式的灵活性以及所采用的人IgG对照标准品的可行性。 背景蛋白质的糖基化反应是十分有意义的翻译后修饰,可以调节蛋白质的结构和功能。生物治疗药物的糖基化作用无疑是必须进行彻底表征与监测的结构特征,尤其是在多
优化N糖分析的GlycoWorks工作流程
目的 展示GlycoWorksTM工作流程的各方面优势,包括在方法验证和故障排除中适用于不同SPE型式的灵活性以及所采用的人IgG对照标准品的可行性。 背景 蛋白质的糖基化反应是十分有意义的翻译后修饰,可以调节蛋白质的结构和功能。生物治疗药物的糖基化作用无疑是必须进行彻底表征与监测
沃特世和PREMIER-Biosoft合作推广多聚糖数据分析软件
强强联手应对生物制药分析的苛刻要求 盐湖城, 犹他州-2010年5月24日 沃特世公司(WAT:NYSE)今天宣布已经与PREMIER Biosoft国际公司(帕洛阿尔托,加州)达成协议:双方携手推广该公司的SimGlycan®软件以及沃特世质谱分析方案,用于多聚糖
沃特世与爱尔兰国家生物工艺研究培训所(NIBRT)展开合作
沃特世与爱尔兰国家生物工艺研究培训所(NIBRT)的合作 将使生物制药生产过程更加可控和可预测 企业与学术界的合作将创建全球首个UPLC多聚糖数据库,可更准确方便地进行蛋白质糖基化分析。 米尔福德, 马萨诸塞州 - 2010年5月6日沃特世(WAT:NYSE)公
非荧光标记的遗传标记分析技术
近年来,美国GENTEON公司采用激光致导的动态荧光检测技术(Dynamic fluorescence),结合多通道毛细管电泳技术,研制出Capella 400型全自动基因分析系统。该仪器采用动态荧光检测技术,彻底消除了传统荧光DNA标记检测的高成本和复杂性,可精确有效到检测未经标记的单链或双链核苷
分子间相互作用分析:荧光标记VS无标记
同无标记技术相比,利用荧光技术检测分子间相互作用的实验成本较低,例如荧光共振能量转移和凝胶迁移实验,无需昂贵的仪器便可完成结合分析。然而,基于荧光标记的检测技术也存在自己的局限性,像凝胶迁移实验就只能用来检测蛋白和核酸间的相互作用。那么在具体的实验中,研究人员该如何选择合适的检测技术呢?不要着急,下
独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对...
独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对其进行成像分析简介基于细胞成像的分析技术一般需要使用荧光染料进行标记,一些荧光标记可能对活细胞具有毒性或者只能用于固定过的细胞进行染色。无标记细胞分析技术使得研究者既无需耗时耗力的染色流程也无需担心染料对正常细胞活力的影响,就可以计算出细胞数目和细胞汇
LSCM的荧光标记
传统应用于荧光标记的染料如异硫氰酸荧光素(fluorescin isothiocyanate,FITC,ex 490 nm/em520 nm)、四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC,ex 550 nm/em 620 nm)、罗丹明(Rhodamine,ex 560 nm/em 540 ~ 660 nm)
荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)...
荧光原位杂交(FISH)和用引物介导的原位标记(PRINS)操作规程设备 1、 医用微波炉; 2、 水浴锅; 3、 OLYMPUS BX51荧光显微镜; 4、 OLYMPUS DP11数字显微照相机。FISH试剂 (1)1×PBS:由10×PBS溶液稀释而成,储存
JCLA:心脏生物标记物的即时荧光免疫分析检测
肌球蛋白肌酸激酶-MB同工酶和心肌肌钙蛋白I(cTn I)是心脏的生物标记物,这些标记物被广泛应用于协助严重心脏衰竭的早期和晚期诊断。目前,研究人员提出了一种适用于临床的心脏生物标记物的荧光免疫检测技术。该项研究结果发表在近期的《临床实验室分析》(Journal of Clinical Labora
Waters与PREMIER-Biosoft达成聚糖结构表征数据软件的合作
公司之间的设备及技术合作 以满足生物制药分析的需求 盐湖城,犹他州- 2010年5月24日 Waters公司(WAT:NYSE) 今天宣布,已与PREMIER Biosoft公司(Palo Alto, CA) 达成合作协议, Waters公司将与PREMIER Biosoft公司的S
荧光标记物质的波长
荧光标记物质的波长做荧光标记用得着。已搜索,无重复。前一个数字是激发波长,后一个是发射波长Fluorochrome--Excitation Wavelength--Emission WavelengthAcid Fuchsin 540 630Acridine Orange(Bound to DNA)
固相时间分辨荧光免疫分析的标记技术及标记过程中...
本研究利用BCPDA进行固相TRF IA研究,它克服了解离增强体系需增强溶液、易受环境铕离子污染、只能液相测量等缺点,简化了测量步骤。结合BCPDA标记BSA,研究标记过程中的蛋白质含量测定。为TRF IA体系提供理论依据和实验技术 。材料和方法1 材料1. 1 仪器 分光光度计,核酸蛋白检测仪,
荧光素标记抗体技术
(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力
LSCM多重荧光标记
由于大部分实验都需同时观测两个或多个细胞内的组分,需要对细胞进行多重荧光标记。这时,研究者需要综合考虑实验目的、所使用的激光共聚焦显微镜配置和已有的实验材料。通常,激光共聚焦显微镜配备 4 个激光器(405nm 半导体固体激光器、氩离子激光器、543nm 氦/氖激光器或 561nm半导体固体激光器和
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...2
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和生物素标记)(3)移入透析袋中,在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸盐缓冲液中,4℃透析过夜,更换三次缓冲液,注意避光。 (4)吸取上述醛化好的HRP溶液3ml,加入5mg IgG的碳酸盐缓冲液1ml,室温轻搅2-3小时,避光;加入5m
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...1
目前动物用单抗,在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用,大多以诊断试剂(盒)的形式提供,其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。 一、酶标记 1、辣根过氧化物酶(HRP)标记 辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖
免疫荧光标记的应用
半个多世纪以来,经过许多学者不断改进和发展,使此项技术成为微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。
荧光素FITC标记抗体的方法
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般zui多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FI
荧光素标记抗体的操作步骤
FITC荧光素标记抗体的操作步骤 www.runwelltac.com当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖
叶绿素荧光分析仪是干嘛用的
FO:初始荧光Fm:最大荧光产量F:任意时间实际荧光产量qP:光化学淬灭系数qN:非光化学淬灭系数NPQ:非光化学淬灭Y:光系统1由于供体侧限制引起的非光化学能量耗散的量子产量RFD:叶绿素下降比例ETR:表观电子传递速率PARamb:环境光合有效辐射PARtop:叶室内叶片正面光合有效辐射PARb
叶绿素荧光分析仪是干嘛用的
FO:初始荧光Fm:最大荧光产量F:任意时间实际荧光产量qP:光化学淬灭系数qN:非光化学淬灭系数NPQ:非光化学淬灭Y:光系统1由于供体侧限制引起的非光化学能量耗散的量子产量RFD:叶绿素下降比例ETR:表观电子传递速率PARamb:环境光合有效辐射PARtop:叶室内叶片正面光合有效辐射PARb
免疫荧光共标记怎么计算共标记的细胞个数
共定位的定义:共定位是对样品内两种荧光标记的信号共同分布的位置进行分析。 共定位就如字面意思上所说的,只能够表明蛋白A和B都在此细胞有表达,并且在同样的细胞内位置/细胞器。相关短语:共定位通道 PDM Channel 细胞共定位 Cellular co localization 细胞内共定位信息 c
病毒免疫荧光实验_荧光素标记抗体
实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光标记抗体方法有直接标记法和间接标记法两种。(1) 直接法:较为常用,具体步骤是:1) 抗体溶液的制备:用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 将待标记抗体稀释至 20mg/ml;2) 荧光素:根据待标记抗体的总量,按 0.01mg 荧光素/mg 蛋白
荧光原位杂交和用引物介导的原位标记(PRINS)操作规程
仪器设备 1、 医用微波炉; 2、 水浴锅; 3、 OLYMPUS BX51荧光显微镜; 4、 OLYMPUS DP11数字显微照相机。FISH试剂 (1)1×PBS:由10×PBS溶液稀释而成,储存于4℃; (2)20×SSC(pH7.0); (