LCMS/MS方法检测动物组织中β兴奋剂类药物
卫生部近日汇总公布了《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单》,上海月旭公司从公布的黑名单中统计发现,包括三聚氰胺、苏丹红、孔雀石绿、人工合成色素等都在内。针对这些令人触目惊心的食品添加剂,同时也为食品安全检查和监管工作提供有力的技术支持和保障,上海月旭公司迅速组织相关人员研制出了方便、快速、准确的检测方法,现将LC-MS/MS检测动物组织中β-兴奋剂类药物的方法公布如下: 1. 适用范围 适用于动物组织中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺药物的检测。 2. 提取 将5g动物组织、15 mL乙酸乙酯、3 mL10%碳酸钠溶液置于50 mL离心管中,10000 rpm均质2 min。6000 rpm下离心2 min,将上清液转至另一离心管中。用15 mL乙酸乙酯重复提取一次,合并提取液。 向乙酸乙酯提取液中加入5 mL 0.1 mol/L的盐酸溶液,涡动1 min,然后再6000 rpm下离心1......阅读全文
动物组织块DNA的提取
【实验目的】(1)学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。(2)从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。【实验原理】DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心
动物组织块DNA的提取
实验目的 1. 学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。 2. 从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。 实验原理 DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离
动物组织块DNA的提取
实验概要学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。实验原理DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心除去变性蛋白质;RN
动物组织块DNA的提取
实验原理DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心除去变性蛋白质;RNase降解RNA,从而得到纯净的DNA分子。实验试剂1.生理盐水2.十二烷基硫酸钠(SDS)3.三
动物组织样本的前处理
一、匀浆介质的制备:一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。二、组织匀浆的制备1、取组织块(0.1g~0.2g)zui少可到2~5mg在冰冷的生理盐水中漂洗
提取动物组织DNA的方法
【实验步骤】1.组织块解冻,用生理盐水洗去血污,剪取约0.5g组织,剪小放入2.0ml离心管中,用FM-200P研磨45秒;2.加入0.45ml TES混匀,再加入50ul SDS(10%),5.0ul蛋白酶K(20mg/ml),充分混匀后,于56°C保温4-6h,每2h摇1次。3.放置到室温,加入
动物组织RNA提取及纯化
实验概要提取样品组织中的RNA并消除DNA污染实验原理Trizol裂解细胞使RNA释放beta巯基乙醇一直RNase活性酚-氯仿抽提分离RNARNase-Free DNase消除DNA污染主要试剂Trizol无水乙醇氯仿(三氯甲烷)异丙醇RQ1 RNase-Free DNase(Promega,M6
动物组织样本的前处理
一、匀浆介质的制备:一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。二、组织匀浆的制备1、取组织块(0.1g~0.2g)zui少可到2~5mg在冰冷的生理盐水中漂洗
动物组织中DNA的制备
(一)原 理DNA是所有生物体的基本组成物质。真核生物DNA主要存在于细胞核中。制备DNA时应将细胞核膜打破方能释放出来。细胞中的DNA和RNA分别与蛋白质相结合,形成脱氧核糖核蛋白及核糖核蛋白。在细胞破碎后,这两种核蛋白将混杂在一起。因此,要制备DNA首先要将这两种核蛋白分开。已知这两种核蛋白在不
世界动物卫生组织通报两国动物疫情
马耳他发生牛结核病疫情 2017年11月10日,马耳他向OIE通报称,2017年7月24日,马耳他Maghtab地区发生一起牛结核病疫情。 实验室、尸检发现,在本次疫情当中有137头牛疑似感染,其中4只发病,无牛死亡,宰杀21头。目前本次疫情仍在继续,马耳他将每周公布最新状况。 希
高通量组织研磨仪对动物器官组织的研磨
1.加钢珠1颗,设置研磨仪参数:12单位振频,1min,每种样品基本充分匀浆2. 将上述匀浆液每0.2体积 TRIzol 试剂用量的匀浆液中加入0.04体积,盖紧管盖,手动剧烈震摇15 秒钟,然后室温静置2~3 分钟。3. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。4. 小心吸取上层水相(无色)加入到新
提取动物关节软骨组织总RNA
实验目的 研磨破碎软骨组织(大鼠膝关节软骨),提取其总RNA。 实验原理 充分磨碎软骨样品(大鼠膝关节软骨),再用相关试剂提取其总RNA。 实验材料和器具样品:大鼠膝关节软骨仪器:多样品组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-24)耗材:研磨罐(上海净信,***ml),
实验动物组织标本的制备实验
实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2
哺乳动物组织的匀浆实验
实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中,而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是匀浆。蛋白酶从其他的细胞区隔中释放出来的风险很小。可以通过在匀浆缓冲液中加人蛋白酶
细胞组织动物方面的应用
快速繁殖品种 借腹怀胎提高种畜的利用率。20世纪30年代胚胎移植在绵羊和山羊中取得成功;1982年美国学者获得世界上第一胎试管牛。通过体外受精、细胞核移植技术、胚胎分割、胚胎融合等技术达到快速繁殖的目的,也有可能创造出高产奶牛、瘦肉型猪等新品种。通过胚胎工程、克隆技术等进行大熊猫、东北虎等珍稀
哺乳动物组织的匀浆实验
基本方案 附加方案:从组织匀浆液中去除黏蛋白 实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地
动物组织培养的问题有哪些?
由于影响因素过多,细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决,因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。 1.培养试剂的保存: 血清:-5oC --20oC 保存,避免反复冻融。 培养基: 2oC – 8oC避
从动物组织提取基因组DNA
实验概要本实验以哺乳动物新鲜组织为材料,学习基因组DNA提取的一般方法。实验原理基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀
动物组织研磨样品典型实验方法
TL系列动物组织研磨仪具有对称的一对高速大振幅的摇臂,通过研磨珠在样品管内来回不规则撞击及摩擦,在几秒到几分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨,最细可以达到5微米。对于不同的的样品,TL系列动物组织研磨仪需要用不同的条件来处理,这里面主要涉及研磨速度、研磨时间、研磨温度和研磨珠
如何从动物组织中裂解得到蛋白
你好,提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1:1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟(间断摇动)。然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟。吸取上清定量。根据测定量的结果将各样品总蛋白量调匀,然后等
如何从动物组织中裂解得到蛋白
提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1:1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟(间断摇动)。然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟。吸取上清定量。根据测定量的结果将各样品总蛋白量调匀,然后等体积加
世界动物卫生组织通报加拿大等三国动物疫情
食品伙伴网讯 据世界动物卫生组织(OIE)消息,近日OIE发布消息,通报加拿大、格鲁吉亚与波兰发生的动物疫情。 9月底美国农业部发布消息称,在美国屠宰的来自加拿大阿伯达的奶牛中发现1例牛结核病例。对此,加拿大食品检验局与省农业健康局对阿伯达东南部和萨斯喀彻温西南部开展检疫调查。感染源尚不清
哺乳动物组织样品RNA的抽提
哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料:Trizol试剂(Invitrogen公司)研钵,匀浆器,镊子,铝箔都高温灭菌即可;二、具体过程:1、样品在离体后应迅速冷冻在液
动物组织细胞基因组DNA提取
一、实验原理真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 DNA.真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液
动物组织细胞基因组DNA提取
一、实验原理真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液
动物细胞与组织培养的定义
中文名称动物细胞与组织培养英文名称culture of animal cell and tissue定 义从动物体内取出细胞或组织,模拟体内的生理环境,在无菌、适温和丰富的营养条件下,使离体细胞或组织生存、生长并维持结构和功能的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
实验动物组织标本的制备实验_解剖法
通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2 )保温(37 ℃)的营养液中,并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔
新技术将动物全身组织透明化
“透过动物的皮肤甚至器官直接观察到细胞结构及其相互之间的联系。”德国慕尼黑大学的一个研究小组开发出了一种新型三维透明成像技术,可让上述设想成为现实。该技术能让动物全身组织实现透明化,可在动物体内成像完整的神经系统或整个器官,有助于帮助研究人员更好地理解大脑与躯体之间的相互作用,以此为基础的数据库
动物组织/细胞总RNA的制备及检测
实验目的:使学生掌握采用Trizol抽提法从动物新鲜组织或细胞制备总RNA的实验技术,以及用紫外分光光度法检测RNA的纯度及定量、用琼脂糖电泳法检测RNA的完整性及质量。实验原理:Trizol是一种新型的总RNA即用型制备试剂,适用于从各种组织或细胞中快速分离总RNA。Trizol 试剂是由苯酚
世界动物卫生组织通报4国禽流感、蓝舌病等动物疫情
据世界动物卫生组织(OIE)消息,近日OIE发布消息,通报日本、斯洛文尼亚等4国发生的禽流感、蓝舌病等动物疫情。 2016年11月22日日本农林水产省向OIE报告称,11月15日至17日秋田县(AKITA)的2家动物园发生H5N6亚型高致病性禽流感,有2只园养黑天鹅发病、死亡。诊断性质为临