哺乳动物组织样品RNA的抽提

哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料:Trizol试剂(Invitrogen公司)研钵,匀浆器,镊子,铝箔都高温灭菌即可;二、具体过程:1、样品在离体后应迅速冷冻在液氮中,若是比较大块的组织,要尽量把组织剪切成黄豆大小的块,使液氮迅速渗透到组织内部而防止组织内部的RNA降解。组织用铝箔包好或放入冻存管中,并做好记号,注意不要把记号写在纸上,以防纸被组织的血水渗透而导致记号模糊。可以把铝箔放入纱布袋并储存在液氮中。2、在抽提RNA前,先把研钵预冷,往研钵内反复加入液氮,至少4-5次,使研钵充分预冷。从液氮罐中取出样本后,把组织块放入已预冷的研钵中进行研磨,边研磨边加液氮(图1),整个过程都不要使液氮挥干。一次研磨的组织块重量不要超过300mg。 图1 用研钵在液氮中把样品研成粉末 3、研磨到......阅读全文

哺乳动物组织的匀浆实验

实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中,而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是匀浆。蛋白酶从其他的细胞区隔中释放出来的风险很小。可以通过在匀浆缓冲液中加人蛋白酶

哺乳动物组织的匀浆实验

基本方案 附加方案:从组织匀浆液中去除黏蛋白             实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地

哺乳动物组织样品RNA的抽提

哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料:Trizol试剂(Invitrogen公司)研钵,匀浆器,镊子,铝箔都高温灭菌即可;二、具体过程:1、样品在离体后应迅速冷冻在液

从哺乳动物细胞或组织分离DNA

1. 根据样品类型,从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤 2 次,用刮棒把细胞刮入约 0.5 ml 的 TBS 中,将细胞悬液转移到冰浴的离心管中,用 1 mlTBS 冲洗培养皿,并入离心管中的细胞悬液。于 4℃ 以

哺乳动物组织的匀浆实验_基本方案

实验方法原理对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中,而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是匀浆。蛋白酶从其他的细胞区隔中释放出来的风险很小。可以通过在匀浆缓冲液中加人蛋白酶抑

哺乳动物组织的匀浆实验_从组织匀浆液中去除黏蛋白

实验方法原理黏蛋白存在于大多数生物提取物(如黏膜)中,这使蛋白的纯化工作更为复杂,因为黏蛋白会结合在层析填料上*从而引起层析柱的堵塞。用本方案可以从组织匀浆液中选择性地除去黏蛋白,这一方案是为了分离和定性研究结肠黏膜的新生长因子而建立起来的。实验材料动物组织试剂、试剂盒碳酸铵缓冲液PMSF仪器、耗材

哺乳动物社会组织与寿命有何关联?

  哺乳动物的社会组织与寿命之间有何关联?中国科学院动物研究所(中科院动物所)/中科院动物生态与保护生物学重点实验室周旭明、李明研究员团队领导完成的一项最新研究发现,群居哺乳动物可能普遍比独居哺乳动物活得更久。  这项研究结果基于对包括川金丝猴、裸鼹鼠、弓头鲸和菊头蝠等近千种哺乳动物的分析产生,可推

追踪哺乳动物组织中糖酵解中间产物的来源

    葡萄糖一直被认为是哺乳动物最重要的循环能量前体,通过分解代谢途径——糖酵解,每一分子葡萄糖直接产生2个ATP分子。糖酵解还产生NADH和丙酮酸,可在线粒体中被氧化生成额外的ATP。当线粒体呼吸受损时,丙酮酸被NADH还原为乳酸,而乳酸是细胞分泌的废物。但是,哺乳动物并没有排泄大量的乳酸,一个

研究解析哺乳动物脂肪酸的组织特异性合成与跨组织转运

哺乳动物体内的游离脂肪酸是重要的能量来源也是脂质合成的前体和关键信号分子,在维持机体代谢稳态中发挥重要作用。脂肪酸的合成与在不同组织间的分配过程受到精密调控,其失衡可能破坏脂质代谢稳态,诱发非酒精性脂肪肝、肥胖和胰岛素抵抗等代谢相关疾病。然而,科研人员对哺乳动物体内脂肪酸的组织特异性合成以及其在组织

纯化DNA实验_从哺乳动物细胞或组织分离DNA

基因纯化,可以用于(1)对大量提取的质粒DNA进行纯化;(2)常用的方法有柱层析法和氯化铯梯度离心法。实验材料细胞试剂、试剂盒TBS抽提缓冲液仪器、耗材离心管实验步骤1. 根据样品类型,从下列方法中选一个作为步骤 1 进行操作。(1) 细胞样品① 单层培养的细胞以用冰预冷的 TBS 将单层细胞洗涤

科学家发现控制哺乳动物组织再生关键基因

单个基因原来是控制哺乳动物组织再生的关键调控因子,图为小鼠组织再生过程。  与海绵、扁形虫、水螅和蝾螈这些动物界的肢体再生冠军不同,哺乳动物缺乏附肢再生的能力。如今,一项在实验室小鼠中进行的新研究,利用这项“绝技”的一个罕见例外证明了一种肿瘤抑制因子能够作为哺乳动物体内的再生能力关键

eLife:鉴定出巨噬细胞是哺乳动物组织再生的关键因子

  在正常的伤口愈合期间,巨噬细胞(一种免疫细胞)清除损伤部位的细胞碎片,并且协助产生瘢痕组织。在一项新的研究中,来自美国肯塔基大学的研究人员发现这些免疫细胞是哺乳动物体内复杂的组织再生所必需的。这一发现揭示出它们有朝一日如何可能被用来协助促进人体内的组织再生。相关研究结果于2017年5月16日发表

脉冲场凝胶电泳制备DNA(哺乳动物细胞和组织DNA的分离)

本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要,DNA 也可以从哺乳动物细胞分离出的胞核制备。经验表明:从胞核制备 DNA 没有优点,因为从完整细胞制备的 DNA 同样易于酶切。本实验来源「分子克隆实验指南第三

脉冲场凝胶电泳制备DNA(哺乳动物细胞和组织DNA的分离)

            实验方法原理 本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要,DNA 也可以从哺乳动物细胞分离出的胞核制备。经验表明:从胞核制备 DNA 没有优点,

脉冲场凝胶电泳制备DNA(哺乳动物细胞和组织DNA的分离)

实验方法原理 本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要,DNA 也可以从哺乳动物细胞分离出的胞核制备。经验表明:从胞核制备 DNA 没有优点,因为从完整细胞制备的 DNA 同样易于酶切。实验材料

核纤层和富含核纤层组分的制备实验——哺乳动物组织细胞

实验材料组织试剂、试剂盒溶液 H仪器、耗材尼龙网匀浆器实验步骤组织制备1. 切碎组织,用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗组织/组织培养物:溶液 H:15 mmol/L PIPES,pH 7.280 mmol/L KCl15 mmol/L NaCI0.5 mmol/L 精咪0.2 mmo

哺乳动物-DNA-的快速分离

根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 k

哺乳动物可通过肠道吸氧

   近日,美国辛辛那提儿童医院研究人员证明,通过直肠提供氧气或含氧液体,能够帮助小鼠等实验动物在低氧条件下存活。研究人员认为,该方法可能提供一个挽救呼吸衰竭的危重患者的新范式。相关研究结果发表于5月14日《医学》。 未参与该研究的美国科罗拉多大学胃肠病学家Sean Colgan表示:“这看起来

哺乳动物-DNA-的快速分离

实验方法原理 根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。实验材料 无 DNase 的 RNase蛋白酶 K哺乳动物组织或全血试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液乙

航运激增威胁北极哺乳动物

研究人员希望,他们的发现将促成破坏性更小的航线。图片来源:PNAS  对于鲸和北极熊来说,融化的海冰绝不仅仅意味着简单的栖息地丧失。一项最新研究表明,开放水域季节变长导致的北极航运量剧增,可能使在北极栖息的众多海洋哺乳动物处于危险境地。 随着夏季海冰覆盖量减少,诸如西北航道等航线在较温

哺乳动物-DNA-的快速分离

            实验方法原理 根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。

哺乳动物“计算时间”机制被发现

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气候突变或影响哺乳动物数量

古埃及文物帮助科学家了解随着时间的推移哺乳动物的数量是如何发生变化的。   古埃及法老陵墓上的铭文和雕刻通常会有羚羊图案。一项新研究显示,在古埃及,当发生显著的气候变化时,诸如大羚羊此类的哺乳动物的数量也会发生波动。   这项发现基于十多年前动物学家Dale Osborn开展的针对古埃及哺乳

化石揭示早期哺乳动物皮毛外观

  许多恐龙和翼龙都有艳丽的羽毛,但早期哺乳动物的皮毛颜色却很单调。对6具生活在侏罗纪和白垩纪时期的哺乳动物毛皮化石的研究表明,它们都长着灰褐色的毛发。  “它们是恐龙的食物,不想引人注目。”比利时根特大学的Matthew Shawkey表示,这种保护色有助于躲避恐龙的捕食。  过去,人们认为复原远

哺乳动物“计算时间”机制被发现

  候鸟迁徙,蝴蝶振翅,心脏律动,生命的节律演绎着自然界最美妙的生命交响乐。然而,生物体如何能感知一天的时刻变化?相关问题一直悬而未决,等待着科学家们的实验与回答。北京大学国家生物医学成像科学中心主任程和平团队通过对哺乳动物的生物钟主钟——视交叉上核(SCN)的时间计算机制研究发现,哺乳动物大脑深部

哺乳动物精核的制备实验

实验材料哺乳动物组织培养细胞(如 HeLa 细胞)试剂、试剂盒PBS裂解缓冲液缓冲液 B仪器、耗材带有 B 型研磨棒的杜恩斯匀浆器光学显微镜实验步骤1. 培养并收获 3L 1×106 细胞/ml 的哺乳动物组织培养的细胞(如 HeLa), 用 1L PBS清洗两次。2. 用 20 倍于沉淀体积(40

早期哺乳动物牙、耳如何演化?

中新网北京4月4日电 (记者 孙自法)在从爬行动物到哺乳动物的进化过程中,有两个最为重要的形态和功能变化,表现在牙齿从简单到复杂以增加食物的摄取能力、下颌头骨关节变为中耳听骨组合以提高听觉效力,二者如何演化备受学界关注。中国科学院古脊椎动物与古人类研究所(古脊椎所)发布消息说,该所毛方园研究员、张驰

哺乳动物细胞的生物特征

  哺乳动物是全身被毛,运动快速,恒温,胎生和哺乳的脊椎动物.它是脊椎动物中躯体结构,功能和行为最复杂的一个高等动物类群.鸟类和哺乳类都是从爬行动物起源的,它们分别以不同的方式适应陆栖生活所遇到的许多基本矛盾(陆地上快速运动,防止体内水分蒸发,完善的神经系统和繁殖方式),并在新陈代谢水平全面提高的基

Nature子刊:首个哺乳动物“手机”

  来自苏黎世联邦理工学院的研究人员确实地构建出了一种“手机”:他们以这种方式对哺乳动物细胞进行了重编程,使得细胞能够通过化学信号给彼此“打电话”。   打电话是一个相互交流信息的过程:A给B打电话,两者就B应该做的事情达成一致意见。一旦这样做了,B方就会给A方去电话让他或她知道。A不再回复B电话

揭秘:哺乳动物大脑的空间编码

  大脑经常被比作一台电脑,它的硬件由组装在复杂回路中的神经元组成;它的软件是管理神经元行为的大量编码。但有时,即使大脑的硬件似乎不足以完成任务,它也会表现得异常出色。例如,尽管大脑的空间感知回路似乎适合代表更小的区域,但是人类和其他哺乳动物如何设法在大规模环境中导航的,这一直是个谜。  在一项新的