中科院农资中心团队部在环境功能基因发掘方法上获进展
从环境宏基因组中挖掘功能基因通常有两条技术路线，一条是建立克隆文库后直接用筛选压力筛选阳性克隆，一条是通过设计引物，从宏基因组中克隆目标基因，然后进行功能研究。近日，中科院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心研究员李小方团队发展了第三条技术路线，实现了规模化、回避筛选压力的功能宏基因组路线，并用于金属硫蛋白基因的高通量挖掘。该研究近日发表于《环境与应用微生物学》。 金属硫蛋白是一类富含半胱氨酸的小分子蛋白，具有高效螯合金属离子的能力。当前人们对于真核生物金属硫蛋白的研究较为完善，而对细菌金属硫蛋白的了解甚少。因此，发掘新颖细菌MT基因、拓展对细菌金属硫蛋白多样性的认知，对于开发高效的重金属生物修复材料具有重要意义。 像金属硫蛋白这类基因，没有明确和方便的功能筛选压力可以使用，由于进化上的多样性，使用传统聚合酶链式反应的方式也无法实现从环境基因组中批量获取。即便使用单个引物设计的方式，由于抗性基因固有的低丰度，也很难成功......阅读全文
中国成功培育世界首例基因编辑克隆犬
据中国之声《央广新闻》报道，北京一家生物科技公司7月5日对外宣布，该公司成功培育出我国首例体细胞克隆犬“龙龙”，这是世界首例基因编辑的克隆犬。说到“克隆”这个词，很多人会想到世界上第一例运用这项技术培育出的动物——克隆羊“多莉”，它标志着生物体通过体细胞进行无性繁殖的克隆技术，成为现实。 这之
成功克隆PKD第一个致病基因
近日，来自复旦大学、福建医科大学与中国科学院上海神经科学研究所的研究人员应用先进的全外显子测序技术，在8个家族性发作性运动诱发性运动障碍（简称为PKD）家系中，发现PRRT2基因上存在3种截短突变，并通过多层次验证，结合PRRT2基因表达及蛋白定位研究，最终成功克隆了家族性PKD的第一个致病基因
基因克隆(gene－clone)的几种常用方法介绍1
基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。1 根据已知序列克隆基因对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最
血清学选克隆新抗原或新基因
实验材料血清试剂、试剂盒E.coli phagelysateTBSTNZY agar platesMgSO4IPGTTBSBCIP-NBTSM bufferchloroformLB培养基仪器、耗材nitrocellulose membranes滤纸恒温培养箱-80℃低温储藏箱分光光度计低温离心机恒温
新研究克隆出提高玉米蛋白含量关键基因
巫永睿（中）团队在三亚南繁的试验田里。受访者供图■本报记者 张双虎 ■黄辛 有测算表明，普通玉米蛋白含量每提高1个百分点，相当于中国每年可以少进口近800万吨大豆。而科学家在最新的研究中，已成功将玉米蛋白含量提高了4个百分点。 11月17日，《自然》发表中科院分子植物科学卓越创
猪克隆胚胎发育关键候选基因被找到
近日，中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物基因工程与种质创新团队研究发现与猪体细胞克隆胚胎初次分裂时间相关的关键候选基因，为提高猪克隆胚胎的发育效率、解析体细胞克隆机制提供了理论基础。相关研究成果在线发表在《基因》上。 该团队研究员牟玉莲介绍，猪体细胞克隆技术是目前唯一可以通过体细胞遗传物质
血清学筛选克隆新抗原/新基因（二）
19. 第一轮筛选得到阳性克隆需要进行第二轮筛选以去除假阳性并获得阳性单克隆噬菌体。过程如第一轮筛选，只不过用直径90mm 平板；具体过程见步骤4，这时所加入的噬菌体溶液是第一轮筛选得到的噬菌体上清（见步骤18），在用前要滴定好噬菌体的滴度，噬菌斑的数量以可区分出单个克隆，同时密度不能太稀为
克隆化酵母DNA的操作实验——基因置换技术
实验材料酵母实验步骤一、整合性破坏1. 将基因的内部片段亚克隆到YIP载体。2. 在此内部片段中将质粒线性化。3. 继续整合性转化步骤3（见基本方案1）。二、基因破坏一步法1. 将合适的选择性基因亚克隆到目的基因上，必要时，可在亚克隆的同时引入一个缺失。2. 采用合适的限制性位点，从步骤1
基因克隆：高效感受态细胞制作（一）
方法一A液：1M，MnCl2：B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用无菌水配，配后不需灭菌；C液 称取CaCl2 0.10g，KCl 1.18g，全部转入细口试剂瓶，然后加入46ml三蒸水，轻轻振荡使所有组分充分溶解。将瓶塞盖上并用牛皮纸、棉线包扎，然后放入灭菌锅121℃高压灭菌备用。取1
血清学筛选克隆新抗原/新基因（一）
一、E.coli/phage 裂解液预吸附血清 1. 将E.coli /phage lysate 以1:10-20 稀释在TBST 溶液中。 2. 将4 张82mm 的nitrocellulose membranes（NC）浸入稀释后的E.coli/ phagelysate 中，室温下水平摇动30
南京农业大学PNAS克隆新基因
来自南京农业大学、中国农业科学院和中科院植物研究所的研究人员，在新研究中克隆出了一个水稻微效数量性状遗传基因座DTH2，并确定了其特征。相关论文在线发布在2月6日的《美国科学院院刊》(PNAS)上。 南京农业大学的万建民(Jianmin Wan)教授和中国科学院植物研究所的葛颂(Song
我国完成世界首例转基因克隆兔实验
上海14日消息 我国完成的世界首例转基因克隆兔到今天已存活3个月。日前在上海通过分子生物学鉴定，结果显示，实验兔含有外源的绿色荧光蛋白基因，证明其为转基因克隆兔。 左为克隆兔，右为代孕兔。来源：科技日报 据悉，研究人员在上海市新华医院经过将近一年的努力，攻克了兔体细胞基因转染、转基因细胞系
血清学选克隆新抗原或新基因
实验材料 血清试剂、试剂盒 E.coli phagelysateTBSTNZY agar plates MgSO4IPGTTBSBCIP-NBTSM bufferchloroformLB培养基仪器、耗材 nitrocellulose membranes滤纸恒温培养箱-80℃低温储藏箱分光光度计低温离
我国科学家成功克隆水稻白叶枯病“克星”基因
近日，我国科学家成功克隆水稻白叶枯病的“克星”——持久抗病基因Xa7。通过揭示Xa7高抗、广谱、持久、耐热特性的新抗病分子机制，为水稻白叶枯病的长效防控奠定了基础。 白叶枯病是我国水稻生产中的“三大病害”之一，严重影响水稻产量和品质。资料显示，20世纪80年代以前，白叶枯病常导致水稻减产20
我国科学家克隆出抗大豆锈病基因
科技日报武汉4月21日电 (记者吴纯新 通讯员张惠雯 郝青南)21日，中国农业科学院油料作物研究所宣布一项重要成果。该所科研人员历经近30年努力，在国际上首次从大豆中克隆出抗大豆锈病基因，破解了抗大豆锈病基因匮乏的世界性难题。目前，该基因的相关知识产权已申请多国发明专利，相关成果在国际期刊《自然·通
基因克隆中的三大基本指的是什么
三大基本要素是：目的基因、载体、受体细胞，其实还有一点，一般不常说，那就是工具酶。
特异正常基因的分离与克隆技术介绍
特异正常基因的分离与克隆：应用重组DNA和分子克隆技术结合基因定位研究成果，已有不少基因并将会有更多人类基因被分离和克隆，这是基因治疗的前提，在当代分子生物技术条件下，一般来说，只要有基因探针和准确的基因定位，任何基因都可被克隆。除此，如今既可人工合成DNA探针，还可用DNA合成仪在体外人工合成基因
植物所在玉米耐旱基因克隆研究中取得进展
玉米是我国最重要的粮食作物之一，其生产常常受到干旱等自然灾害的威胁，在干旱严重的年份或区域甚至面临绝收的危险。发掘控制玉米耐旱性的遗传位点、克隆玉米耐旱基因、揭示其生物学功能的分子机理，具有重要的研究价值和应用价值。中国科学院植物研究所秦峰研究组利用全球不同地区的玉米材料组成的自然变异群体，运用
基因克隆：高效感受态细胞制作（二）
4、培养后的OD值。其实这并一个非常重要的参数，只是当OD值大到一定的程度后，菌体要保持对数生长已经不太可能，因此很多指导方法上强调OD不得大于0.6，0.8等等。同时，OD值大时菌体总量大，因而感受态绝对数量要大一点，因而需要在OD值的两方面影响中找一个平衡点。5、培养基中的各种离子。经验证明，当
我国科学家克隆出抗大豆锈病基因
21日，中国农业科学院油料作物研究所宣布一项重要成果。该所科研人员历经近30年努力，在国际上首次从大豆中克隆出抗大豆锈病基因，破解了抗大豆锈病基因匮乏的世界性难题。 目前，该基因的相关知识产权已申请多国发明专利，相关成果在国际期刊《自然·通讯》发表。 作为大豆最主要病害的大豆锈病，其防治一直
依托高通量测序技术－400多个水稻基因转基因克隆工作完成
我国的水稻研究已进入了一个全新的领域，目前华大基因农能平台已经完成400多个水稻基因的转基因克隆工作，依托华大基因强大的高通量测序技术，今后将进一步加快水稻转基因育种研究工作。这是记者在6月29日结束的“水稻基因组学与农业应用研讨会”上获悉的消息。 作为世界上最早种植水稻的国家，水稻
用克隆环分离细胞克隆
实验方法原理 将集落在瓷制克隆环、玻璃环、PTFE 环或者不锈钢环中用胰蛋由酶消化后移至24 孔或12 孔板中的一个孔或者直接种于 25 cm2 的培养瓶内。 实验材料
用克隆环分离细胞克隆
实验方法原理将集落在瓷制克隆环、玻璃环、PTFE 环或者不锈钢环中用胰蛋由酶消化后移至24 孔或12 孔板中的一个孔或者直接种于 25 cm2 的培养瓶内。实验材料胰蛋白酶试剂、试剂盒硅油仪器、耗材克隆培养环巴氏吸管生长培养基多孔板无菌镊移液器粗头笔实验步骤1. 观察细胞克隆，用毡制粗头笔或 Nik
用克隆环分离细胞克隆
实验方法原理将集落在瓷制克隆环、玻璃环、PTFE 环或者不锈钢环中用胰蛋由酶消化后移至24 孔或12 孔板中的一个孔或者直接种于 25 cm2 的培养瓶内。实验材料胰蛋白酶 试剂、试剂盒
用克隆环分离细胞克隆
实验方法原理 将集落在瓷制克隆环、玻璃环、PTFE 环或者不锈钢环中用胰蛋由酶消化后移至24 孔或12 孔板中的一个孔或者直接种于 25 cm2 的培养瓶内。实验材料 胰蛋白酶试剂、试剂盒 硅油仪器、耗材 克隆培养环巴氏吸管生长培养基多孔板无菌镊移液器粗头笔实验步骤 1. 观察细胞克隆，用毡制粗头笔
单克隆与克隆的区别
无性增殖（分裂、生殖）叫做克隆，克隆是一个很大的范围，单克隆是指的单克隆抗体，它由融合的细胞得来。是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。“单”和“克隆”要分开看，克隆是因为它是无性增殖来的，通常是一种人工诱导的无性生殖方式或者自然的无性生殖方式（如植物）。是原来细胞的基因的
科研人员克隆花生抗病关键基因AhNPR3
近日，河南省农业科学院张新友院士团队与山东省农业科学院农作物种质资源研究所研究员王兴军、赵传志团队合作，研究定位并克隆了花生抗病相关的重要基因AhNPR3，并揭示了该基因在调控花生WRKY和病程相关蛋白基因中的作用。研究论文发表于The Plant Journal（《植物杂志》）。 花
克隆化基因的体外转录和翻译实验
DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接，然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分子操作的过程，因此DNA克隆又称分子克隆，基因操作或重组DNA技术。实验材料DNA试剂、试剂盒TE核苷三磷酸混合液RNA聚合酶缓冲液异丁醇NaOHTCA仪
三种植物基因克隆的策略与方法
基因的克隆就是利用体外重组技术，将特定的基因和其它DNA顺序插入到载体分子中。基因克隆的主要目标是识别、分离特异基因并获得基因的完整的全序列，确定染色体定位，阐明基因的生化功能，明确其对特定性状的遗传控制关系。通过几十年的努力由于植物 发育，生理生化，分子遗传等学科的迅速发展，使人们掌握了大量
油菜种子含油量调控基因首次被克隆
1月28日，《分子植物（Molecular Plant）》在线发表了中国农业科学院油料作物研究所王汉中院士团队最新成果。该团队在国际上首次成功克隆了农作物种子性状的第一个细胞质调控基因orf188，并揭示了该基因调控油菜种子高含油量的作用机制。该成果为油菜高含油量育种提供了新途径，为育种过程中